| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 1. 前言 | 第15-33页 |
| ·圆形精子细胞注射（ROSI）国内外研究概况 | 第15-17页 |
| ·影响ROSI 成功的因素 | 第17-21页 |
| ·卵母细胞激活方案的影响 | 第17-20页 |
| ·圆形精子细胞对ROSI 的影响 | 第20-21页 |
| ·影响ROSI 的其它因素 | 第21页 |
| ·ROSI 存在的问题 | 第21-22页 |
| ·ROSI 胚胎的染色体非整倍性增加 | 第21页 |
| ·ROSI 胚胎的表观遗传异常 | 第21-22页 |
| ·ROSI 后微管组装异常 | 第22页 |
| ·雄性配子激活卵母细胞能力的发生 | 第22-23页 |
| ·正常受精过程中精子激活卵母细胞的机制 | 第23-29页 |
| ·精子携带的卵母细胞激活因子 | 第23-25页 |
| ·Ca2+在卵母细胞激活中作用 | 第25-26页 |
| ·MPF 和MAPK 在受精中的作用 | 第26-29页 |
| ·受精过程中精子核在卵母细胞内的重塑 | 第29-30页 |
| ·中心体在受精中的作用 | 第30-31页 |
| ·本文研究的主要内容 | 第31-33页 |
| 2. 材料与方法 | 第33-45页 |
| ·主要试剂及配制 | 第33-35页 |
| ·成熟卵母细胞的获取 | 第35-36页 |
| ·山羊体外成熟卵母细胞的获取 | 第35页 |
| ·小鼠体内成熟卵母细胞的获取 | 第35-36页 |
| ·雄性生殖细胞的获取 | 第36-37页 |
| ·山羊精液的采集与精子上游处理 | 第36页 |
| ·山羊圆形精子细胞的获取 | 第36-37页 |
| ·显微操作针的制备 | 第37页 |
| ·显微操作 | 第37-38页 |
| ·山羊卵母细胞胞质内精子注射（ICSI） | 第37-38页 |
| ·山羊卵母细胞胞质内圆形精子细胞注射（ROSI） | 第38页 |
| ·小鼠卵母细胞胞质内圆形精子细胞注射 | 第38页 |
| ·卵母细胞或注射精子细胞的卵母细胞的激活 | 第38页 |
| ·胚胎的体外培养 | 第38-39页 |
| ·核形态的判定 | 第39-40页 |
| ·MPF 和MAPK 活性检测 | 第40页 |
| ·卵母细胞内[Ca2+]i测定 | 第40-41页 |
| ·卵母细胞内Ca2+荧光探针的负载 | 第40-41页 |
| ·激光共聚焦观察卵母细胞内[Ca2+]i变化 | 第41页 |
| ·微管的免疫染色和激光扫描共聚焦显微术 | 第41-42页 |
| ·试验设计 | 第42-44页 |
| ·数据分析 | 第44-45页 |
| 3. 结果与分析 | 第45-68页 |
| ·山羊圆形精子细胞卵胞质内注射后胚胎不能发育的原因分析 | 第45-57页 |
| ·山羊圆形精子细胞卵胞质内注射后胚胎发育情况 | 第45页 |
| ·山羊圆形精子细胞卵胞质内注射后卵母细胞激活情况 | 第45-46页 |
| ·山羊卵母细胞激活方案优化 | 第46-47页 |
| ·山羊圆形精子细胞卵胞质内注射后用Ionomycin 处理显著改善卵母细胞激活 | 第47-48页 |
| ·山羊圆形精子细胞卵胞质内注射后 MPF 和 MAPK 活性不下降导致卵母细胞不能激活 | 第48-52页 |
| ·山羊圆形精子细胞注入卵胞质后不能引起卵母细胞钙振荡 | 第52-53页 |
| ·山羊圆形精子细胞内卵母细胞激活因子含量不足是不能激活山羊卵母细胞的原因 | 第53-57页 |
| ·圆形精子细胞核在卵母细胞内的重塑异常 | 第57-61页 |
| ·山羊精子核在卵母细胞内的重塑 | 第57-58页 |
| ·山羊圆形精子细胞核在卵母细胞内的重塑 | 第58-59页 |
| ·山羊圆形精子细胞核在ROSI 后Ionomycin 激活的卵母细胞内重塑 | 第59-61页 |
| ·山羊圆形精子细胞卵胞质注射后微管组装异常 | 第61-62页 |
| ·山羊ROSI 卵母细胞激活方案的优化 | 第62-68页 |
| ·Ionomycin 激活的山羊卵母细胞第二次减数分裂核进程 | 第63-64页 |
| ·不同激活方案对山羊ROSI 卵母细胞原核形成的影响 | 第64页 |
| ·不同激活方案对山羊ROSI 受精胚胎体外发育的影响 | 第64-65页 |
| ·6-DMAP 对Ionomycin 激活的山羊ROSI 卵母细胞原核形成、胚胎发育的影响 | 第65-68页 |
| 4. 讨论 | 第68-75页 |
| ·山羊圆形精子细胞卵胞质内注射后胚胎不能发育的原因分析 | 第68-70页 |
| ·精子/圆形精子细胞卵胞质内注射后精核重塑 | 第70-72页 |
| ·精子/圆形精子细胞卵胞质内注射后微管组装 | 第72-73页 |
| ·山羊圆形精子细胞注射卵母细胞激活方案的优化 | 第73-75页 |
| 5. 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-89页 |
| 附录：图版及图版说明 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 作者简介及发表论文情况 | 第92-93页 |
| 博士学位论文内容简介及自评 | 第93页 |
