| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-37页 |
| 1.1 小菜蛾 | 第15-26页 |
| 1.1.1 小菜蛾的发生及分布 | 第15-17页 |
| 1.1.2 小菜蛾的危害 | 第17-18页 |
| 1.1.3 小菜蛾田间抗性 | 第18-24页 |
| 1.1.4 小菜蛾抗性机理 | 第24-26页 |
| 1.2 斑蝥素 | 第26-35页 |
| 1.2.1 概述 | 第26页 |
| 1.2.2 斑蝥素合成研究进展 | 第26-28页 |
| 1.2.3 斑蝥素应用研究进展 | 第28-31页 |
| 1.2.4 斑蝥素作用机理研究 | 第31-35页 |
| 1.3 论文设计思路和主要内容 | 第35-37页 |
| 第二章 斑蝥素对小菜蛾PSPs活性的影响 | 第37-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-38页 |
| 2.1.1 供试昆虫及饲养 | 第37页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第37-38页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-40页 |
| 2.2.1 小菜蛾幼虫的药剂处理 | 第38页 |
| 2.2.2 PSPs酶液制备及浓度测定 | 第38-39页 |
| 2.2.3 PSPs活性测定 | 第39页 |
| 2.2.4 体外抑制活性测定 | 第39页 |
| 2.2.5 数据处理 | 第39-40页 |
| 2.3 结果与分析 | 第40-42页 |
| 2.3.1 斑蝥素处理后小菜蛾体内PSPs活性的变化 | 第40-41页 |
| 2.3.2 斑蝥素对小菜蛾PSPs的体外抑制 | 第41-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 小菜蛾PSPs基因克隆与分析 | 第44-63页 |
| 3.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 3.1.1 供试昆虫 | 第44页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-55页 |
| 3.2.1 试虫的准备 | 第45页 |
| 3.2.2 总RNA的提取 | 第45-46页 |
| 3.2.3 反转录获得cDNA模板 | 第46-49页 |
| 3.2.4 引物设计 | 第49-51页 |
| 3.2.5 PCR扩增 | 第51-52页 |
| 3.2.6 目的片段的纯化及与载体的连接 | 第52-53页 |
| 3.2.7 感受态细胞的制备及热激转化 | 第53-54页 |
| 3.2.8 阳性克隆的筛选及测序 | 第54页 |
| 3.2.9 序列分析及系统进化构建 | 第54-55页 |
| 3.3 结果与分析 | 第55-61页 |
| 3.3.1 总RNA的提取 | 第55-56页 |
| 3.3.2 目的基因的克隆 | 第56-57页 |
| 3.3.3 序列分析 | 第57-60页 |
| 3.3.4 PSPs基因的龄期和组织表达 | 第60-61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 斑蝥素对小菜蛾PSPs基因转录水平的影响和对异源表达PSPs蛋白的作用 | 第63-81页 |
| 4.1 实验材料 | 第63-65页 |
| 4.1.1 试虫 | 第63页 |
| 4.1.2 载体和菌种 | 第63页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第63-64页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第64-65页 |
| 4.2 实验方法 | 第65-68页 |
| 4.2.1 斑蝥素对小菜蛾PSPs转录影响 | 第65页 |
| 4.2.2 重组小菜蛾PSPs的原核表达及活性测定 | 第65-68页 |
| 4.2.3 斑蝥素及类似物对重组表达蛋白的体外抑制 | 第68页 |
| 4.3 结果与分析 | 第68-76页 |
| 4.3.1 斑蝥素处理对小菜蛾PSPs基因mRNA表达水平的影响 | 第68-69页 |
| 4.3.2 小菜蛾PSPs的原核表达、纯化与活性测定 | 第69-72页 |
| 4.3.3 斑蝥素及类似物对重组小菜蛾PP5的体外抑制 | 第72-76页 |
| 4.4 讨论 | 第76-81页 |
| 第五章 斑蝥素对小菜蛾GSTs基因转录水平的影响和对异源表达GSTs蛋白的作用 | 第81-96页 |
| 5.1 实验材料 | 第81页 |
| 5.1.1 供试昆虫 | 第81页 |
| 5.1.2 载体与菌株 | 第81页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第81页 |
| 5.1.4 主要仪器 | 第81页 |
| 5.2 实验方法 | 第81-86页 |
| 5.2.1 小菜蛾GSTs基因序列获得及分析 | 第82页 |
| 5.2.2 小菜蛾GSTs基因表达分析 | 第82-83页 |
| 5.2.3 斑蝥素对小菜蛾GSTs转录水平的影响 | 第83页 |
| 5.2.4 小菜蛾部分GSTs基因的原核表达及纯化 | 第83-84页 |
| 5.2.5 重组小菜蛾GSTs蛋白活性检测 | 第84-85页 |
| 5.2.6 斑蝥素对重组小菜蛾GSTs蛋白体外作用活性 | 第85-86页 |
| 5.3 结果与分析 | 第86-92页 |
| 5.3.1 小菜蛾GSTs基因序列获得与分析 | 第86页 |
| 5.3.2 小菜蛾GSTs表达分析 | 第86-89页 |
| 5.3.3 斑蝥素对小菜蛾GSTs转录水平的影响 | 第89-90页 |
| 5.3.4 重组小菜蛾GSTs蛋白的表达、纯化及活性检测 | 第90-91页 |
| 5.3.5 斑蝥素对重组GSTs蛋白的体外作用活性 | 第91-92页 |
| 5.4 讨论 | 第92-96页 |
| 第六章 斑蝥素对小菜蛾P450s基因转录水平的影响 | 第96-105页 |
| 6.1 实验材料 | 第96页 |
| 6.1.1 供试昆虫 | 第96页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第96页 |
| 6.1.3 主要仪器 | 第96页 |
| 6.2 实验方法 | 第96-101页 |
| 6.2.1 小菜蛾P450s基因序列的获得及分析 | 第96-97页 |
| 6.2.2 斑蝥素处理对小菜蛾P450s转录水平的影响 | 第97-101页 |
| 6.3 结果与分析 | 第101-102页 |
| 6.3.1 小菜蛾CYP6家族基因的获得及分析 | 第101页 |
| 6.3.2 斑蝥素影响小菜蛾CYP6家族基因的转录水平 | 第101-102页 |
| 6.4 讨论 | 第102-105页 |
| 第七章 斑蝥素对小菜蛾sHSP基因转录水平的影响 | 第105-115页 |
| 7.1 实验材料 | 第105页 |
| 7.1.1 供试昆虫 | 第105页 |
| 7.1.2 主要试剂 | 第105页 |
| 7.1.3 主要仪器 | 第105页 |
| 7.2 实验方法 | 第105-107页 |
| 7.2.1 小菜蛾sHSP基因序列的获得及分析 | 第105-106页 |
| 7.2.2 小菜蛾sHSP基因表达分析 | 第106-107页 |
| 7.2.3 斑蝥素对小菜蛾sHSP转录的影响 | 第107页 |
| 7.3 结果与分析 | 第107-113页 |
| 7.3.1 小菜蛾sHSP基因序列获得与分析 | 第107-109页 |
| 7.3.2 小菜蛾sHSP基因时空表达 | 第109-112页 |
| 7.3.3 斑蝥素处理后小菜蛾sHSP转录水平的变化 | 第112-113页 |
| 7.4 讨论 | 第113-115页 |
| 第八章 全文总结 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-137页 |
| 附录 | 第137-179页 |
| 缩略语 | 第179-180页 |
| 致谢 | 第180-181页 |
| 作者简介 | 第181页 |
