| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1 猪细小病毒 | 第13-17页 |
| 1.1 猪细小病毒的概述 | 第13页 |
| 1.2 猪细小病毒的分子生物学研究 | 第13-14页 |
| 1.3 猪细小病毒的理化特性 | 第14-15页 |
| 1.4 猪细小病毒分型 | 第15页 |
| 1.5 猪细小病毒培养特性 | 第15-16页 |
| 1.6 猪细小病毒的致病机制 | 第16页 |
| 1.7 猪细小病毒的检测方法 | 第16-17页 |
| 2 白藜芦醇 | 第17-21页 |
| 2.1 白藜芦醇的生物学活性 | 第18页 |
| 2.2 白藜芦醇的抗病毒作用 | 第18-21页 |
| 2.2.1 白藜芦醇抗DNA病毒的研究 | 第18-19页 |
| 2.2.2 白藜芦醇抗RNA病毒的研究 | 第19-21页 |
| 3 干扰素及其所诱导抗病毒基因的抗病毒作用 | 第21-23页 |
| 3.1 干扰素的抗病毒作用 | 第21-22页 |
| 3.2 干扰素诱导的抗病毒基因的作用 | 第22-23页 |
| 4 三维组织培养及其在病毒研究中的应用 | 第23-25页 |
| 4.1 三维组织/细胞培养技术 | 第23-24页 |
| 4.2 三维培养技术的应用 | 第24-25页 |
| 5 选题的目的及意义 | 第25-27页 |
| 第二章 检测PPV实时荧光定量PCR法的建立 | 第27-35页 |
| 1 材料与方法 | 第27-30页 |
| 1.1 材料 | 第27-28页 |
| 1.1.1 病毒 | 第27页 |
| 1.1.2 实验动物 | 第27页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 1.1.4 主要试剂 | 第28页 |
| 1.2 方法 | 第28-30页 |
| 1.2.1 DNA的提取 | 第28页 |
| 1.2.2 PPVNS1基因片段的扩增 | 第28页 |
| 1.2.3 PCR产物的胶回收纯化 | 第28-29页 |
| 1.2.4 纯化的目的片段与pMD-18T载体连接及质粒的转化 | 第29页 |
| 1.2.5 PCR鉴定阳性克隆菌落 | 第29页 |
| 1.2.6 质粒提取 | 第29-30页 |
| 1.2.7 重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| 1.2.8 绝对荧光定量PCR | 第30页 |
| 2 结果 | 第30-32页 |
| 2.1 PPVNS1基因片段的扩增 | 第30-31页 |
| 2.2 重组质粒的鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3 SYBRGreenI荧光定量PCR方法的建立 | 第32页 |
| 3 讨论 | 第32-35页 |
| 第三章 白藜芦醇对PPV感染猪睾丸间质细胞的作用 | 第35-49页 |
| 1 材料与方法 | 第35-39页 |
| 1.1 材料 | 第35页 |
| 1.1.1 实验动物和PPV毒株 | 第35页 |
| 1.1.2 主要试剂及仪器 | 第35页 |
| 1.2 方法 | 第35-39页 |
| 1.2.1 仔猪睾丸间质细胞的分离与培养 | 第35-36页 |
| 1.2.2 PPV病毒滴度的测定 | 第36页 |
| 1.2.3 白藜芦醇对猪睾丸间质细胞增殖的影响 | 第36-37页 |
| 1.2.4 PPV对猪睾丸间质细胞的影响 | 第37页 |
| 1.2.5 DNA的提取和实时荧光定量PCR法 | 第37页 |
| 1.2.6 白藜芦醇对PPV感染猪睾丸间质细胞的作用 | 第37页 |
| 1.2.7 RNA提取、反转录以及qPCR | 第37-39页 |
| 1.2.8 结果分析 | 第39页 |
| 2 结果 | 第39-46页 |
| 2.1 白藜芦醇对猪睾丸间质细胞增殖的影响 | 第39-40页 |
| 2.2 PPV对猪睾丸间质细胞中的感染及病毒滴度测定 | 第40-42页 |
| 2.3 白藜芦醇对PPV感染猪睾丸间质细胞的作用效果 | 第42-44页 |
| 2.3.1 白藜芦醇对PPV感染的治疗作用 | 第42-43页 |
| 2.3.2 白藜芦醇对预防PPV感染的作用 | 第43页 |
| 2.3.3 白藜芦醇对PPV感染的猪Leydig细胞增殖的影响 | 第43-44页 |
| 2.4 白藜芦醇对PPV感染猪睾丸间质细胞中INF及抗病毒因子的影响· | 第44-46页 |
| 2.4.1 INF-β和INF-γ的表达变化 | 第44页 |
| 2.4.22 -5AS的表达变化 | 第44-45页 |
| 2.4.3 RNaseL的表达变化 | 第45页 |
| 2.4.4 Mx1的表达变化 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 4 小结 | 第47-49页 |
| 第四章 白藜芦醇对PPV感染猪睾丸组织的作用 | 第49-57页 |
| 1 材料与方法 | 第49-51页 |
| 1.1 材料 | 第49页 |
| 1.2 方法 | 第49-51页 |
| 1.2.1 仔猪睾丸组织的3D培养 | 第49页 |
| 1.2.2 组织石蜡包埋与H.E.染色 | 第49-50页 |
| 1.2.3 PPV对3D培养睾丸组织的感染 | 第50页 |
| 1.2.4 组织DNA的提取及PCR扩增 | 第50页 |
| 1.2.5 RES对PPV感染组织的作用 | 第50-51页 |
| 2 结果 | 第51-55页 |
| 2.1 猪睾丸组织的3D培养模型的建立 | 第51-52页 |
| 2.2 PPV对体外3D培养睾丸组织的感染 | 第52-54页 |
| 2.2.124 孔板培养液加PPV对组织的感染 | 第52-53页 |
| 2.2.2 病毒液预先孵育对3D培养组织的感染 | 第53-54页 |
| 2.3 白藜芦醇对PPV感染体外3D培养睾丸组织的作用效果 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-56页 |
| 4 小结 | 第56-57页 |
| 第五章 全文总结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
