| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 GABA_B受体结构和功能 | 第11-21页 |
| 1.2 本课题主要研究内容 | 第21-23页 |
| 2 实验原理和方法 | 第23-31页 |
| 2.1 克隆构建 | 第23页 |
| 2.2 易错PCR | 第23-24页 |
| 2.3 蛋白质表达 | 第24-26页 |
| 2.4 蛋白质纯化 | 第26-29页 |
| 2.5 蛋白质结晶筛选 | 第29-31页 |
| 3 GABA_B受体克隆、表达、纯化和晶体筛选 | 第31-50页 |
| 3.1 GABA_B受体氨基酸序列的生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 3.2 GABA_B受体在E.coli中表达纯化 | 第32-37页 |
| 3.3 GABA_B受体胞外区包涵体变复性 | 第37-40页 |
| 3.4 用易错PCR建立GABA_B受体胞外区突变库 | 第40-42页 |
| 3.5 GABA_B受体在昆虫细胞中表达纯化 | 第42-47页 |
| 3.6 讨论和展望 | 第47-50页 |
| 4 绪论 | 第50-59页 |
| 4.1 转运蛋白分类和功能 | 第50-51页 |
| 4.2 MFS分类 | 第51-52页 |
| 4.3 MFS结构特性 | 第52-55页 |
| 4.4 MFS转运机制 | 第55-56页 |
| 4.5 YajR基本信息 | 第56-58页 |
| 4.6 本课题主要研究内容 | 第58-59页 |
| 5 实验原理和方法 | 第59-67页 |
| 5.1 用E.coli蛋白质表达膜蛋白 | 第59页 |
| 5.2 硒代膜蛋白的培养 | 第59-60页 |
| 5.3 膜蛋白纯化 | 第60-62页 |
| 5.4 膜蛋白晶体筛选 | 第62-64页 |
| 5.5 膜蛋白晶体结构解析 | 第64-65页 |
| 5.6 热-荧光法(ThermoFluorescence)检测膜蛋白热稳定性 | 第65页 |
| 5.7 膜蛋白半胱氨酸交联 | 第65-67页 |
| 6 YajR表达、纯化、结晶和晶体结构测定 | 第67-104页 |
| 6.1 E.coli(BL21)YajR表达、纯化和结晶 | 第67-77页 |
| 6.2 YajR数据收集、处理和结构解析修正 | 第77-85页 |
| 6.3 YajR结构分析 | 第85-94页 |
| 6.4 讨论和展望 | 第94-104页 |
| 7 全文总结与展望 | 第104-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-119页 |
| 附录1 主要符号和缩略词表 | 第119-120页 |
| 附录2 就读期间科研成果 | 第120页 |
