摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第9-17页 |
1. 模式生物构巢曲霉 | 第9页 |
2. 真菌细胞中的钙离子信号通路 | 第9-11页 |
2.1 高亲和性钙离子转运系统(high-affinity calcium uptake system,HACS) | 第9-10页 |
2.2 钙调磷酸酶Calcineurin (CN) | 第10页 |
2.3 Pmr1 (plasma membrane ATP aserelated) | 第10页 |
2.4 钙连接蛋白Calnexin (CLX) | 第10-11页 |
3. 瞬时受体电位通道蛋白超家族(TRP sup erfamily) | 第11-15页 |
3.1 TRP通道蛋白的重要性 | 第11页 |
3.2 TRP通道蛋白的特征 | 第11页 |
3.3 TRP通道蛋白的分类 | 第11-13页 |
3.4 TRP通道蛋白的作用 | 第13-15页 |
4. 真菌细胞壁 | 第15-16页 |
5. 本课题的研究内容及技术路线 | 第16-17页 |
第二章 构巢曲霉中trp基因的生物信息学分析 | 第17-23页 |
第三章 yvcA和trpA的功能研究 | 第23-42页 |
1. yvcA和trpA在其它物种中的研究进展 | 第23页 |
2. 材料与方法 | 第23-34页 |
2.1 材料 | 第23-26页 |
2.2 方法 | 第26-34页 |
2.2.1 △trpA、△cchA的构建 | 第26-31页 |
2.2.2 △yvcA△trpA等双基因敲除菌株的构建 | 第31-32页 |
2.2.3 △yvcA-AEQ等测钙菌株的构建 | 第32-33页 |
2.2.4 点菌实验 | 第33页 |
2.2.5 测钙 | 第33-34页 |
3. 实验结果 | 第34-42页 |
3.1 △yvcA、△trpA、△yvcA△trpA在低钙及高钙环境下的表型研究 | 第34-35页 |
3.2 △yvcA、△trpA、△yvcA△trpA在高渗压力等逆境下的表型研究 | 第35-36页 |
3.3 yvcA和trpA在逆境刺激下对胞内钙流的影响 | 第36-39页 |
3.3.1 Ca~(2+)刺激下,WT-AEQ、△yvcA-AEQ、△trpA-AEQ、△yvcA△trpA-AEQ胞内钙流变化的比较 | 第36-38页 |
3.3.2 H_2O_2和KOH刺激下,WT-AEQ、△yvcA-AEQ、△trpA-AEQ、△yvcA△trpA-AEQ胞内钙流变化的比较 | 第38-39页 |
3.4. yvcA和trpA与钙信号通路各组分间的功能关系 | 第39-42页 |
3.4.1 △yvcA△cchA等双基因敲除菌的表型分析 | 第40-41页 |
3.4.2 △trpA△cchA等双基因敲除菌的表型分析 | 第41-42页 |
第四章 trpR的功能研究 | 第42-61页 |
1. trpR在其它物种中的研究进展 | 第42页 |
2. 材料与方法 | 第42-48页 |
2.1 材料 | 第42-43页 |
2.2 方法 | 第43-48页 |
2.2.1 菌株构建 | 第43-44页 |
2.2.2 RNA的提取及反转录 | 第44-46页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR | 第46-48页 |
3 实验结果 | 第48-61页 |
3.1 △trpR在不同温度下的表型 | 第48-49页 |
3.2 △trpR在低钙和高钙环境下的表型 | 第49-50页 |
3.3 Mg~(2+)等二价金属离子对△trpR的产孢恢复情况 | 第50-51页 |
3.4 高钙刺激下,WT、△trpR、△cchA、△trpR△cchA胞内钙流的比较 | 第51页 |
3.5 △trpR在多种逆境下的表型分析 | 第51-53页 |
3.6 高渗压力对△trpR在高温下的表型影响 | 第53-54页 |
3.7 △trpR中部分细胞壁合成相关基因的转录水平的变化 | 第54-55页 |
3.8 △trpR△midA和△trpR△cchA的表型分析 | 第55-58页 |
3.9 △trpR△clxA、△trp△pmrA、△trpR△cnaA的表型分析 | 第58-61页 |
第五章 结论与展望 | 第61-62页 |
附录 | 第62-64页 |
在读期间发表的学术论文与研究成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-71页 |