摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
第一章 文献综述 | 第8-14页 |
1.1 多氯联苯的简介 | 第8页 |
1.2 多氯联苯的动植物毒性 | 第8-9页 |
1.3 二噁英类与非二噁英类多氯联苯 | 第9-10页 |
1.4 核受体及其家族成员PXP | 第10-11页 |
1.5 PXR结合靶基因的特征序列 | 第11页 |
1.6 植物修复PCBs | 第11-12页 |
1.7 本实验的提出与研究意义 | 第12-14页 |
第二章 材料和方法 | 第14-25页 |
2.1 实验材料 | 第14页 |
2.2 主要仪器与试剂 | 第14-15页 |
2.3 目的序列的获得 | 第15-19页 |
2.3.1 小鼠肝脏组织全RNA提取 | 第15页 |
2.3.2 总RNA中去除DNA | 第15-16页 |
2.3.3 逆转录 | 第16页 |
2.3.4 高效结合PXR的启动子重复序列PXRBIND的获得 | 第16页 |
2.3.5 PXR扩增目的片段 | 第16-18页 |
2.3.6 重叠PCR扩增目的序列 | 第18-19页 |
2.4 入门载体的构建 | 第19-21页 |
2.4.1 TOPO反应及BsaI酶切连接构建Entry | 第19-20页 |
2.4.2 转化及阳性克隆鉴定 | 第20-21页 |
2.5 表达载体的构建 | 第21页 |
2.6 农杆菌的制备 | 第21页 |
2.7 拟南芥转基因 | 第21-22页 |
2.8 拟南芥培养与筛选 | 第22-23页 |
2.8.1 拟南芥的培养 | 第22页 |
2.8.2 筛选 | 第22-23页 |
2.9 组织化学染色 | 第23页 |
2.9.1 GUS染色 | 第23页 |
2.9.2 类黄酮染色 | 第23页 |
2.10 GUS活性的定量分析 | 第23-25页 |
第三章 结果与分析 | 第25-33页 |
3.1 指示NDL-PCBs报告体系的构建 | 第25-26页 |
3.2 NDL-PCBs指示体系对内源次生代谢物不敏感 | 第26-28页 |
3.3 NDL-PCBs指示体系应答PXR配体的GUS活性定量分析 | 第28-30页 |
3.4 拟南芥维管组织不能有效运输NDL-PCBs | 第30-31页 |
3.5 新型生长素指示体系的构建 | 第31-33页 |
第四章 讨论 | 第33-36页 |
参考文献 | 第36-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
附录 | 第44-46页 |