摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 绪论 | 第8-18页 |
1.1 禾谷多黏菌及其传播的小麦病毒研究进展 | 第8-17页 |
1.1.1 禾谷多黏菌传播的小麦病毒种类和分布 | 第8-9页 |
1.1.2 症状与危害 | 第9-10页 |
1.1.3 病害的传播 | 第10-12页 |
1.1.4 病害的防控 | 第12页 |
1.1.5 禾谷多黏菌的检测 | 第12-13页 |
1.1.6 禾谷多黏菌的分型研究 | 第13-14页 |
1.1.7 WYMV的分子生物学研究 | 第14-17页 |
1.2 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2 禾谷多黏菌的分型鉴定及传毒规律 | 第18-35页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 小麦样品 | 第18页 |
2.1.2 试剂 | 第18页 |
2.1.3 仪器设备 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-24页 |
2.2.1 小麦田间病样的采集 | 第19页 |
2.2.2 小麦病株根部总DNA的提取 | 第19-20页 |
2.2.3 建立我国禾谷多黏菌检测体系 | 第20-21页 |
2.2.4 禾谷多黏菌ITS序列的扩增 | 第21-22页 |
2.2.5 PCR产物的纯化与回收 | 第22页 |
2.2.6 T-A克隆 | 第22页 |
2.2.7 热激转化 | 第22页 |
2.2.8 测序与序列拼接 | 第22-23页 |
2.2.9 系统进化树的构建 | 第23页 |
2.2.10 禾谷多黏菌休眠孢子堆的观察 | 第23页 |
2.2.11 小麦病株叶片总RNA的提取 | 第23页 |
2.2.12 RT-PCR检测WYMV和CWMV | 第23-24页 |
2.3 结果与分析 | 第24-32页 |
2.3.1 我国禾谷多黏菌检测体系的建立 | 第24-26页 |
2.3.2 小麦样品禾谷多黏菌与病毒的检测 | 第26-28页 |
2.3.3 两种分型比例关系的初步鉴定 | 第28页 |
2.3.4 禾谷多黏菌ITS序列比对 | 第28-29页 |
2.3.5 系统进化分析 | 第29-32页 |
2.3.6 休眠孢子堆的观察 | 第32页 |
2.4 讨论 | 第32-35页 |
3 小麦黄花叶病毒( WYMV)的遗传变异分析 | 第35-50页 |
3.1 试验材料 | 第35-36页 |
3.1.1 病毒样品的收集 | 第35-36页 |
3.1.2 试剂 | 第36页 |
3.2 试验方法 | 第36-39页 |
3.2.1 小麦叶片总RNA的提取 | 第36页 |
3.2.2 反转录获得WYMV cDNA | 第36-37页 |
3.2.3 RNA2 ORF序列扩增引物的设计 | 第37页 |
3.2.4 分段扩增RNA2的ORF序列 | 第37-38页 |
3.2.5 P1和P2基因序列的获得 | 第38页 |
3.2.6 序列分析 | 第38-39页 |
3.3 结果与分析 | 第39-48页 |
3.3.1 WYMV RNA2上P1和P2基因序列的获得 | 第39页 |
3.3.2 P1和P2的核苷酸序列分析 | 第39-46页 |
3.3.3 P1和P2氨基酸序列的变异分析 | 第46-48页 |
3.4 讨论 | 第48-50页 |
4 主要结论与进一步研究建议 | 第50-52页 |
4.1 主要结论 | 第50页 |
4.2 进一步研究建议 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
攻读硕士期间的研究成果 | 第58-61页 |
致谢 | 第61页 |