| CONTENTS | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-22页 |
| 1.1 产气荚膜梭菌感染及病原学研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 产气荚膜梭菌致病机制 | 第13-15页 |
| 1.2 产气荚膜梭菌分类及其引起的相关疾病 | 第15-16页 |
| 1.3 产气荚膜梭菌疫苗的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3.1 a毒素疫苗的研究进展 | 第16页 |
| 1.3.2 β毒素疫苗的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3.3 ε毒素疫苗的研究进展 | 第17页 |
| 1.4 乳酸菌作为疫苗载体的研究进展 | 第17-21页 |
| 1.4.1 乳酸杆菌作为黏膜免疫活载体疫苗的优势 | 第18-19页 |
| 1.4.2 重组乳酸杆菌作为活载体疫苗的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4.3 乳酸菌口服疫苗的展望 | 第20-21页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 质粒和菌种 | 第22页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第22页 |
| 2.1.3 引物合成 | 第22-23页 |
| 2.1.4 试剂 | 第23页 |
| 2.1.5 血清 | 第23页 |
| 2.1.6 主要实验仪器与设备 | 第23-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-33页 |
| 2.2.1 表达产气荚膜梭菌α-β2-ε-β1毒素融合基因重组大肠杆菌的构建 | 第24-28页 |
| 2.2.2 重组大肠杆菌的诱导表达及鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.3 表达产气荚膜梭菌α-β2-ε-β1毒素融合基因重组干酪乳杆菌的构建及鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.4 重组干酪乳杆菌的诱导表达及鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.5 口服重组干酪乳杆菌特异性抗体的测定 | 第31-32页 |
| 2.2.6 毒素中和试验 | 第32-33页 |
| 3 实验结果 | 第33-42页 |
| 3.1 目的基因α-β2,ε,β1的PCR扩增结果 | 第33页 |
| 3.2 重组菌表达载体的鉴定 | 第33-35页 |
| 3.2.1 大肠杆菌重组表达载体pProHTa-α-β2-ε-β1鉴定结果 | 第33-34页 |
| 3.2.2 干酪乳杆菌重组载体pPG-2-α-β2-ε-β1的鉴定结果 | 第34-35页 |
| 3.3 重组大肠杆菌的诱导表达鉴定结果 | 第35-36页 |
| 3.3.1 SDS-PAGE结果 | 第35页 |
| 3.3.2 Western blot鉴定 | 第35-36页 |
| 3.4 重组干酪乳杆菌的诱导表达鉴定结果 | 第36-37页 |
| 3.4.1 Western blot鉴定结果 | 第36-37页 |
| 3.5 重组干酪乳杆菌口服免疫小鼠特异性抗体检测结果 | 第37-40页 |
| 3.5.1 小鼠粪便特异性sIgA检测结果 | 第37-38页 |
| 3.5.2 小鼠血清中特异性IgG检测结果 | 第38-39页 |
| 3.5.3 免疫小鼠泪液、阴道黏液中特异性sIgA测定结果 | 第39-40页 |
| 3.6 攻毒保护性试验结果 | 第40-41页 |
| 3.6.1 毒素毒力的测定结果 | 第40页 |
| 3.6.2 攻毒试验结果 | 第40-41页 |
| 3.7 血清抗体中和效力的测定结果 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 4.1 以α-β2-ε-β1毒素为免疫原构建重组乳酸杆菌的设计思路 | 第42页 |
| 4.2 分泌型干酪乳杆菌作为递呈抗原载体的优势 | 第42-43页 |
| 4.3 口服重组干酪乳杆菌的免疫效果分析 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第54页 |
