| 前言 | 第1-4页 |
| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-28页 |
| ·研究背景 | 第10-14页 |
| ·siRNA的广泛应用 | 第10-11页 |
| ·抗HIV-1药物的发展现状及siRNA用于抗HIV-1预防和治疗的潜力 | 第11-13页 |
| ·siRNA应用的瓶颈问题 | 第13-14页 |
| ·siRNA干扰的作用机理 | 第14-18页 |
| ·siRNA发挥作用的过程 | 第14-16页 |
| ·RISC复合物 | 第16-17页 |
| ·siRNA的不对称性 | 第17-18页 |
| ·siRNA的脱靶效应(off-target effect) | 第18-24页 |
| ·RNA和天然免疫系统 | 第18-19页 |
| ·siRNA和miRNA | 第19-22页 |
| ·RISC复合物组装对RNA链的偏好性 | 第22-23页 |
| ·通过miRNA的机制引起的脱靶效应 | 第23页 |
| ·siRNA本质上只是一种小RNA | 第23-24页 |
| ·CCR5和不对称siRNA | 第24-28页 |
| ·CCR5作为抗HIV-1治疗的靶点与靶向CCR5的siRNA | 第24-25页 |
| ·不对称siRNA | 第25-28页 |
| 第二章 不对称siRNA对CCR5基因抑制效果的研究 | 第28-40页 |
| ·材料与方法 | 第28-34页 |
| ·细胞培养 | 第28页 |
| ·假病毒制备 | 第28-29页 |
| ·siRNA | 第29-30页 |
| ·siRNA的转染 | 第30页 |
| ·假病毒感染 | 第30-31页 |
| ·总RNA提取和逆转录 | 第31-32页 |
| ·荧光定量PCR(qPCR) | 第32-33页 |
| ·流式细胞术分析 | 第33页 |
| ·siRNA的血清稳定性 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 siRNA链特异性的研究—不对称siRNA与RISC的选择性 | 第40-56页 |
| ·材料与方法 | 第40-45页 |
| ·细胞培养 | 第40页 |
| ·siRNA | 第40-41页 |
| ·EGFP荧光报告质粒的构建 | 第41-43页 |
| ·siRNA与EGFP报告质粒的共转染 | 第43-44页 |
| ·用流式细胞术检测EGFP荧光和siRNA干扰效率的计算 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-53页 |
| ·EGFP报告质粒 | 第45-46页 |
| ·缩短siRNA的5’-端不影响RISC复合物的选择性 | 第46-50页 |
| ·对3’-端缩短的不对称siRNA的研究：3’-凸出端的作用 | 第50-53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| 第四章 不对称siRNA脱靶效应的宏观分析 | 第56-66页 |
| ·材料和方法 | 第56-59页 |
| ·细胞培养 | 第56页 |
| ·siRNA的转染 | 第56页 |
| ·细胞因子的ELISA检测 | 第56-57页 |
| ·mRNA芯片 | 第57-59页 |
| ·芯片数据分析和序列比对 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-89页 |
