| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 SOST基因结构和功能 | 第11-12页 |
| 1.2 SOST基因的表达调控 | 第12-15页 |
| 1.2.1 转录因子对SOST基因表达的调控 | 第12-13页 |
| 1.2.2 激素对SOST基因表达调控的研究 | 第13-14页 |
| 1.2.3 SOST基因表达的表观遗传学研究 | 第14-15页 |
| 1.2.4 miRNA对SOST基因的调控作用 | 第15页 |
| 1.3 SOST基因与骨质疏松症 | 第15-18页 |
| 1.3.1 SOST基因的遗传变异与骨密度的关联研究 | 第15-16页 |
| 1.3.2 SOST基因调节骨代谢的信号通路 | 第16-18页 |
| 1.3.3 SOST临床应用与骨质疏松症治疗 | 第18页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-32页 |
| 2.1 计算分析工具与方法 | 第20-22页 |
| 2.1.1 进化分析所用计算工具 | 第20页 |
| 2.1.2 SNP功能计算分析工具 | 第20-22页 |
| 2.1.3 预测天然结合SOST基因3'UTR的miRNA工具 | 第22页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第22-26页 |
| 2.2.1 主要材料 | 第22页 |
| 2.2.2 所用载体 | 第22-24页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第25页 |
| 2.2.5 引物序列 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-32页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第26页 |
| 2.3.2 感受态细胞DH5α的制备 | 第26页 |
| 2.3.3 miRNA载体的构建 | 第26-28页 |
| 2.3.4 SOST 3'UTR载体的构建(rs75901553载体的构建) | 第28-29页 |
| 2.3.5 细胞的转染 | 第29-30页 |
| 2.3.6 双荧光素酶报告基因检测 | 第30页 |
| 2.3.7 总RNA的提取与qPCR | 第30页 |
| 2.3.8 激素对细胞的处理 | 第30页 |
| 2.3.9 miRNA的提取及miRNA RT qPCR | 第30-32页 |
| 第三章 结果与分析 | 第32-55页 |
| 3.1 SOST基因的生物信息学分析 | 第32-41页 |
| 3.1.1 SOST基因的系统进化分析 | 第32-35页 |
| 3.1.2 SOST基因SNP功能的计算分析 | 第35-39页 |
| 3.1.3 SOST 3'UTR区天然miRNA结合的预测分析 | 第39-41页 |
| 3.2 Rs75901553与miR-98/let-7d互作的实验验证 | 第41-50页 |
| 3.2.1 载体构建 | 第41-42页 |
| 3.2.2 双荧光素酶报告基因分析评价rs75901553与let-7d互作 | 第42-43页 |
| 3.2.3 双荧光素酶报告基因分析评价rs75901553与miR-98互作 | 第43页 |
| 3.2.4 双荧光素酶系统检验rs75901553 C/T Allele转录活性差异 | 第43-44页 |
| 3.2.5 SOST/rs75901553/miR-98互作的内源性分析 | 第44-50页 |
| 3.3 雌激素和甲状旁腺素对miR-98表达的影响 | 第50-55页 |
| 3.3.1 miR-98基因上游转录因子结合的预测 | 第50-51页 |
| 3.3.2 雌激素对miR-98表达的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.3 甲状旁腺素对miR-98表达的影响 | 第52-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-58页 |
| 4.1 SOST的进化 | 第55页 |
| 4.2 miR-98与骨 | 第55-56页 |
| 4.3 激素通过调控miRNA影响骨质疏松症 | 第56-58页 |
| 第五章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录 | 第66-73页 |
| 硕士期间已发表学术成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
