| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第12-24页 |
| 第一章 IFN-γ和 IL-17 的研究进展 | 第12-24页 |
| 1.1 IFN-γ的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1.1 IFN-γ的发现 | 第12页 |
| 1.1.2 诱导分泌 | 第12页 |
| 1.1.3 分子特性 | 第12-13页 |
| 1.1.4 IFN-γ的受体和信号通路 | 第13页 |
| 1.1.5 IFN-γ主要生物学功能 | 第13-15页 |
| 1.2 IL-17 的研究进展 | 第15-20页 |
| 1.2.1 IL-17 的发现 | 第16页 |
| 1.2.2 诱导合成 | 第16页 |
| 1.2.3 分子特性 | 第16页 |
| 1.2.4 受体和信号传导 | 第16-17页 |
| 1.2.5 主要功能 | 第17-20页 |
| 1.3 小熊猫的研究进展 | 第20-24页 |
| 1.3.1 小熊猫的生活习性 | 第20-21页 |
| 1.3.2 小熊猫与病原菌 | 第21-24页 |
| 试验研究 | 第24-48页 |
| 第二章 小熊猫 IFN-Γ和 IL-17 的克隆与序列分析 | 第24-35页 |
| 2.1 材料 | 第24页 |
| 2.1.1 试验动物、菌种和载体 | 第24页 |
| 2.1.2 试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 仪器 | 第24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第24-25页 |
| 2.2.2 淋巴细胞分离以及刺激分化 | 第25页 |
| 2.2.3 cDNA 的合成 | 第25页 |
| 2.2.4 PCR 扩增及其产物胶回收 | 第25-26页 |
| 2.2.5 克隆载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.6 序列分析 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-34页 |
| 2.3.1 目的基因的扩增 | 第27-28页 |
| 2.3.2 重组克隆载体的鉴定结果 | 第28-29页 |
| 2.3.3 序列分析结果 | 第29-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34页 |
| 2.4.1 IL-17 的克隆 | 第34页 |
| 2.4.2 IFN-γ的克隆 | 第34页 |
| 2.5 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 小熊猫 IFN-Γ和 IL-17 的原核表达 | 第35-43页 |
| 3.1 材料 | 第35页 |
| 3.1.1 试验动物 | 第35页 |
| 3.1.2 试剂 | 第35页 |
| 3.1.3 仪器 | 第35页 |
| 3.2 试验方法 | 第35-39页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第35-36页 |
| 3.2.2 目的片段扩增 | 第36页 |
| 3.2.3 原核表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.2.4 重组质粒的诱导表达 | 第37页 |
| 3.2.5 诱导表达条件的优化 | 第37页 |
| 3.2.6 重组蛋白的表达检测 | 第37页 |
| 3.2.7 重组蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| 3.2.8 RpIFN-γ多克隆抗体的制备 | 第38-39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-41页 |
| 3.3.1 重组表达基因的扩增结果 | 第39页 |
| 3.3.2 表达重组载体的鉴定结果 | 第39-40页 |
| 3.3.3 重组菌诱导表达结果 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-42页 |
| 3.5 小结 | 第42-43页 |
| 第四章 IFN-Γ的活性检测 | 第43-48页 |
| 4.1 材料 | 第43页 |
| 4.1.1 细胞与病毒 | 第43页 |
| 4.1.2 仪器 | 第43页 |
| 4.1.3 试剂 | 第43页 |
| 4.1.4 主要试剂配方 | 第43页 |
| 4.2 试验方法 | 第43-45页 |
| 4.2.1 IFN-γ抗 CAV 在 MDCK 上的增殖 | 第43-44页 |
| 4.2.2 IFN-γ抗 CPV 在 F81 上的增殖 | 第44-45页 |
| 4.3 结果 | 第45-47页 |
| 4.3.1 IFN-γ活性检测结果 | 第45-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47页 |
| 4.5 小结 | 第47-48页 |
| 总结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
