| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-21页 |
| 1.1 抗菌肽简介 | 第12-14页 |
| 1.1.1 抗菌肽的定义及分类 | 第12-13页 |
| 1.1.2 抗菌肽的作用机制 | 第13-14页 |
| 1.2 防御素的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 防御素的结构特征及分类 | 第14页 |
| 1.2.2 防御素的生物活性 | 第14-17页 |
| 1.3 禽防御素的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.1 禽防御素的诱导表达 | 第17-18页 |
| 1.3.2 禽TLRs及其信号转导机制 | 第18-19页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-36页 |
| 2.1 材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第21页 |
| 2.1.2 菌种、质粒及病毒 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂及配制 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.5 主要应用软件 | 第23页 |
| 2.2 鸡AvBDs、TLRs、iNOS经IBV诱导后的组织表达差异 | 第23-29页 |
| 2.2.1 试验设计及方法 | 第23页 |
| 2.2.2 样品处理及组织总RNA提取 | 第23页 |
| 2.2.3 荧光定量PCR引物设计 | 第23-25页 |
| 2.2.4 荧光定量标准品制备 | 第25-28页 |
| 2.2.5 鸡AvBDs、TLRs、iNOS组织表达量的检测 | 第28-29页 |
| 2.3 重组鸡AvBD2、6、12蛋白的诱导表达 | 第29-33页 |
| 2.3.1 表达载体构建 | 第29-32页 |
| 2.3.2 重组蛋白诱导表达及鉴定 | 第32页 |
| 2.3.3 蛋白的纯化及复性 | 第32-33页 |
| 2.4 重组鸡AvBD2、6、12融合蛋白抗IBV作用 | 第33页 |
| 2.4.1 试验设计及方法 | 第33页 |
| 2.4.2 IBV核酸提取 | 第33页 |
| 2.4.3 质粒标准品制备 | 第33页 |
| 2.4.4 病毒载量检测 | 第33页 |
| 2.5 重组鸡AvBD2、6、12融合蛋白抗菌活性测定 | 第33-34页 |
| 2.6 盐离子浓度对抗菌活性的影响 | 第34页 |
| 2.7 重组蛋白的溶血指数 | 第34-35页 |
| 2.8 统计分析 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-66页 |
| 3.1 鸡AvBDs经IBV诱导后组织表达差异 | 第36页 |
| 3.2 TLRs和iNOS经IBV诱导后组织表达差异 | 第36-57页 |
| 3.3 原核表达载体构建 | 第57页 |
| 3.3.1 重组表达质粒pMD18-T-Chicken AvBD2、6、12的鉴定 | 第57页 |
| 3.3.2 重组表达质粒pProEX HTA-AvBD2、6、12的鉴定 | 第57页 |
| 3.4 重组鸡AvBD2、6、12蛋白的诱导表达与纯化复性 | 第57-60页 |
| 3.5 重组鸡AvBD2、6、12蛋白体外抗IBV活性检测 | 第60-61页 |
| 3.6 重组鸡AvBD2、6、12融合蛋白的抗菌活性 | 第61-63页 |
| 3.7 盐离子浓度对抗菌活性的影响 | 第63页 |
| 3.8 重组鸡AvBD2、6、12融合蛋白对鸡血红胞的溶血活性 | 第63-66页 |
| 4 讨论 | 第66-70页 |
| 4.1 IBV诱导AvBDs、TLRs和iNOS组织表达差异 | 第66页 |
| 4.2 鸡TLRs信号转导作用 | 第66-67页 |
| 4.3 重组鸡AvBD2、6、12蛋白的原核表达 | 第67-68页 |
| 4.4 重组鸡AvBD2、6、12蛋白的生物学特性 | 第68-70页 |
| 5 结论 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第81页 |
