| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 引言 | 第11页 |
| 1.2 鸡性别分化研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2.1 性别决定机制 | 第11页 |
| 1.2.2 性腺分化 | 第11-12页 |
| 1.2.3 性别分化候选基因 | 第12-13页 |
| 1.3 RNAI | 第13-19页 |
| 1.3.1 RNAi的发现 | 第13页 |
| 1.3.2 RNAi的分子机理 | 第13-15页 |
| 1.3.3 RNAi的实验策略 | 第15-17页 |
| 1.3.4 RNAi的效果检测 | 第17页 |
| 1.3.5 RNAi在鸡胚中的应用 | 第17-19页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 材料与方法 | 第20-32页 |
| 2.1 材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 样品 | 第20页 |
| 2.1.2 所用试剂和试剂盒 | 第20-22页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-32页 |
| 2.2.1 shRNA的设计 | 第22-23页 |
| 2.2.2 病毒载体的构建 | 第23-26页 |
| 2.2.3 病毒包装和提取 | 第26-27页 |
| 2.2.4 感染细胞 | 第27-28页 |
| 2.2.5 感染鸡胚 | 第28页 |
| 2.2.6 结果检测 | 第28-32页 |
| 结果与分析 | 第32-41页 |
| 3.1 病毒载体构建结果 | 第32-36页 |
| 3.1.1 GFP扩增 | 第32页 |
| 3.1.2 U6+shRNA扩增 | 第32页 |
| 3.1.3 RCASBP与GFP+U6+shRNA连接及测序 | 第32-36页 |
| 3.2 病毒包装结果 | 第36-38页 |
| 3.2.1 病毒转染 | 第36页 |
| 3.2.2 病毒滴度测定 | 第36-38页 |
| 3.3 细胞感染结果 | 第38-40页 |
| 3.3.1 感染DF-1细胞 | 第38页 |
| 3.3.2 目的及相关基因表达量检测 | 第38-40页 |
| 3.4 鸡胚感染结果 | 第40-41页 |
| 讨论 | 第41-44页 |
| 4.1 病毒载体构建 | 第41页 |
| 4.1.1 U6及shRNA的选择 | 第41页 |
| 4.1.2 U6及shRNA连接的策略 | 第41页 |
| 4.2 病毒感染 | 第41-42页 |
| 4.2.1 感染效率 | 第42页 |
| 4.2.2 感染方法 | 第42页 |
| 4.3 目的基因BAF57 | 第42-44页 |
| 4.3.1 BAF57的调控 | 第42-43页 |
| 4.3.2 BAF57的作用 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 5.1 本研究所取得的结果 | 第44页 |
| 5.2 本研究的创新点和特色 | 第44页 |
| 5.3 本研究的不足和下一步需要研究的问题 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 致谢 | 第51页 |