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α-L-鼠李糖苷酶生产菌株的筛选及其应用

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
缩略语表第7-13页
第1章 绪论第13-25页
    1.1 黄酮类化合物第13页
    1.2 芦丁第13-15页
        1.2.1 芦丁的来源及理化性质第13-14页
        1.2.2 芦丁的药理活性第14-15页
    1.3 异槲皮素第15-18页
        1.3.1 异槲皮素的理化性质第15页
        1.3.2 异槲皮素的药理活性第15-17页
        1.3.3 异槲皮素的来源与制备第17-18页
    1.4 α-L-鼠李糖苷酶的研究概况第18-22页
        1.4.1 α-L-鼠李糖苷酶的来源第18页
        1.4.2 α-L-鼠李糖苷酶的催化位点第18-19页
        1.4.3 α-L-鼠李糖苷酶活性测定第19-20页
        1.4.4 α-L-鼠李糖苷酶的应用第20-21页
        1.4.5 α-L-鼠李糖苷酶催化水解芦丁第21-22页
    1.5 黄酮类化合物的分离纯化第22-23页
        1.5.1 硅胶柱分离法第22-23页
        1.5.2 大孔树脂分离法第23页
        1.5.3 膜分离法第23页
    1.6 本论文的研究内容及意义第23-25页
        1.6.1 研究背景第23-24页
        1.6.2 研究内容第24页
        1.6.3 研究意义第24-25页
第2章 产α-L-鼠李糖苷酶菌株的筛选及鉴定第25-35页
    2.1 引言第25页
    2.2 主要实验仪器与试剂第25-26页
        2.2.1 实验仪器第25-26页
        2.2.2 实验试剂第26页
    2.3 实验方法第26-29页
        2.3.1 培养基的配制第26-27页
        2.3.2 芦丁和异槲皮素标准曲线的制作第27页
        2.3.3 产酶菌株的初筛第27页
        2.3.4 产酶菌株的复筛第27页
        2.3.5 酶活的测定第27-28页
        2.3.6 产酶菌株的鉴定第28-29页
    2.4 结果与分析第29-34页
        2.4.1 芦丁与异槲皮素的标准曲线第29-31页
        2.4.2 产酶菌株的筛选第31页
        2.4.3 产酶菌株的鉴定第31-34页
    2.5 本章小结第34-35页
第3章 黑曲霉NCU-317发酵产α-L-鼠李糖苷酶的条件优化第35-49页
    3.1 引言第35页
    3.2 主要实验仪器与试剂第35-36页
        3.2.1 实验仪器第35-36页
        3.2.2 实验试剂第36页
    3.3 实验方法第36-39页
        3.3.1 种子液的制备第36-37页
        3.3.2 酶活的测定第37页
        3.3.3 碳源对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖酶酶活的影响第37页
        3.3.4 氮源对黑曲霉发酵NCU-317产α-L-鼠李糖酶酶活的影响第37页
        3.3.5 无机盐对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖酶酶活的影响第37-38页
        3.3.6 芦丁浓度对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖酶酶活的影响第38页
        3.3.7 初始pH值对NCU-317黑曲霉产α-L-鼠李糖酶酶活的影响第38页
        3.3.8 温度对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖酶酶活的影响第38页
        3.3.9 转速对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖酶酶活的影响第38-39页
        3.3.10 装液量对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖酶酶活的影响第39页
        3.3.11 发酵周期对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖酶酶活的影响第39页
        3.3.12 优化结果鉴定第39页
    3.4 结果与分析第39-47页
        3.4.1 碳源对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖苷酶酶活的影响第39-41页
        3.4.2 氮源对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖苷酶酶活的影响第41-42页
        3.4.3 无机盐对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖苷酶酶活的影响第42-43页
        3.4.4 芦丁浓度对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖苷酶酶活的影响第43-44页
        3.4.5 初始pH值对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖苷酶酶活的影响第44页
        3.4.6 温度对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖苷酶酶活的影响第44-45页
        3.4.7 转速对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖苷酶酶活的影响第45-46页
        3.4.8 装液量对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖苷酶酶活的影响第46页
        3.4.9 发酵周期对黑曲霉NCU-317产α-L-鼠李糖苷酶酶活的影响第46-47页
        3.4.10 黑曲霉NCU-317培养基优化第47页
    3.5 本章小结第47-49页
第4章 α-L-鼠李糖苷酶分离纯化及酶学性质研究第49-65页
    4.1 引言第49页
    4.2 主要实验仪器与试剂第49-50页
        4.2.1 实验仪器第49-50页
        4.2.2 实验试剂第50页
    4.3 实验方法第50-54页
        4.3.1 粗酶液的制备第50页
        4.3.2 酶活的测定第50-51页
        4.3.3 蛋白浓度的标准曲线第51页
        4.3.4 硫酸铵的分级沉淀第51页
        4.3.5 盐析与透析第51页
        4.3.6 凝胶色谱层析第51页
        4.3.7 酶分子量的测定第51-52页
        4.3.8 酶学性质的研究第52-53页
        4.3.9 β-D-葡萄糖苷酶酶活的测定第53页
        4.3.10 转化时间的研究第53-54页
        4.3.11 酶动力学的研究第54页
        4.3.12 酶的固定化第54页
    4.4 结果与分析第54-64页
        4.4.1 蛋白浓度的标准曲线第54-55页
        4.4.2 粗酶液的分级沉淀第55-56页
        4.4.3 凝胶色谱层析第56页
        4.4.4 纯化结果第56-57页
        4.4.5 酶分子量的测定第57-58页
        4.4.6 酶的最佳反应温度及热稳定性的研究第58-59页
        4.4.7 酶的最佳反应pH及酸碱稳定性的研究第59-60页
        4.4.8 金属离子对酶活的影响第60-61页
        4.4.9 β-D-葡萄糖苷酶酶活的测定第61页
        4.4.10 转化时间的研究第61-62页
        4.4.11 酶动力学的研究第62-63页
        4.4.12 酶的固定化第63-64页
    4.5 本章小结第64-65页
第5章 异槲皮素的制备及分离纯化第65-72页
    5.1 引言第65页
    5.2 主要实验仪器与试剂第65-66页
        5.2.1 实验仪器第65-66页
        5.2.2 实验试剂第66页
    5.3 实验方法第66-67页
        5.3.1 粗酶液的制备第66页
        5.3.2 异槲皮素的制备第66页
        5.3.3 异槲皮素的分离纯化第66-67页
        5.3.4 异槲皮素的收集第67页
        5.3.5 异槲皮素的纯度检测第67页
        5.3.6 异槲皮素的结构鉴定第67页
    5.4 结果与讨论第67-71页
        5.4.1 异槲皮素的制备第67-68页
        5.4.2 异槲皮素的分离纯化第68-69页
        5.4.3 异槲皮素的纯度检测第69页
        5.4.4 异槲皮素结构表征第69-71页
    5.5 本章小结第71-72页
第6章 总结与展望第72-74页
    6.1 总结第72-73页
    6.2 创新点第73页
    6.3 展望第73-74页
致谢第74-75页
参考文献第75-82页
攻读学位期间的研究成果第82页

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