| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-25页 |
| 1.1 DNA、RNA甲基化修饰的发现 | 第15-16页 |
| 1.1.1 DNA甲基化修饰的发现 | 第15-16页 |
| 1.1.2 RNA甲基化修饰的发现 | 第16页 |
| 1.2 DNA甲基化、RNA甲基化的修饰形式 | 第16-19页 |
| 1.2.1 DNA甲基化的修饰形式 | 第16-17页 |
| 1.2.2 RNA甲基化的修饰形式 | 第17-19页 |
| 1.3 DNA甲基化、RNA甲基化修饰的生物学功能 | 第19-22页 |
| 1.3.1 DNA甲基化修饰的生物学功能 | 第19-21页 |
| 1.3.2 RNA甲基化修饰的生物学功能 | 第21-22页 |
| 1.4 DNA 6mA和RNA m6A修饰研究进展 | 第22-25页 |
| 1.4.1 DNA 6mA修饰研究进展 | 第22-23页 |
| 1.4.2 RNA m6A修饰研究进展 | 第23-25页 |
| 第2章 引言 | 第25-27页 |
| 2.1 研究背景及目的意义 | 第25-26页 |
| 2.2 研究内容 | 第26页 |
| 2.3 研究技术路线 | 第26-27页 |
| 第3章 家蚕DNA 6mA与RNA m6A甲基化修饰及其修饰酶的鉴定 | 第27-43页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第27-31页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第28页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第29-31页 |
| 3.2 实验方法和步骤 | 第31-35页 |
| 3.2.1 点杂交 | 第31页 |
| 3.2.2 胚胎组织的免疫荧光 | 第31-32页 |
| 3.2.3 胚胎时期组织基因组抽提 | 第32页 |
| 3.2.4 胚胎时期组织RNA抽提 | 第32-33页 |
| 3.2.5 修饰基因的信息分析和克隆 | 第33-35页 |
| 3.3 实验结果 | 第35-41页 |
| 3.3.1 腺嘌呤N6甲基化修饰存在于家蚕胚胎发育过程中 | 第35-37页 |
| 3.3.2 DNA 6mA甲基化修饰存在于家蚕胚胎发育各时期的基因组中 | 第37页 |
| 3.3.3 RNA 6mA甲基化修饰存在于家蚕胚胎发育各时期的RNA中 | 第37-38页 |
| 3.3.4 METTL4、METTL3、METTL14的多序列比对分析 | 第38-39页 |
| 3.3.5 METTL4、METTL3、METTL14的进化树分析 | 第39-40页 |
| 3.3.6 家蚕卵胚胎发育时期Bm METTL4、Bm TET1、Bm METTL3、Bm METTL14的表达特征分析 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第4章 家蚕N6腺嘌呤甲基化修饰酶的功能研究 | 第43-63页 |
| 4.1 材料与方法 | 第43-46页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第43页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第43-44页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第44页 |
| 4.1.4 溶液配制 | 第44-46页 |
| 4.2 实验步骤 | 第46-54页 |
| 4.2.1 细胞的免疫荧光 | 第46-47页 |
| 4.2.2 点杂交 | 第47页 |
| 4.2.3 亚细胞定位重组载体的构建 | 第47-51页 |
| 4.2.4 双链RNA的合成 | 第51-52页 |
| 4.2.5 双链RNA干涉 | 第52-53页 |
| 4.2.6 干涉后的半定量检测 | 第53页 |
| 4.2.7 细胞周期分布检测 | 第53-54页 |
| 4.3 结果与分析 | 第54-62页 |
| 4.3.1 免疫荧光检测家蚕细胞N6腺嘌呤甲基化修饰 | 第54页 |
| 4.3.2 点杂交检测家蚕细胞DNA和RNA N6腺嘌呤甲基化修饰 | 第54-55页 |
| 4.3.3 腺嘌呤甲基化修饰酶的亚细胞定位分析 | 第55-56页 |
| 4.3.4 腺嘌呤甲基化修饰酶在细胞水平的干涉效果检测 | 第56-57页 |
| 4.3.5 腺嘌呤甲基化修饰酶基因干涉后对N6腺嘌呤甲基化修饰水平的影响 | 第57-58页 |
| 4.3.6 腺嘌呤甲基化修饰酶基因干涉后对细胞周期的影响 | 第58-60页 |
| 4.3.7 腺嘌呤甲基化修饰酶基因干涉后对细胞有丝分裂的影响 | 第60-62页 |
| 4.4 讨论 | 第62-63页 |
| 第5章 家蚕 6mA与m6A甲基化修饰对目标基因的调控研究 | 第63-77页 |
| 5.1 材料与方法 | 第63-65页 |
| 5.1.1 材料 | 第63页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第63-64页 |
| 5.1.3 实验试剂 | 第64页 |
| 5.1.4 溶液配制 | 第64-65页 |
| 5.2 实验方法与步骤 | 第65-67页 |
| 5.2.1 家蚕Bm E细胞基因组提取 | 第65页 |
| 5.2.2 家蚕Bm E细胞RNA提取 | 第65-66页 |
| 5.2.3 基因组的片段化处理 | 第66页 |
| 5.2.4 RNA的片段化处理 | 第66页 |
| 5.2.5 DNA与RNA的免疫沉淀 | 第66-67页 |
| 5.2.6 DNA 6mA-Seq与RNA m6A-Seq分析 | 第67页 |
| 5.2.7 定量PCR分析 | 第67页 |
| 5.3 结果与分析 | 第67-75页 |
| 5.3.1 DNA 6mA-Seq结果分析 | 第67-70页 |
| 5.3.2 RNA m6A-Seq结果分析 | 第70-73页 |
| 5.3.3 DNA 6mA-Seq与RNA m6A-Seq联合分析 | 第73-75页 |
| 5.4 讨论 | 第75-77页 |
| 第6章 综合与结论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 在读期间发表论文及课题 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
