| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 一、绪论 | 第10-21页 |
| 1.1 细胞凋亡概述 | 第10-12页 |
| 1.1.1 细胞凋亡定义 | 第10页 |
| 1.1.2 细胞凋亡的形态学变化 | 第10页 |
| 1.1.3 细胞凋亡的生物化学变化 | 第10-11页 |
| 1.1.4 细胞凋亡与细胞坏死的区别 | 第11-12页 |
| 1.1.5 细胞凋亡对多细胞生物的生物学意义 | 第12页 |
| 1.2 细胞色素C (CYTOCHROME C)与细胞凋亡 | 第12-13页 |
| 1.2.1 细胞色素C与哺乳动物细胞凋亡 | 第13页 |
| 1.2.2 细胞色素C与果蝇细胞凋亡 | 第13页 |
| 1.2.3 细胞色素C与鳞翅目昆虫细胞凋亡 | 第13页 |
| 1.3 CASPASE家族 | 第13-14页 |
| 1.4 APAF-1 | 第14-15页 |
| 1.4.1 CARD区 | 第14-15页 |
| 1.4.2 NOD区 | 第15页 |
| 1.4.3 WD-40区 | 第15页 |
| 1.4.4 HD2区 | 第15页 |
| 1.5 细胞凋亡通路 | 第15-19页 |
| 1.5.1 依赖Caspase的细胞凋亡通路 | 第15-19页 |
| 1.5.2 不依赖Caspase的细胞凋亡通路 | 第19页 |
| 1.6 研究的目的与意义 | 第19-21页 |
| 1.6.1 鳞翅目昆虫中的细胞凋亡研究现状 | 第19页 |
| 1.6.2 研究的目的与意义 | 第19-21页 |
| 二、实验材料与实验方法 | 第21-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-25页 |
| 2.1.1 细胞 | 第21页 |
| 2.1.2 菌种和载体 | 第21页 |
| 2.1.3 试剂和试剂盒 | 第21-22页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.5 培养基配制 | 第22-24页 |
| 2.1.6 缓冲液配制 | 第24-25页 |
| 2.1.7 昆虫细胞培养器具清洗 | 第25页 |
| 2.2 实验技术 | 第25-34页 |
| 2.2.1 质粒构建 | 第25-29页 |
| 2.2.2 DH10Bac感受态细胞制作 | 第29页 |
| 2.2.3 细胞复苏 | 第29页 |
| 2.2.4 细胞培养 | 第29页 |
| 2.2.5 细胞爬片 | 第29-30页 |
| 2.2.6 转染 | 第30页 |
| 2.2.7 放线菌素D (ActD)诱导处理 | 第30-31页 |
| 2.2.8 DAPI染色 | 第31页 |
| 2.2.9 蛋白免疫印迹实验(Western Blot WB) | 第31-32页 |
| 2.2.10 RNA提取 | 第32-33页 |
| 2.2.11 cDNA合成 | 第33页 |
| 2.2.12 Real Time-PCR | 第33-34页 |
| 2.2.14 流式细胞术(flow cytometry) | 第34页 |
| 2.3 实验方法 | 第34-39页 |
| 2.3.1 Apaf-1的RNAi实验 | 第34-35页 |
| 2.3.2 Apaf-1的过表达实验 | 第35-37页 |
| 2.3.3 Apaf-1与Cyto.C的相互作用 | 第37-39页 |
| 三、实验结果 | 第39-48页 |
| 3.1 APAF-1基因的功能研究 | 第39-46页 |
| 3.1.1 Apaf-1的RNA干扰对细胞凋亡的影响 | 第39-41页 |
| 3.1.2 Apaf-1过量表达对细胞凋亡的影响 | 第41-46页 |
| 3.2 APAF-1与CYTO. C的相互作用 | 第46-48页 |
| 3.2.1 Apaf-1与Cyto.C在TH细胞中的共定位 | 第46-47页 |
| 3.2.2 Aapf-1与Cyto.C的双分子荧光互补(BiFC) | 第47-48页 |
| 四、讨论 | 第48-50页 |
| 五、结论与展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
