| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 本实验所用实验仪器及试剂 | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| 1.1 亲环素家族介绍 | 第10页 |
| 1.2 亲环素家族的分类 | 第10-11页 |
| 1.3 亲环素家族相关亚型的研究进展 | 第11-16页 |
| 1.3.1 CypA的相关研究 | 第12-13页 |
| 1.3.2 CypB的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3.3 CypD的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.4 本研究的内容、目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二章 CYP家族亚型的基因克隆及生物信息学分析 | 第17-41页 |
| 摘要 | 第17页 |
| 2.1 实验材料和方法 | 第17-23页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.1.2 总RNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.1.3 RNA质量的检测 | 第18页 |
| 2.1.4 总RNA的DNase处理 | 第18-19页 |
| 2.1.5 SMART cDNA的合成 | 第19页 |
| 2.1.6 池蝶蚌CypB/CypD/Cyp18.9部分片段的获得 | 第19页 |
| 2.1.7 RACE-PCR方法克隆基因全长 | 第19-21页 |
| 2.1.8 PCR产物检测 | 第21页 |
| 2.1.9 目的片段的回收、克隆与测序 | 第21-22页 |
| 2.1.10 CypB/CypD/Cyp18.9全长序列及开放阅读框 | 第22-23页 |
| 2.2 生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 2.2.1 信号肽位点分析 | 第23页 |
| 2.2.2 蛋白一级结构序列的基本分析 | 第23页 |
| 2.2.3 蛋白二级结构和同源建模 | 第23页 |
| 2.2.4 蛋白三级结构预测 | 第23-24页 |
| 2.2.5 同源性分析与系统进化树 | 第24页 |
| 2.3 结果 | 第24-39页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第24页 |
| 2.3.2 PCR产物和基因全长 | 第24-25页 |
| 2.3.3 基因全长序列及开放阅读框 | 第25-27页 |
| 2.3.4 信号肽分析 | 第27-28页 |
| 2.3.5 蛋白一级结构分析 | 第28-29页 |
| 2.3.6 蛋白二级结构和功能预测 | 第29-30页 |
| 2.3.7 二级结构预测 | 第30-34页 |
| 2.3.8 蛋白三级结构预测 | 第34-36页 |
| 2.3.9 系统发育分析 | 第36-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 CYPA蛋白的鉴定及其对肿瘤细胞的促增殖作用 | 第41-47页 |
| 摘要 | 第41页 |
| 3.1 实验材料和方法 | 第41-43页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第41页 |
| 3.1.2 组织总蛋白的提取 | 第41页 |
| 3.1.3 Western blot | 第41-42页 |
| 3.1.4 MTT法检测重组CypA对肿瘤细胞的促增殖作用 | 第42-43页 |
| 3.3 实验结果 | 第43-45页 |
| 3.3.1 Westernblot免疫印迹 | 第43-44页 |
| 3.3.2 重组CypA对肿瘤细胞的促增殖作用 | 第44-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 结论和展望 | 第47-49页 |
| 4.1 结论 | 第47-48页 |
| 4.2 展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
