| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 植物茎端分生组织 | 第12-20页 |
| 1.1.1 茎端分生组织的结构 | 第12-13页 |
| 1.1.2 茎端分生组织的起始 | 第13-14页 |
| 1.1.3 维持茎端分生组织功能的基因网络及其表达模式 | 第14-20页 |
| 1.1.3.1 CLV3和CLV1基因对茎端分生组织的活性调节 | 第15页 |
| 1.1.3.2 WUS基因对茎端分生组织的活性调节 | 第15-16页 |
| 1.1.3.3 茎端分生组织发育中CLV-WUS的反馈调节机制 | 第16-17页 |
| 1.1.3.4 STM基因对茎端分生组织的活性调节 | 第17-19页 |
| 1.1.3.5 WUS和STM共同调控茎端分生组织发育的机制 | 第19-20页 |
| 1.2 TIR3基因的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.2.1 tir3-1突变体的表型研究 | 第20-21页 |
| 1.2.2 TIR3基因和生长素的关系 | 第21-22页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株与质粒载体 | 第23页 |
| 2.1.3 酶及生化试剂和仪器 | 第23页 |
| 2.1.4 实验中用到的引物 | 第23-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-46页 |
| 2.2.1 实验材料拟南芥的种植 | 第25页 |
| 2.2.2 拟南芥基因组DNA的提取和纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.3 表达载体的构建 | 第26-32页 |
| 2.2.3.1 目的片段的扩增 | 第26-27页 |
| 2.2.3.2 目的片段的回收 | 第27页 |
| 2.2.3.3 目的片段和克隆载体的连接反应 | 第27-28页 |
| 2.2.3.4 目的片段和表达载体的连接反应 | 第28-29页 |
| 2.2.3.5 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第29-30页 |
| 2.2.3.6 转化大肠杆菌 | 第30页 |
| 2.2.3.7 提取质粒DNA | 第30页 |
| 2.2.3.8 克隆质粒和表达质粒的酶切 | 第30-31页 |
| 2.2.3.9 GV3101农杆菌感受态细胞的制备方法和转化过程 | 第31-32页 |
| 2.2.3.10 冻融转化法转化农杆菌 | 第32页 |
| 2.2.4 转基因植株的获得 | 第32页 |
| 2.2.5 植物组织RNA的提取 | 第32-34页 |
| 2.2.6 cDNA的合成 | 第34-35页 |
| 2.2.7 Real-Time实时定量PCR | 第35-36页 |
| 2.2.8 半薄切片观察组织细胞学形态 | 第36-37页 |
| 2.2.9 原位杂交检测 | 第37-42页 |
| 2.2.9.1 材料的固定 | 第37页 |
| 2.2.9.2 材料的包埋 | 第37页 |
| 2.2.9.3 切片 | 第37-38页 |
| 2.2.9.4 探针的制备 | 第38页 |
| 2.2.9.5 转录模板的线性化 | 第38页 |
| 2.2.9.6 转录反应 | 第38页 |
| 2.2.9.7 沉淀、收集探针 | 第38-40页 |
| 2.2.9.8 脱蜡、消化、乙酰化和杂交 | 第40-41页 |
| 2.2.9.9 洗片 | 第41页 |
| 2.2.9.10 检测 | 第41-42页 |
| 2.2.10 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第42-44页 |
| 2.2.11 微分干涉差显微镜观察实验 | 第44页 |
| 2.2.12 拟南芥根的FM4-64染色实验 | 第44-45页 |
| 2.2.13 共聚焦显微镜观察和图像处理 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-67页 |
| 3.1 TIR3基因调控茎端分生组织的发育 | 第46-58页 |
| 3.1.1 bom1突变体茎端和花序分生组织变大 | 第46-48页 |
| 3.1.2 bom1突变体中T-DNA序列插入导致TIR3基因功能缺失 | 第48-50页 |
| 3.1.3 TIR3功能缺失导致分生组织特征基因的表达水平上调 | 第50-51页 |
| 3.1.4 TIR3功能缺失突变体中分生组织特征基因的表达模式分析 | 第51-53页 |
| 3.1.4.1 bom1/tir3突变体中CLV3基因的表达模式分析 | 第51-52页 |
| 3.1.4.2 bom1/tir3突变体中WUS和STM基因的表达模式分析 | 第52-53页 |
| 3.1.5 TIR3与分生组织特征基因CLV3、WUS和STM的遗传学相互调节关系 | 第53-58页 |
| 3.1.5.1 TIR3通过调节WUS和STM的表达来调控茎端分生组织的发育 | 第53-56页 |
| 3.1.5.2 WUS和STM对TIR3基因的表达调控 | 第56-58页 |
| 3.2 TIR3基因调控根端分生组织的发育 | 第58-59页 |
| 3.3 TIR3基因调控胚胎发育过程 | 第59-67页 |
| 3.3.1 TIR3基因功能缺失导致突变体的胚变小 | 第59-62页 |
| 3.3.2 TIR3基因功能缺失导致突变体的种子变小 | 第62-63页 |
| 3.3.3 TIR3基因功能缺失引起细胞周期相关基因的表达受到抑制 | 第63-64页 |
| 3.3.4 野生型和bom1/tir3突变体转录组测序结果分析 | 第64-67页 |
| 3.3.4.1 差异表达基因分析 | 第64-65页 |
| 3.3.4.2 TIR3基因功能缺失导致突变体胚珠中细胞分裂素的合成受到抑制 | 第65-67页 |
| 4 讨论 | 第67-71页 |
| 4.1 TIR3和WUS、STM基因在调控茎端分生组织发育中存在反馈调节机制 | 第67-68页 |
| 4.2 TIR3基因是调控茎端分生组织和根端分生组织发育的保守因子 | 第68-69页 |
| 4.3 TIR3基因通过介导生长素的极性运输和响应而调控茎端分生组织的发育 | 第69页 |
| 4.4 TIR3基因通过抑制细胞分裂素的合成而调控胚胎和种子的发育 | 第69-71页 |
| 5 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第78页 |
