| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写词表 | 第9-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-34页 |
| 1.1 大肠杆菌的流行性及耐药现状 | 第16-17页 |
| 1.1.1 大肠杆菌的流行性 | 第16-17页 |
| 1.1.2 大肠杆菌的耐药现状 | 第17页 |
| 1.2 整合子基因盒系统 | 第17-19页 |
| 1.2.1 整合子的结构与分类 | 第17-18页 |
| 1.2.2 基因盒 | 第18页 |
| 1.2.3 整合子基因盒系统与细菌耐药性 | 第18-19页 |
| 1.3 大肠杆菌对喹诺酮类耐药机制研究 | 第19-31页 |
| 1.3.1 喹诺酮类药物的研究历史 | 第19-20页 |
| 1.3.2 喹诺酮类药物的作用机制 | 第20-21页 |
| 1.3.3 大肠杆菌对喹诺酮类药物的耐药机制研究进展 | 第21-31页 |
| 1.4 大肠杆菌耐药质粒消除 | 第31-33页 |
| 1.4.1 大肠杆菌耐药质粒 | 第31页 |
| 1.4.2 大肠杆菌耐药质粒消除 | 第31-33页 |
| 1.5 本课题的研究意义及主要内容 | 第33-34页 |
| 第二章 熟肉制品中大肠杆菌的分离与鉴定 | 第34-46页 |
| 2.1 引言 | 第34页 |
| 2.2 实验材料 | 第34-38页 |
| 2.2.1 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第35-36页 |
| 2.2.3 培养基和常用溶液配制 | 第36-38页 |
| 2.2.4 实验菌株 | 第38页 |
| 2.2.5 食品样品来源 | 第38页 |
| 2.3 实验流程 | 第38页 |
| 2.4 实验方法 | 第38-42页 |
| 2.4.1 食品样品分离细菌 | 第38页 |
| 2.4.2 革兰氏染色 | 第38-39页 |
| 2.4.3 生化试验 | 第39-40页 |
| 2.4.4 PCR鉴定大肠杆菌 | 第40-42页 |
| 2.4.5 菌株保存 | 第42页 |
| 2.5 实验结果与讨论 | 第42-44页 |
| 2.5.1 大肠杆菌生化鉴定结果 | 第42页 |
| 2.5.2 大肠杆菌PCR鉴定结果 | 第42-43页 |
| 2.5.3 熟肉制品中大肠杆菌的分离情况 | 第43-44页 |
| 2.6 本章小结 | 第44-46页 |
| 第三章 大肠杆菌耐药性检测分析 | 第46-72页 |
| 3.1 引言 | 第46-47页 |
| 3.2 实验材料 | 第47-51页 |
| 3.2.1 主要仪器设备 | 第47页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第47-48页 |
| 3.2.3 实验菌株 | 第48-49页 |
| 3.2.4 培养基和常用溶液配制 | 第49-51页 |
| 3.3 实验流程 | 第51页 |
| 3.4 实验方法 | 第51-57页 |
| 3.4.1 药敏试验 | 第51-53页 |
| 3.4.2 I类整合酶基因intI1 的扩增 | 第53-54页 |
| 3.4.3 I类整合子携带耐药基因盒扩增 | 第54页 |
| 3.4.4 扩增片段序列分析 | 第54-57页 |
| 3.5 实验结果与讨论 | 第57-70页 |
| 3.5.1 大肠杆菌对 14 种抗生素的耐药性 | 第57-62页 |
| 3.5.2 多重耐药分析 | 第62-64页 |
| 3.5.3 I类整合酶基因intI1 的扩增 | 第64-65页 |
| 3.5.4 I类整合子可变区扩增及测序分析 | 第65-70页 |
| 3.6 本章小结 | 第70-72页 |
| 第四章 大肠杆菌质粒和染色体介导的喹诺酮类耐药机制研究 | 第72-95页 |
| 4.1 引言 | 第72-73页 |
| 4.2 实验材料 | 第73-75页 |
| 4.2.1 主要仪器设备 | 第73-74页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第74页 |
| 4.2.3 培养基和常用溶液配制 | 第74-75页 |
| 4.2.4 实验菌株 | 第75页 |
| 4.3 实验流程 | 第75-76页 |
| 4.4 实验方法 | 第76-79页 |
| 4.4.1 PCR扩增PMQR基因 | 第76-78页 |
| 4.4.2 PCR扩增DNA促旋酶和拓扑异构酶IV | 第78-79页 |
| 4.4.3 扩增片段序列分析 | 第79页 |
| 4.5 实验结果与讨论 | 第79-93页 |
| 4.5.1 PMQR基因的检测 | 第79-85页 |
| 4.5.2 DNA促旋酶和拓扑异构酶IV基因突变 | 第85-92页 |
| 4.5.3 质粒与染色体介导的耐药机制之间的关系 | 第92-93页 |
| 4.6 本章小结 | 第93-95页 |
| 第五章 接合转移试验 | 第95-111页 |
| 5.1 引言 | 第95页 |
| 5.2 实验材料 | 第95-98页 |
| 5.2.1 主要仪器设备 | 第95-96页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第96-97页 |
| 5.2.3 培养基和常用溶液配制 | 第97页 |
| 5.2.4 实验菌株 | 第97-98页 |
| 5.3 实验流程 | 第98页 |
| 5.4 实验方法 | 第98-100页 |
| 5.4.1 qnr阳性菌株质粒的提取 | 第98-99页 |
| 5.4.2 质粒电泳 | 第99页 |
| 5.4.3 接合转移试验 | 第99-100页 |
| 5.5 实验结果与讨论 | 第100-109页 |
| 5.5.1 qnr阳性菌株质粒的提取 | 第100-101页 |
| 5.5.2 接合转移试验 | 第101-109页 |
| 5.6 本章小结 | 第109-111页 |
| 第六章 不同接合子中qnrS基因的表达及喹诺酮类对qnrS基因表达的影响 | 第111-127页 |
| 6.1 引言 | 第111-112页 |
| 6.2 实验材料 | 第112-114页 |
| 6.2.1 主要仪器设备 | 第112页 |
| 6.2.2 主要试剂 | 第112-113页 |
| 6.2.3 实验菌株 | 第113页 |
| 6.2.4 培养基和常用溶液配制 | 第113-114页 |
| 6.3 实验流程 | 第114页 |
| 6.4 实验方法 | 第114-119页 |
| 6.4.1 预实验 | 第114-115页 |
| 6.4.2 RNA提取 | 第115-116页 |
| 6.4.3 反转录反应 | 第116页 |
| 6.4.4 半定量RT-PCR | 第116-117页 |
| 6.4.5 实时荧光定量PCR | 第117-119页 |
| 6.5 实验结果与讨论 | 第119-126页 |
| 6.5.1 细菌总RNA的提取 | 第119-120页 |
| 6.5.2 半定量RT-PCR | 第120-122页 |
| 6.5.3 实时荧光定量PCR | 第122-126页 |
| 6.6 本章小结 | 第126-127页 |
| 第七章 大肠杆菌耐药质粒消除 | 第127-139页 |
| 7.1 引言 | 第127-128页 |
| 7.2 实验材料 | 第128-130页 |
| 7.2.1 主要仪器设备 | 第128页 |
| 7.2.2 主要试剂 | 第128-129页 |
| 7.2.3 实验菌株 | 第129页 |
| 7.2.4 培养基和常用溶液配制 | 第129-130页 |
| 7.3 实验流程 | 第130页 |
| 7.4 实验方法 | 第130-131页 |
| 7.4.1 耐药质粒消除 | 第130-131页 |
| 7.4.2 消除株质粒提取及电泳 | 第131页 |
| 7.4.3 PCR扩增qnr基因 | 第131页 |
| 7.4.4 药敏试验 | 第131页 |
| 7.5 实验结果与讨论 | 第131-137页 |
| 7.5.1 耐药质粒消除 | 第131-136页 |
| 7.5.2 药敏试验 | 第136-137页 |
| 7.6 本章小结 | 第137-139页 |
| 结论与展望 | 第139-142页 |
| 参考文献 | 第142-159页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第159-162页 |
| 致谢 | 第162-164页 |
| 答辩委员会对论文的评定意见 | 第164页 |
