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山羊卵巢颗粒细胞中chi-miR-130b-5p的靶向基因研究

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
略缩词表第9-10页
第一章 文献综述第10-18页
    1.1 卵泡的发育第10-11页
        1.1.1 卵泡的结构第10页
        1.1.2 卵泡的发育第10-11页
    1.2 miRNA的相关研究第11-13页
        1.2.1 miRNA概述第11页
        1.2.2 miRNA的合成第11页
        1.2.3 miRNA的作用机制第11-12页
        1.2.4 miRNA对卵巢功能的调控作用第12页
        1.2.5 miR-130家族的研究进展第12-13页
    1.3 BMP15的相关研究第13-18页
        1.3.1 TGF-β超家族概述第13页
        1.3.2 TGF-β超家族的信号通路第13-16页
        1.3.4 BMP家族的研究进展第16-18页
第二章 引言第18-20页
第三章 实验材料与方法第20-34页
    3.1 实验材料第20-22页
        3.1.1 实验样品第20页
        3.1.2 试剂和耗材第20-21页
        3.1.3 实验仪器第21-22页
        3.1.4 主要试剂的配制第22页
    3.2 实验方法第22-34页
        3.2.1 卵巢的采集和颗粒细胞的培养第22-23页
        3.2.2 颗粒细胞的传代第23页
        3.2.3 miRNA文库的筛选第23-24页
        3.2.4 chi-miR-130b-5p靶基因的预测第24页
        3.2.5 BMP15的3’UTR片段的克隆第24-26页
        3.2.6 双荧光素酶报告基因重组载体的构建第26-28页
        3.2.7 颗粒细胞的转染第28-29页
        3.2.8 荧光素酶的检测第29页
        3.2.9 Realtime-PCR第29-31页
        3.2.10 Westernbloting第31-34页
第四章 结果与分析第34-42页
    4.1 卵巢颗粒细胞的培养第34页
    4.2 miRNA文库的筛选第34页
    4.3 chi-miR-130b-5p靶基因的预测第34-35页
    4.4 BMP15-3'UTR的克隆第35页
    4.5 双荧光素酶报告基因重组载体的构建第35-36页
    4.6 荧光素酶的活性检测第36-37页
    4.7 Realtime-PCR结果分析第37-39页
        4.7.1 总RNA提取结果第37-38页
        4.7.2 扩增曲线第38页
        4.7.3 溶解曲线第38页
        4.7.4 Realtime-PCR检测结果分析第38-39页
    4.8 Westernblotting结果分析第39-42页
第五章 讨论第42-44页
    5.1 chi-miR-130b-5p靶基因筛选第42页
    5.2 chi-miR-130b-5p靶基因验证第42-44页
第六章 结论第44-46页
参考文献第46-52页
致谢第52页

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