| 摘要 | 第3-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 英文缩写词对照表 | 第18-20页 |
| 前言 | 第20-26页 |
| 1 缺氧损伤的研究现状 | 第20-21页 |
| 2 缺氧损伤细胞凋亡线粒体机制研究 | 第21-22页 |
| 3 缺氧脑损伤线粒体MPTP机制研究 | 第22页 |
| 4 红景天及红景天苷抗缺氧作用研究 | 第22-23页 |
| 5 本实验研究思路 | 第23-26页 |
| 第一部分 红景天预给药对小鼠缺氧脑损伤神经保护作用及线粒体膜MPTP影响 | 第26-66页 |
| 1 实验材料 | 第27-29页 |
| 1.1 实验主要仪器 | 第27页 |
| 1.2 主要试剂与耗材 | 第27-29页 |
| 1.3 实验动物 | 第29页 |
| 1.4 实验场地 | 第29页 |
| 2 实验方法 | 第29-42页 |
| 2.1 小鼠缺氧脑损伤造模方案的确定 | 第29-33页 |
| 2.1.1 实验动物及分组 | 第29-30页 |
| 2.1.2 高海拔缺氧环境的模拟 | 第30-31页 |
| 2.1.3 低压低氧动物舱的设置 | 第31页 |
| 2.1.4 缺氧小鼠一般状态观察 | 第31页 |
| 2.1.5 小鼠活体固定取脑组织 | 第31-32页 |
| 2.1.6 小鼠脑组织HE染色 | 第32-33页 |
| 2.1.7 小鼠脑组织LDH、LD、MDA、SOD等缺氧应激指标检测 | 第33页 |
| 2.2 红景天预给药对小鼠密闭缺氧存活时间的影响 | 第33-35页 |
| 2.2.1 实验分组 | 第33-34页 |
| 2.2.2 预缺氧方案 | 第34页 |
| 2.2.3 预给药方案 | 第34页 |
| 2.2.4 密闭缺氧存活时间测试方法 | 第34-35页 |
| 2.3 红景天预给药对缺氧小鼠学习记忆功能的保护作用 | 第35-37页 |
| 2.3.1 动物及分组 | 第35页 |
| 2.3.2 预缺氧方案 | 第35-36页 |
| 2.3.3 缺氧损伤方案 | 第36页 |
| 2.3.4 预给药方案 | 第36页 |
| 2.3.5 学习记忆功能测试方案 | 第36-37页 |
| 2.4 红景天预给药对缺氧小鼠脑海马CA1区神经元形态结构的影响 | 第37-39页 |
| 2.4.1 动物及分组 | 第37页 |
| 2.4.2 预缺氧方案、缺氧损伤方案 | 第37页 |
| 2.4.3 预给药方案 | 第37-38页 |
| 2.4.4 样本制备 | 第38页 |
| 2.4.5 脑海马TUNEL染色 | 第38页 |
| 2.4.6 脑海马神经元线粒体电镜观察 | 第38-39页 |
| 2.5 红景天预给药对缺氧小鼠脑神经元线粒体功能的影响 | 第39-41页 |
| 2.5.1 动物及分组 | 第39页 |
| 2.5.2 预缺氧方案、缺氧损伤方案、预给药方案 | 第39-40页 |
| 2.5.3 脑组织线粒体抽提 | 第40页 |
| 2.5.4 脑组织线粒体呼吸功能测试 | 第40-41页 |
| 2.5.5 脑组织线粒体通透性测试 | 第41页 |
| 2.5.6 脑组织线粒体膜电位测试 | 第41页 |
| 2.6 数据统计分析 | 第41-42页 |
| 3 实验结果 | 第42-61页 |
| 3.1 小鼠缺氧脑损伤造模方案的确定 | 第42-47页 |
| 3.1.1 缺氧小鼠一般状态 | 第42-43页 |
| 3.1.2 不同缺氧条件下小鼠存活率 | 第43-44页 |
| 3.1.3 不同缺氧条件小鼠脑组织LDH、LD、MDA、SOD等应激指标含量的影响 | 第44-46页 |
| 3.1.4 不同缺氧条件小鼠脑组织HE染色病理检测结果 | 第46-47页 |
| 3.2 红景天预给药对缺氧小鼠的保护效果 | 第47-54页 |
| 3.2.1 各组小鼠密闭缺氧存活时间 | 第47-48页 |
| 3.2.2 红景天预给药对小鼠学习记忆功能的影响 | 第48-54页 |
| 3.3 红景天预给药对缺氧小鼠脑海马CA1区神经元影响的病理观察 | 第54-57页 |
| 3.3.1 各组小鼠脑组织CA1区细胞凋亡TUNEL检测结果 | 第54-56页 |
| 3.3.2 各组小鼠脑海马CA1区神经元线粒体形态结构电镜观察结果 | 第56-57页 |
| 3.4 红景天预给药对缺氧小鼠脑神经元线粒体功能的影响 | 第57-61页 |
| 3.4.1 各组小鼠脑神经元线粒体呼吸功能检测结果 | 第57-58页 |
| 3.4.2 各组小鼠脑神经元线粒体MPTP通透性测试结果 | 第58-60页 |
| 3.4.3 各组小鼠脑神经元线粒体膜电位的检测结果 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-66页 |
| 第二部分 红景天苷预处理对PC12细胞的缺氧保护作用及线粒体MPTP影响 | 第66-89页 |
| 1 实验材料 | 第67-70页 |
| 1.1 实验主要仪器 | 第67-68页 |
| 1.2 主要试剂与耗材 | 第68-69页 |
| 1.3 溶液配制 | 第69-70页 |
| 2 实验方法 | 第70-78页 |
| 2.1 PC12细胞培养 | 第70-71页 |
| 2.2 利用MTT方式确定红景天苷剂量 | 第71页 |
| 2.3 红景天苷预处理对缺氧诱导PC12细胞活力的影响 | 第71-72页 |
| 2.3.1 实验方案 | 第71页 |
| 2.3.2 细胞分组 | 第71-72页 |
| 2.3.3 细胞活力检测 | 第72页 |
| 2.4 红景天苷预处理对缺氧PC12细胞LDH释放率的影响 | 第72-73页 |
| 2.4.1 实验方案 | 第72页 |
| 2.4.2 细胞分组 | 第72-73页 |
| 2.4.3 LDH释放率检测 | 第73页 |
| 2.5 MPTP阻断剂CsA和激动剂ATR预处理对缺氧PC12细胞活力影响 | 第73-74页 |
| 2.5.1 实验方案 | 第73页 |
| 2.5.2 细胞分组 | 第73-74页 |
| 2.5.3 细胞活力检测 | 第74页 |
| 2.6 红景天苷预处理对PC12细胞缺氧后细胞凋亡的影响 | 第74-76页 |
| 2.6.1 实验方案 | 第74页 |
| 2.6.2 细胞分组 | 第74页 |
| 2.6.3 细胞凋亡检测 | 第74-75页 |
| 2.6.4 细胞Caspase3活性的测定 | 第75页 |
| 2.6.5 PC12细胞总蛋白提取 | 第75页 |
| 2.6.6 WesternBlot分析Bcl-2表达 | 第75-76页 |
| 2.7 红景天苷预处理对PC12细胞缺氧后细胞线粒体膜电位的影响 | 第76-77页 |
| 2.7.1 实验方案 | 第76页 |
| 2.7.2 细胞分组 | 第76页 |
| 2.7.3 检测细胞线粒体膜电位 | 第76-77页 |
| 2.8 红景天苷预处理对PC12细胞缺氧后细胞内Ca~(2+)浓度的影响 | 第77页 |
| 2.8.1 实验方案 | 第77页 |
| 2.8.2 细胞分组 | 第77页 |
| 2.8.3 细胞内Ca~(2+)浓度的检测 | 第77页 |
| 2.9 数据统计分析 | 第77-78页 |
| 3 实验结果 | 第78-85页 |
| 3.1 不同剂量红景天苷预处理对细胞活力的影响 | 第78页 |
| 3.2 红景天苷对缺氧PC12细胞的保护作用 | 第78-80页 |
| 3.2.1 对缺氧PC12细胞活力的影响 | 第78-79页 |
| 3.2.2 对缺氧PC12细胞LDH释放率影响 | 第79-80页 |
| 3.3 MPTP阻断/激活剂及红景天苷预处理对缺氧诱导PC12细胞活力的影响 | 第80-81页 |
| 3.4 红景天苷预处理对PC12细胞缺氧后细胞凋亡的影响 | 第81-84页 |
| 3.4.1 流式细胞术检测各组细胞凋亡变化 | 第81-83页 |
| 3.4.2 Caspase3活性检测 | 第83页 |
| 3.4.3 WesternBlot检测Bcl-2表达 | 第83-84页 |
| 3.5 红景天苷预处理对PC12细胞缺氧后细胞线粒体膜电位的影响 | 第84-85页 |
| 3.6 红景天苷预处理对PC12细胞缺氧后细胞内Ca~(2+)浓度的影响 | 第85页 |
| 4 讨论 | 第85-89页 |
| 第三部分 研究总结与结论 | 第89-94页 |
| 1 红景天与红景天苷 | 第89-90页 |
| 1.1 红景天的作用 | 第89页 |
| 1.2 红景天的有效成分 | 第89-90页 |
| 2 缺氧对机体的损伤及红景天的保护作用 | 第90-94页 |
| 2.1 缺氧引起的氧化应激损伤及红景天的保护作用 | 第90-91页 |
| 2.2 缺氧所导致的细胞凋亡及红景天的保护作用 | 第91页 |
| 2.3 缺氧对线粒体结构的损伤及红景天的保护 | 第91页 |
| 2.4 缺氧对线粒体功能的影响 | 第91-94页 |
| 本论文创新点 | 第94页 |
| 不足与展望 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-110页 |
| 文献综述 红景天对缺氧脑损伤的保护作用及与线粒体MPTP的关系 | 第110-130页 |
| 一 缺氧对脑神经及机体的损伤 | 第110-113页 |
| 二 缺氧引起脑神经的线粒体反应 | 第113-115页 |
| 三 红景天对缺氧脑损伤的保护 | 第115-117页 |
| 总结 | 第117页 |
| 参考文献 | 第117-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 附件：在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第131-132页 |
