| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10页 |
| 缩略语 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-17页 |
| 1.1 植物免疫系统 | 第12-13页 |
| 1.1.1 病原相关分子模式触发的免疫(PTI) | 第12-13页 |
| 1.1.1.1 病原相关分子模式(PAMPs) | 第12页 |
| 1.1.1.2 模式识别受体(PRRs) | 第12页 |
| 1.1.1.3 识别后的应答反应 | 第12-13页 |
| 1.1.2 效应因子触发的免疫反应(ETI) | 第13页 |
| 1.2 稻瘟病菌与丝氨酸蛋白酶 | 第13-14页 |
| 1.2.1 稻瘟病菌 | 第13页 |
| 1.2.2 丝氨酸蛋白酶 | 第13-14页 |
| 1.2.3 丝氨酸蛋白酶与真菌致病性的关系 | 第14页 |
| 1.3 单子叶甘露糖结合凝集素 | 第14-15页 |
| 1.3.1 植物凝集素 | 第14页 |
| 1.3.2 单子叶甘露糖结合凝集素研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 锌指蛋白的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2. 材料与方法 | 第17-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 菌株 | 第17页 |
| 2.1.2 载体 | 第17-18页 |
| 2.1.3 水稻 | 第18页 |
| 2.1.4 培养基 | 第18页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-30页 |
| 2.2.1 水稻的种植 | 第19页 |
| 2.2.2 稻瘟菌的接种及管理 | 第19-20页 |
| 2.2.3 总RNA的制备 | 第20-22页 |
| 2.2.3.1 水稻总RNA提取 | 第20-21页 |
| 2.2.3.2 稻瘟菌总RNA提取 | 第21页 |
| 2.2.3.3 RNA纯度检测 | 第21页 |
| 2.2.3.4 RNA完整性鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.4 RT-PCR | 第22页 |
| 2.2.5 荧光定量PCR | 第22-25页 |
| 2.2.5.1 SYBR Green法荧光定量PCR | 第22-23页 |
| 2.2.5.2 荧光定量PCR引物设计方法 | 第23页 |
| 2.2.5.3 最佳退火温度的确定 | 第23页 |
| 2.2.5.4 荧光定量PCR检测样品的准备 | 第23-24页 |
| 2.2.5.5 荧光定量PCR实验设计 | 第24页 |
| 2.2.5.6 荧光定量PCR反应体系 | 第24页 |
| 2.2.5.7 荧光定量PCR反应步骤 | 第24-25页 |
| 2.2.5.8 荧光定量PCR数据处理方法 | 第25页 |
| 2.2.6 农杆菌介导的水稻转基因技术 | 第25-27页 |
| 2.2.6.1 愈伤组织的诱导 | 第25页 |
| 2.2.6.2 农杆菌介导水稻愈伤组织转化 | 第25-26页 |
| 2.2.6.3 侵染愈伤的脱菌、筛选 | 第26页 |
| 2.2.6.4 分化 | 第26页 |
| 2.2.6.5 生根 | 第26-27页 |
| 2.2.6.6 移苗 | 第27页 |
| 2.2.7 转基因水稻处理筛选种植、接种调查 | 第27页 |
| 2.2.8 转基因水稻叶片微量RNA提取 | 第27页 |
| 2.2.9 CTAB法提取水稻叶片DNA | 第27-28页 |
| 2.2.10 利用TAIL-PCR进行T-DNA插入位点 | 第28-30页 |
| 2.2.10.1 TAIL-PCR原理 | 第28页 |
| 2.2.10.2 TAIL-PCR的实验设计 | 第28-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-44页 |
| 3.1 OsMBL1和OsZFP1基因在稻瘟病菌接种后的表达动态 | 第30-34页 |
| 3.1.1 OsMBL1和OsZFP1基因在稻瘟病菌接种后不同时间段的表达动态 | 第30-31页 |
| 3.1.2 OsMBL1和OsZFP1基因对稻瘟病菌非亲和菌株和亲和菌株的应答分析 | 第31-32页 |
| 3.1.3 小结与讨论 | 第32-34页 |
| 3.1.3.1 OsMBL1基因的表达与稻瘟菌附着胞形成及侵染过程紧密相关 | 第32-33页 |
| 3.1.3.2 水稻中OsZFP1基因功能较为复杂 | 第33-34页 |
| 3.2 OsMBL1、OsZFP1基因过表达植株的抗病鉴定 | 第34-44页 |
| 3.2.1 农杆菌介导的转基因水稻培育 | 第34-35页 |
| 3.2.2 OsMBL1、OsZFP1基因过表达水稻T1代植株的抗病性调查 | 第35-38页 |
| 3.2.2.1 OsMBL1基因过表达水稻潮霉素筛选调查 | 第35-36页 |
| 3.2.2.2 OsZFP1基因过表达水稻潮霉素筛选调查 | 第36页 |
| 3.2.2.3 OsMBL1和OsZFP1基因过表达水稻植株的抗病鉴定 | 第36-38页 |
| 3.2.3 OsMBL1、OsZFP1基因过表达植株中目的基因相对表达量的检测 | 第38-39页 |
| 3.2.3.1 OsMBL1基因过表达植株中目的基因的检测 | 第38-39页 |
| 3.2.3.2 OsZFP1基因过表达植株中目的基因的检测 | 第39页 |
| 3.2.4 利用TAIL-PCR进行T-DNA插入位点 | 第39-42页 |
| 3.2.5 小结与讨论 | 第42-44页 |
| 4 结论与讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录 | 第50-59页 |
| 附录1：水稻组培培养基配方 | 第50-54页 |
| 附录2：试剂配制 | 第54-55页 |
| 附录3：病斑分级标准 | 第55页 |
| 附录4：水稻叶片总RNA的提取和检测中主要试剂及仪器的处理 | 第55页 |
| 附录5：RT-PCR | 第55-56页 |
| 附录6：荧光定量PCR图谱 | 第56-57页 |
| 附录7：TAIL-PCR程序及引物序列 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
