| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 大麦醇溶蛋白的现实用途和影响 | 第11页 |
| 1.1.1 对乳糜泻疾病的影响 | 第11页 |
| 1.1.2 对啤酒工业的影响 | 第11页 |
| 1.2 大麦及其醇溶蛋白组成 | 第11-13页 |
| 1.3 DNA甲基化的生物学功能 | 第13-14页 |
| 1.4 大麦突变品系Ris?1508带来的启示 | 第14-15页 |
| 1.5 5-甲基胞嘧啶DNA糖基化酶(DME) | 第15-16页 |
| 1.6 基因沉默 | 第16-18页 |
| 1.7 大麦遗传转化应用 | 第18-20页 |
| 1.8 研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-30页 |
| 2.1 植物和质粒材料 | 第21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 质粒材料 | 第21页 |
| 2.2 大麦基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.3 PCR扩增 | 第22页 |
| 2.4 切胶回收目的片段 | 第22-23页 |
| 2.5 DH5α感受态的制备 | 第23页 |
| 2.6 大肠杆菌转化 | 第23页 |
| 2.7 质粒提取 | 第23-24页 |
| 2.7.1 采用SanPrep柱式质粒DNA小量抽提试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.7.2 采用NucleoBondNucleoSpinPlasmid小提试剂盒 | 第24页 |
| 2.8 大麦醇溶蛋白启动子Hor3-1和DME基因的生物信息学分析 | 第24-25页 |
| 2.8.1 大麦醇溶蛋白启动子Hor3-1的分析 | 第24-25页 |
| 2.8.2 大麦HvDME基因的分析 | 第25页 |
| 2.9 大麦幼胚培养 | 第25-27页 |
| 2.9.1 大麦培养基的配制 | 第25-26页 |
| 2.9.2 大麦幼胚的获取与灭菌 | 第26-27页 |
| 2.9.3 基因枪转化流程 | 第27页 |
| 2.9.4 大麦幼胚的再分化 | 第27页 |
| 2.10 大麦种子中醇溶蛋白的提取 | 第27-28页 |
| 2.11 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第28-30页 |
| 2.11.1 电泳凝胶制备及电泳 | 第28页 |
| 2.11.2 蛋白样品的预处理 | 第28-30页 |
| 第三章 结果与分析 | 第30-44页 |
| 3.1 大麦Hor3启动子Hor3-1的扩增及连接测序 | 第30-31页 |
| 3.2 不同品种Hor3-1启动子的生物信息学分析 | 第31-33页 |
| 3.2.1 启动子的序列分析 | 第31-32页 |
| 3.2.2 启动子CpG岛预测 | 第32页 |
| 3.2.3 启动子区顺式元件预测 | 第32-33页 |
| 3.3 大麦HvDME和小麦TaDME生物信息学预测 | 第33-36页 |
| 3.3.1 HvDME基因结构 | 第33-34页 |
| 3.3.2 HvDME氨基酸结构 | 第34-36页 |
| 3.4 小麦pHMW-DMEhp载体中Hairpin分析 | 第36-37页 |
| 3.5 大麦pHor3-DMEhp质粒的构建 | 第37-39页 |
| 3.6 大麦基因枪转化体系的建立 | 第39-41页 |
| 3.6.1 受体大小对幼胚愈伤组织形成的影响 | 第39-40页 |
| 3.6.2 Dicamba对幼胚愈伤组织诱导的影响 | 第40页 |
| 3.6.3 高渗处理对愈伤组织分化频率的影响 | 第40-41页 |
| 3.7 T0代转基因大麦的鉴定 | 第41-42页 |
| 3.8 T1代大麦种子醇溶蛋白在SDS-PAGE检测 | 第42-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-47页 |
| 4.1 生物信息学在序列功能预测中的应用 | 第45-46页 |
| 4.2 研究展望 | 第46-47页 |
| 第五章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录1 常用培养基及其它试剂配方 | 第53-55页 |
| 附录2 部分实验仪器与实验试剂 | 第55-56页 |
| 附录3 基因核苷酸序列 | 第56-57页 |
| 缩略词 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
