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湖北省烟草赤星病病原学及遗传多样性分析

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 文献综述第13-22页
    1 烟草赤星病第13-14页
        1.1 烟草赤星病发生与危害第13-14页
        1.2 烟草赤星病流行因素第14页
    2 烟草赤星病病原的分类鉴定第14-16页
        2.1 烟草赤星病病原种类第14-15页
        2.2 链格孢菌的鉴定第15-16页
            2.2.1 形态学鉴定第15-16页
            2.2.2 分子鉴定第16页
    3 烟草赤星病的生物学特性研究第16-19页
        3.1 烟草赤星病致病机理第16-17页
            3.1.1 致病相关毒素第16-17页
            3.1.2 致病相关酶类第17页
        3.2 烟草赤星病病原菌的致病力分化第17-18页
        3.3 不同温湿度、pH对烟草赤星病菌生长的影响第18页
        3.4 不同氮源、碳源对烟草赤星病菌生长的影响第18-19页
    4 烟草赤星病菌的遗传多样性的分子标记第19-21页
        4.1 限制性片段长度多态性(RFLP)第19页
        4.2 随机扩增多态性DNA(RAPD)第19-20页
        4.3 限制性扩增片段长度多态性(AFLP)第20页
        4.4 简单重复序列(SSR)第20-21页
        4.5 简单重复序列区间(ISSR)第21页
    5 研究的目的和意义第21-22页
第二章 湖北省烤烟烟草赤星病病原鉴定第22-37页
    1 材料和方法第22-26页
        1.1 病害样来源第22页
        1.2 培养基及所用试剂第22-23页
        1.3 病原菌的单孢分离与保存第23页
        1.4 病原菌的致病性测定第23页
        1.5 病原菌的形态学鉴定第23-24页
        1.6 病原菌的分子鉴定第24-26页
            1.6.1 供试菌株第24页
            1.6.2 基因组DNA提取第24页
            1.6.3 PCR反应体系第24页
            1.6.4 PCR引物序列以及反应程序第24-25页
            1.6.5 PCR反应检测第25页
            1.6.6 PCR产物序列分析及系统发育树构建第25-26页
    2 结果与分析第26-35页
        2.1 湖北省烟草赤星病病原菌分离第26-27页
        2.2 致病性测定第27页
        2.3 病原菌的形态学鉴定结果第27-31页
        2.4 病原菌的分子鉴定第31-34页
            2.4.1 基于rDNA-ITS序列鉴定结果第31-32页
            2.4.2 基于Calmodulin序列鉴定结果第32-33页
            2.4.3 基于Plasma membrane ATPase序列鉴定结果第33-34页
            2.4.4 基于三个基因序列综合鉴定结果第34页
        2.5 四种链格孢致病菌在湖北的地理分布第34-35页
    3 小结和讨论第35-37页
第三章 湖北省烟草赤星病菌生物学特性研究第37-49页
    1 材料和方法第37-40页
        1.1 材料第37页
            1.1.1 供试菌株第37页
            1.1.2 供试植物第37页
        1.2 试验方法第37-40页
            1.2.1 不同温度条件对菌丝生长影响第37-38页
            1.2.2 不同pH值对菌丝生长的影响第38页
            1.2.3 不同碳源对菌丝生长影响第38页
            1.2.4 不同氮源对菌丝生长影响第38页
            1.2.5 不同种烟草赤星病病菌的致病力测定第38-39页
            1.2.6 不同温度对长柄链格孢致病力的影响第39页
            1.2.7 不同保湿时间对长柄链格孢致病力的影响第39-40页
            1.2.8 数据统计与分析第40页
    2 结果第40-47页
        2.1 不同温度对4种链格孢菌菌丝生长的影响第40-41页
        2.2 不同pH值对4种链格孢菌菌丝生长的影响第41页
        2.3 不同碳源对4个种链格孢菌菌丝生长的影响第41-42页
        2.4 不同氮源对4种链格孢菌菌丝生长的影响第42-43页
        2.5 不同链格孢菌的致病力比较第43-45页
        2.6 不同温度对长柄链格孢菌致病力的影响第45-46页
        2.7 不同保湿时间对长柄链格孢致病力的影响第46-47页
    3 小结和讨论第47-49页
第四章 湖北省烟草赤星病长柄链格孢遗传多样性分析第49-64页
    1 材料和方法第49-54页
        1.1 材料第49-51页
            1.1.1 供试菌株第49-50页
            1.1.2 试验仪器第50-51页
        1.2 方法第51-54页
            1.2.1 基因组DNA提取及检测第51页
            1.2.2 ISSR-PCR反应体系的建立第51-53页
                1.2.2.1 PCR反应体系第51-52页
                1.2.2.2 ISSR-PCR扩增程序第52-53页
                1.2.2.3 引物的筛选及退火温度的确定第53页
            1.2.3 遗传多样性数据统计与分析第53-54页
    2 结果第54-62页
        2.1 ISSR引物的筛选及退火温度的确定第54-56页
            2.1.1 引物的初次筛选及最佳退火温度的确定第54页
            2.1.2 引物的复筛第54-56页
                2.1.2.1 基因组DNA浓度及纯度检测第55页
                2.1.2.2 ISSR引物的复筛第55-56页
        2.2 长柄链格孢菌菌株的遗传多样性分析第56-62页
            2.2.1 长柄链格孢菌菌株的遗传多态性第56-58页
            2.2.2 长柄链格孢不同地理来源菌株的遗传多样性第58页
            2.2.3 长柄链格孢不同地理种群的遗传距离分析第58-60页
            2.2.4 烟草长柄链格孢菌(A.longipes)ISSR聚类分析结果第60-62页
    3 小结与讨论第62-64页
参考文献第64-71页
致谢第71-72页

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