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构巢曲霉中瞬时受体电位通道蛋白YvcA、TrpA、TrpR在逆境响应及胞质钙稳态调控中的功能研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 绪论第9-17页
    1. 模式生物构巢曲霉第9页
    2. 真菌细胞中的钙离子信号通路第9-11页
        2.1 高亲和性钙离子转运系统(high-affinity calcium uptake system,HACS)第9-10页
        2.2 钙调磷酸酶Calcineurin (CN)第10页
        2.3 Pmr1 (plasma membrane ATP aserelated)第10页
        2.4 钙连接蛋白Calnexin (CLX)第10-11页
    3. 瞬时受体电位通道蛋白超家族(TRP sup erfamily)第11-15页
        3.1 TRP通道蛋白的重要性第11页
        3.2 TRP通道蛋白的特征第11页
        3.3 TRP通道蛋白的分类第11-13页
        3.4 TRP通道蛋白的作用第13-15页
    4. 真菌细胞壁第15-16页
    5. 本课题的研究内容及技术路线第16-17页
第二章 构巢曲霉中trp基因的生物信息学分析第17-23页
第三章 yvcA和trpA的功能研究第23-42页
    1. yvcA和trpA在其它物种中的研究进展第23页
    2. 材料与方法第23-34页
        2.1 材料第23-26页
        2.2 方法第26-34页
            2.2.1 △trpA、△cchA的构建第26-31页
            2.2.2 △yvcA△trpA等双基因敲除菌株的构建第31-32页
            2.2.3 △yvcA-AEQ等测钙菌株的构建第32-33页
            2.2.4 点菌实验第33页
            2.2.5 测钙第33-34页
    3. 实验结果第34-42页
        3.1 △yvcA、△trpA、△yvcA△trpA在低钙及高钙环境下的表型研究第34-35页
        3.2 △yvcA、△trpA、△yvcA△trpA在高渗压力等逆境下的表型研究第35-36页
        3.3 yvcA和trpA在逆境刺激下对胞内钙流的影响第36-39页
            3.3.1 Ca~(2+)刺激下,WT-AEQ、△yvcA-AEQ、△trpA-AEQ、△yvcA△trpA-AEQ胞内钙流变化的比较第36-38页
            3.3.2 H_2O_2和KOH刺激下,WT-AEQ、△yvcA-AEQ、△trpA-AEQ、△yvcA△trpA-AEQ胞内钙流变化的比较第38-39页
        3.4. yvcA和trpA与钙信号通路各组分间的功能关系第39-42页
            3.4.1 △yvcA△cchA等双基因敲除菌的表型分析第40-41页
            3.4.2 △trpA△cchA等双基因敲除菌的表型分析第41-42页
第四章 trpR的功能研究第42-61页
    1. trpR在其它物种中的研究进展第42页
    2. 材料与方法第42-48页
        2.1 材料第42-43页
        2.2 方法第43-48页
            2.2.1 菌株构建第43-44页
            2.2.2 RNA的提取及反转录第44-46页
            2.2.3 实时荧光定量PCR第46-48页
    3 实验结果第48-61页
        3.1 △trpR在不同温度下的表型第48-49页
        3.2 △trpR在低钙和高钙环境下的表型第49-50页
        3.3 Mg~(2+)等二价金属离子对△trpR的产孢恢复情况第50-51页
        3.4 高钙刺激下,WT、△trpR、△cchA、△trpR△cchA胞内钙流的比较第51页
        3.5 △trpR在多种逆境下的表型分析第51-53页
        3.6 高渗压力对△trpR在高温下的表型影响第53-54页
        3.7 △trpR中部分细胞壁合成相关基因的转录水平的变化第54-55页
        3.8 △trpR△midA和△trpR△cchA的表型分析第55-58页
        3.9 △trpR△clxA、△trp△pmrA、△trpR△cnaA的表型分析第58-61页
第五章 结论与展望第61-62页
附录第62-64页
在读期间发表的学术论文与研究成果第64-65页
致谢第65-67页
参考文献第67-71页

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