| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 前言 | 第14-23页 |
| 流感病毒的简介 | 第14-17页 |
| 1.流感病毒的分类及特征 | 第14-15页 |
| 2.A型流感病毒的流行情况 | 第15页 |
| 3.流感病毒与宿主的相互作用 | 第15-17页 |
| miRNA的简介 | 第17-19页 |
| 1.miRNA的发现 | 第17-18页 |
| 2.miRNA的产生及功能 | 第18-19页 |
| miRNA与病毒的相互作用 | 第19-22页 |
| 1.病毒编码的miRNA在病毒感染过程中的功能 | 第19-20页 |
| 2.宿主的miRNA在病毒感染过程中的功能 | 第20-21页 |
| 3.流感病毒与miRNA | 第21-22页 |
| 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 第一章 实验材料与方法 | 第23-39页 |
| 1.1 材料 | 第23-26页 |
| 1.1.1 菌株、细胞株、病毒株和质粒 | 第23页 |
| 1.1.2 引物合成及测序 | 第23页 |
| 1.1.3 细胞培养和转染试剂 | 第23页 |
| 1.1.4 主要分子生物试剂及试剂盒 | 第23-24页 |
| 1.1.5 主要溶液的配制 | 第24-25页 |
| 1.1.6 主要实验仪器 | 第25页 |
| 1.1.7 生物学软件和数据库 | 第25-26页 |
| 1.2 主要实验方法 | 第26-39页 |
| 1.2.1 载体构建 | 第26页 |
| 1.2.2 细胞传代培养 | 第26页 |
| 1.2.3 流感病毒的扩增 | 第26页 |
| 1.2.4 病毒滴度的测定(TCID50法) | 第26-27页 |
| 1.2.5 流感病毒的感染 | 第27页 |
| 1.2.6 miRNA芯片实验 | 第27-28页 |
| 1.2.7 细胞转染 | 第28-29页 |
| 1.2.8 细胞中RNA的提取 | 第29-30页 |
| 1.2.9 细胞中总RNA(包括miRNA)的提取 | 第30-31页 |
| 1.2.10 RNA的反转录 | 第31-33页 |
| 1.2.11 实时定量PCR(Real-timePCR) | 第33-35页 |
| 1.2.12 蛋白免疫印迹(WesternBlot) | 第35-36页 |
| 1.2.13 3’UTR报告基因实验 | 第36页 |
| 1.2.14 启动子活性检测实验 | 第36-38页 |
| 1.2.15 统计分析 | 第38-39页 |
| 第二章 研究结果 | 第39-62页 |
| 2.1 流感病毒感染A549细胞 | 第39-41页 |
| 2.1.1 流感病毒的扩增与纯化 | 第39页 |
| 2.1.2 流感病毒感染后NP基因表达上调 | 第39-41页 |
| 2.1.3 流感病毒感染后细胞因子表达上调 | 第41页 |
| 2.2 流感病毒感染后miRNA芯片的筛选及qPCR验证 | 第41-46页 |
| 2.2.1 总RNA质量检测结果 | 第41-43页 |
| 2.2.2 miRNA芯片表达谱的分析 | 第43-45页 |
| 2.2.3 qPCR验证 | 第45-46页 |
| 2.3 miRNA的差异表达与流感病毒的复制直接相关 | 第46-48页 |
| 2.3.1 灭活病毒不能调节miRNA的表达 | 第46-47页 |
| 2.3.2 ploy(I:C)不能调节miRNA的表达 | 第47-48页 |
| 2.4 miRNA的靶基因预测以及生物信息学分析 | 第48-50页 |
| 2.5 miR-21-3p的功能研究 | 第50-55页 |
| 2.5.1 miR-21-3p靶基因的验证 | 第51-52页 |
| 2.5.2 HDAC8是miR-21-3p的靶基因 | 第52-53页 |
| 2.5.3 miR-21-3p促进流感病毒的复制 | 第53-54页 |
| 2.5.4 敲降HDAC8促进流感病毒的复制 | 第54-55页 |
| 2.6 miR-141和miR-200c的功能研究 | 第55-62页 |
| 2.6.1 流感病毒能够激活miR-141~200c的启动子区 | 第55-56页 |
| 2.6.2 miR-141和miR-200c靶基因的验证 | 第56-57页 |
| 2.6.3 流感病毒抑制HDAC4和XIAP蛋白的表达 | 第57页 |
| 2.6.4 XIAP是miR-200c的靶基因 | 第57-58页 |
| 2.6.5 HDAC4是miR-141和miR-200c共同靶基因 | 第58-59页 |
| 2.6.6 miR-200c抑制流感病毒的复制 | 第59-60页 |
| 2.6.7 敲降XIAP抑制流感病毒H5N1的复制 | 第60-62页 |
| 第三章 讨论 | 第62-65页 |
| 第四章 结论与展望 | 第65-67页 |
| 4.1 结论 | 第65页 |
| 4.2 展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 附录 | 第75-81页 |
| 附录一 载体构建所用引物序列 | 第75-78页 |
| 附录二 miRNA与5条被富集的通路中的靶基因相互作用图 | 第78-81页 |
| 作者在学期间取得的学术成果 | 第81-82页 |
| 简历 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
