| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 引言 | 第12-30页 |
| 1 造血干细胞 | 第12-14页 |
| 1.1 造血干细胞概述 | 第12-13页 |
| 1.2 造血干细胞的自我更新 | 第13-14页 |
| 2 骨髓造血微环境 | 第14-25页 |
| 2.1 骨髓造血微环境的组成和结构 | 第14-16页 |
| 2.2 Niche细胞对HSC的调节 | 第16-22页 |
| 2.2.1 成骨细胞和血管内皮细胞对HSC的调控作用 | 第16-18页 |
| 2.2.2 MSC及各种基质细胞对HSC的调节作用 | 第18-20页 |
| 2.2.3 神经细胞和神经递质对HSC的调节 | 第20-21页 |
| 2.2.4 破骨细胞 ,巨噬细胞和脂肪细胞对HSC的调节作用 | 第21-22页 |
| 2.3 骨髓细胞外基质对HSC的调控 | 第22页 |
| 2.4 细胞外因子调控造血干细胞的自我更新 | 第22-25页 |
| 2.4.1 发育相关分子对HSC的调控作用 | 第23-24页 |
| 2.4.2 造血细胞因子诱导的生存、增殖和分化信号与HSC自我更新 | 第24页 |
| 2.4.3 炎性因子诱导的生存和死亡信号与 HSC 自我更新 | 第24-25页 |
| 2.4.4 应急信号和抗衰老信号与HSC自我更新 | 第25页 |
| 2.4.5 趋化因子和黏附分子信号与HSC自我更新 | 第25页 |
| 3 HSC的发育和Niche的形成 | 第25-27页 |
| 4 本课题相关研究进展及研究意义 | 第27-30页 |
| 4.1 国内外研究现状分析 | 第27-28页 |
| 4.2 研究目的及意义 | 第28-30页 |
| 第二章 小鼠造血重建和增殖过程中骨髓非造血细胞的动态变化 | 第30-51页 |
| 0 前言 | 第30-31页 |
| 1 实验材料和方法 | 第31-36页 |
| 1.1 实验材料 | 第31页 |
| 1.1.1 小鼠 | 第31页 |
| 1.1.2 试剂 | 第31页 |
| 1.2 实验仪器 | 第31页 |
| 1.3 实验方法 | 第31-36页 |
| 1.3.15-FU处理成年小鼠 | 第31-32页 |
| 1.3.2 繁殖获得新生小鼠 | 第32页 |
| 1.3.3 主要试剂的配制 | 第32页 |
| 1.3.4 小鼠原代骨髓细胞样品的制备 | 第32-33页 |
| 1.3.5 台盼蓝染色细胞计数 | 第33页 |
| 1.3.6 细胞抗体染色 | 第33-34页 |
| 1.3.7 流式细胞仪分析 | 第34-35页 |
| 1.3.8 统计学分析 | 第35-36页 |
| 2 实验结果 | 第36-49页 |
| 2.1 5-FU处理后小鼠非造血细胞比例变化趋 | 第36-44页 |
| 2.1.1 5-FU诱导的小鼠骨髓TNC计数 | 第36-37页 |
| 2.1.2 流式分析 5-FU处理后小鼠的骨髓非造血细胞 | 第37-38页 |
| 2.1.3 流式分析 5-FU处理后小鼠骨髓基质细胞和内皮细胞的变化 | 第38-40页 |
| 2.1.4 流式分析 5-FU处理后不同分化阶段的小鼠骨髓间充质干细胞 | 第40-42页 |
| 2.1.5 流式分析 5-FU处理后不同分化阶段的小鼠骨髓内皮细胞 | 第42-44页 |
| 2.2 发育过程中小鼠骨髓非造血细胞比例变化趋势 | 第44-49页 |
| 2.2.1 发育过程小鼠骨髓TNC计数 | 第44-45页 |
| 2.2.2 流式分析小鼠发育过程中的骨髓非造血细胞 | 第45-46页 |
| 2.2.3 流式分析小鼠发育过程中不同分化阶段的间充质干细胞 | 第46-48页 |
| 2.2.4 流式分析小鼠发育过程中不同分化阶段的骨髓内皮细胞 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 第三章 小鼠造血重建和增殖过程中骨髓Niche细胞祖细胞的动态变化 | 第51-62页 |
| 0 前言 | 第51页 |
| 1 实验材料和方法 | 第51-57页 |
| 1.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 1.1.1 小鼠 | 第51-52页 |
| 1.1.2 试剂 | 第52页 |
| 1.2 实验仪器 | 第52页 |
| 1.3 实验方法 | 第52-57页 |
| 1.3.1 5-FU处理成年小鼠 | 第52-53页 |
| 1.3.2 主要试剂的配制 | 第53页 |
| 1.3.3 小鼠全骨髓细胞CFU-F克隆形成实验 | 第53页 |
| 1.3.4 Wright-Giemsa染色 | 第53页 |
| 1.3.5 小鼠原代骨髓非造血细胞样品的制备 | 第53-54页 |
| 1.3.6 小鼠原代LSK细胞样品的制备 | 第54页 |
| 1.3.7 台盼蓝染色细胞计数 | 第54-55页 |
| 1.3.8 细胞抗体染色 | 第55-56页 |
| 1.3.9 MethoCultTM3434 克隆形成实验 | 第56页 |
| 1.3.10 TaqMan定量PCR | 第56页 |
| 1.3.11 统计学分析 | 第56-57页 |
| 2 实验结果 | 第57-60页 |
| 2.1 CFU-F集落形成实验 | 第57-58页 |
| 2.2 M3434 克隆形成实验 | 第58-59页 |
| 2.3 CD45-Ter119-CD140a+细胞、CD45-Ter119-CD31high细胞表达较高的HSC促进因子 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| 第四章 小鼠造血重建和增殖过程中骨髓非造血细胞基因表达谱的动态变化 | 第62-82页 |
| 0 前言 | 第62-63页 |
| 1 实验材料和方法 | 第63-66页 |
| 1.1 实验材料 | 第63页 |
| 1.1.1 小鼠 | 第63页 |
| 1.1.2 试剂 | 第63页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第63-64页 |
| 1.3 实验方法 | 第64-66页 |
| 1.3.1 5-FU处理成年小鼠 | 第64页 |
| 1.3.2 繁殖获得新生小鼠 | 第64页 |
| 1.3.3 主要试剂的配制 | 第64页 |
| 1.3.4 小鼠骨髓非造血细胞负选分离与裂解释放RNA | 第64-66页 |
| 2 实验结果 | 第66-81页 |
| 2.1 测序序列质量评估 | 第66-67页 |
| 2.2 小鼠非造血细胞转录组测序 | 第67-77页 |
| 2.2.1 骨髓非造血细胞差异基因聚类热图分析 | 第67-68页 |
| 2.2.2 骨髓非造血细胞基因表达的时间序列聚类表达模式分析 | 第68-71页 |
| 2.2.3 骨髓非造血细胞差异基因Gene Ontology（GO）数据库分析 | 第71-77页 |
| 2.3 分泌型分子和膜蛋白分子差异基因的检测 | 第77-79页 |
| 2.4 新基因的检测 | 第79-81页 |
| 3 讨论 | 第81-82页 |
| 研究小结 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-90页 |
| 附录 | 第90-92页 |
| 附件 | 第92页 |
