| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 略缩词表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 卵泡的发育 | 第10-11页 |
| 1.1.1 卵泡的结构 | 第10页 |
| 1.1.2 卵泡的发育 | 第10-11页 |
| 1.2 miRNA的相关研究 | 第11-13页 |
| 1.2.1 miRNA概述 | 第11页 |
| 1.2.2 miRNA的合成 | 第11页 |
| 1.2.3 miRNA的作用机制 | 第11-12页 |
| 1.2.4 miRNA对卵巢功能的调控作用 | 第12页 |
| 1.2.5 miR-130家族的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3 BMP15的相关研究 | 第13-18页 |
| 1.3.1 TGF-β超家族概述 | 第13页 |
| 1.3.2 TGF-β超家族的信号通路 | 第13-16页 |
| 1.3.4 BMP家族的研究进展 | 第16-18页 |
| 第二章 引言 | 第18-20页 |
| 第三章 实验材料与方法 | 第20-34页 |
| 3.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 3.1.1 实验样品 | 第20页 |
| 3.1.2 试剂和耗材 | 第20-21页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第21-22页 |
| 3.1.4 主要试剂的配制 | 第22页 |
| 3.2 实验方法 | 第22-34页 |
| 3.2.1 卵巢的采集和颗粒细胞的培养 | 第22-23页 |
| 3.2.2 颗粒细胞的传代 | 第23页 |
| 3.2.3 miRNA文库的筛选 | 第23-24页 |
| 3.2.4 chi-miR-130b-5p靶基因的预测 | 第24页 |
| 3.2.5 BMP15的3’UTR片段的克隆 | 第24-26页 |
| 3.2.6 双荧光素酶报告基因重组载体的构建 | 第26-28页 |
| 3.2.7 颗粒细胞的转染 | 第28-29页 |
| 3.2.8 荧光素酶的检测 | 第29页 |
| 3.2.9 Realtime-PCR | 第29-31页 |
| 3.2.10 Westernbloting | 第31-34页 |
| 第四章 结果与分析 | 第34-42页 |
| 4.1 卵巢颗粒细胞的培养 | 第34页 |
| 4.2 miRNA文库的筛选 | 第34页 |
| 4.3 chi-miR-130b-5p靶基因的预测 | 第34-35页 |
| 4.4 BMP15-3'UTR的克隆 | 第35页 |
| 4.5 双荧光素酶报告基因重组载体的构建 | 第35-36页 |
| 4.6 荧光素酶的活性检测 | 第36-37页 |
| 4.7 Realtime-PCR结果分析 | 第37-39页 |
| 4.7.1 总RNA提取结果 | 第37-38页 |
| 4.7.2 扩增曲线 | 第38页 |
| 4.7.3 溶解曲线 | 第38页 |
| 4.7.4 Realtime-PCR检测结果分析 | 第38-39页 |
| 4.8 Westernblotting结果分析 | 第39-42页 |
| 第五章 讨论 | 第42-44页 |
| 5.1 chi-miR-130b-5p靶基因筛选 | 第42页 |
| 5.2 chi-miR-130b-5p靶基因验证 | 第42-44页 |
| 第六章 结论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52页 |