摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
目录 | 第6-8页 |
插图和附表清单 | 第8-9页 |
缩略语索引 | 第9-10页 |
第一章 绪论 | 第10-20页 |
1.1 RSV的流行病学和临床表现 | 第10-11页 |
1.2 RSV疫苗的发展状况 | 第11-15页 |
1.2.1 福尔马林灭活疫苗 | 第11页 |
1.2.2 减毒活疫苗 | 第11-12页 |
1.2.3 DNA疫苗 | 第12-13页 |
1.2.4 病毒载体疫苗 | 第13-14页 |
1.2.5 亚单位疫苗 | 第14-15页 |
1.3 RSV病毒F2蛋白 | 第15-16页 |
1.4 结核分枝杆菌ESAT-6蛋白 | 第16-17页 |
1.5 LT佐剂 | 第17页 |
1.6 本论文的目的和意义 | 第17-20页 |
第二章 目的蛋白重组载体的构建、表达与纯化 | 第20-56页 |
2.1 材料和方法 | 第20-42页 |
2.1.1 材料 | 第20-28页 |
2.1.2 方法 | 第28-42页 |
2.2 结果 | 第42-53页 |
2.2.1 ESAT-6和ESAT-6-F2基因的扩增 | 第42-43页 |
2.2.2 酶切鉴定ESAT-6/pMD18T和ESAT-6-F2/pMD18T重组质粒 | 第43-44页 |
2.2.3 测序结果 | 第44-45页 |
2.2.4 酶切鉴定ESAT-6/pET30a和ESAT-6-F2/pET30a重组质粒 | 第45-47页 |
2.2.5 测序结果 | 第47-48页 |
2.2.6 ESAT-6和ESAT-6-F2蛋白的表达 | 第48-50页 |
2.2.7 Western Blotting检测重组蛋白 | 第50页 |
2.2.8 ESAT-6和ESAT-6-F2蛋白表达形式的鉴定 | 第50-52页 |
2.2.9 ESAT-6和ESAT-6-F2蛋白纯化 | 第52-53页 |
2.3 讨论 | 第53-55页 |
2.4 小结 | 第55-56页 |
第三章 目的蛋白ESAT-6和ESAT-6-F2免疫原性研究 | 第56-78页 |
3.1 材料和方法 | 第56-63页 |
3.1.1 材料 | 第56-58页 |
3.1.2 方法 | 第58-63页 |
3.2 结果 | 第63-73页 |
3.2.1 蛋白定量 | 第63页 |
3.2.2 免疫过程中IgG变化检测 | 第63-64页 |
3.2.3 免疫后血清和肺部灌洗液特异性抗体检测 | 第64-66页 |
3.2.4 免疫后制备小鼠肺部切片 | 第66-67页 |
3.2.5 攻毒后血清和肺部灌洗液特异性抗体检测 | 第67-69页 |
3.2.6 攻毒后小鼠体重变化监测 | 第69页 |
3.2.7 攻毒后制备小鼠肺部切片 | 第69-73页 |
3.3 讨论 | 第73-76页 |
3.3.1 重组蛋白免疫原性评价 | 第73-74页 |
3.3.2 攻毒后重组蛋白的安全性评价 | 第74-76页 |
3.4 小结 | 第76-78页 |
第四章 全文总结 | 第78-80页 |
第五章 展望 | 第80-82页 |
致谢 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-88页 |
附录A | 第88页 |