摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
1 烟草赤星病 | 第13-14页 |
1.1 烟草赤星病发生与危害 | 第13-14页 |
1.2 烟草赤星病流行因素 | 第14页 |
2 烟草赤星病病原的分类鉴定 | 第14-16页 |
2.1 烟草赤星病病原种类 | 第14-15页 |
2.2 链格孢菌的鉴定 | 第15-16页 |
2.2.1 形态学鉴定 | 第15-16页 |
2.2.2 分子鉴定 | 第16页 |
3 烟草赤星病的生物学特性研究 | 第16-19页 |
3.1 烟草赤星病致病机理 | 第16-17页 |
3.1.1 致病相关毒素 | 第16-17页 |
3.1.2 致病相关酶类 | 第17页 |
3.2 烟草赤星病病原菌的致病力分化 | 第17-18页 |
3.3 不同温湿度、pH对烟草赤星病菌生长的影响 | 第18页 |
3.4 不同氮源、碳源对烟草赤星病菌生长的影响 | 第18-19页 |
4 烟草赤星病菌的遗传多样性的分子标记 | 第19-21页 |
4.1 限制性片段长度多态性(RFLP) | 第19页 |
4.2 随机扩增多态性DNA(RAPD) | 第19-20页 |
4.3 限制性扩增片段长度多态性(AFLP) | 第20页 |
4.4 简单重复序列(SSR) | 第20-21页 |
4.5 简单重复序列区间(ISSR) | 第21页 |
5 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 湖北省烤烟烟草赤星病病原鉴定 | 第22-37页 |
1 材料和方法 | 第22-26页 |
1.1 病害样来源 | 第22页 |
1.2 培养基及所用试剂 | 第22-23页 |
1.3 病原菌的单孢分离与保存 | 第23页 |
1.4 病原菌的致病性测定 | 第23页 |
1.5 病原菌的形态学鉴定 | 第23-24页 |
1.6 病原菌的分子鉴定 | 第24-26页 |
1.6.1 供试菌株 | 第24页 |
1.6.2 基因组DNA提取 | 第24页 |
1.6.3 PCR反应体系 | 第24页 |
1.6.4 PCR引物序列以及反应程序 | 第24-25页 |
1.6.5 PCR反应检测 | 第25页 |
1.6.6 PCR产物序列分析及系统发育树构建 | 第25-26页 |
2 结果与分析 | 第26-35页 |
2.1 湖北省烟草赤星病病原菌分离 | 第26-27页 |
2.2 致病性测定 | 第27页 |
2.3 病原菌的形态学鉴定结果 | 第27-31页 |
2.4 病原菌的分子鉴定 | 第31-34页 |
2.4.1 基于rDNA-ITS序列鉴定结果 | 第31-32页 |
2.4.2 基于Calmodulin序列鉴定结果 | 第32-33页 |
2.4.3 基于Plasma membrane ATPase序列鉴定结果 | 第33-34页 |
2.4.4 基于三个基因序列综合鉴定结果 | 第34页 |
2.5 四种链格孢致病菌在湖北的地理分布 | 第34-35页 |
3 小结和讨论 | 第35-37页 |
第三章 湖北省烟草赤星病菌生物学特性研究 | 第37-49页 |
1 材料和方法 | 第37-40页 |
1.1 材料 | 第37页 |
1.1.1 供试菌株 | 第37页 |
1.1.2 供试植物 | 第37页 |
1.2 试验方法 | 第37-40页 |
1.2.1 不同温度条件对菌丝生长影响 | 第37-38页 |
1.2.2 不同pH值对菌丝生长的影响 | 第38页 |
1.2.3 不同碳源对菌丝生长影响 | 第38页 |
1.2.4 不同氮源对菌丝生长影响 | 第38页 |
1.2.5 不同种烟草赤星病病菌的致病力测定 | 第38-39页 |
1.2.6 不同温度对长柄链格孢致病力的影响 | 第39页 |
1.2.7 不同保湿时间对长柄链格孢致病力的影响 | 第39-40页 |
1.2.8 数据统计与分析 | 第40页 |
2 结果 | 第40-47页 |
2.1 不同温度对4种链格孢菌菌丝生长的影响 | 第40-41页 |
2.2 不同pH值对4种链格孢菌菌丝生长的影响 | 第41页 |
2.3 不同碳源对4个种链格孢菌菌丝生长的影响 | 第41-42页 |
2.4 不同氮源对4种链格孢菌菌丝生长的影响 | 第42-43页 |
2.5 不同链格孢菌的致病力比较 | 第43-45页 |
2.6 不同温度对长柄链格孢菌致病力的影响 | 第45-46页 |
2.7 不同保湿时间对长柄链格孢致病力的影响 | 第46-47页 |
3 小结和讨论 | 第47-49页 |
第四章 湖北省烟草赤星病长柄链格孢遗传多样性分析 | 第49-64页 |
1 材料和方法 | 第49-54页 |
1.1 材料 | 第49-51页 |
1.1.1 供试菌株 | 第49-50页 |
1.1.2 试验仪器 | 第50-51页 |
1.2 方法 | 第51-54页 |
1.2.1 基因组DNA提取及检测 | 第51页 |
1.2.2 ISSR-PCR反应体系的建立 | 第51-53页 |
1.2.2.1 PCR反应体系 | 第51-52页 |
1.2.2.2 ISSR-PCR扩增程序 | 第52-53页 |
1.2.2.3 引物的筛选及退火温度的确定 | 第53页 |
1.2.3 遗传多样性数据统计与分析 | 第53-54页 |
2 结果 | 第54-62页 |
2.1 ISSR引物的筛选及退火温度的确定 | 第54-56页 |
2.1.1 引物的初次筛选及最佳退火温度的确定 | 第54页 |
2.1.2 引物的复筛 | 第54-56页 |
2.1.2.1 基因组DNA浓度及纯度检测 | 第55页 |
2.1.2.2 ISSR引物的复筛 | 第55-56页 |
2.2 长柄链格孢菌菌株的遗传多样性分析 | 第56-62页 |
2.2.1 长柄链格孢菌菌株的遗传多态性 | 第56-58页 |
2.2.2 长柄链格孢不同地理来源菌株的遗传多样性 | 第58页 |
2.2.3 长柄链格孢不同地理种群的遗传距离分析 | 第58-60页 |
2.2.4 烟草长柄链格孢菌(A.longipes)ISSR聚类分析结果 | 第60-62页 |
3 小结与讨论 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
致谢 | 第71-72页 |