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指示非二噁英类多氯联苯和植物生长素的新型报告体系的构建

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
第一章 文献综述第8-14页
    1.1 多氯联苯的简介第8页
    1.2 多氯联苯的动植物毒性第8-9页
    1.3 二噁英类与非二噁英类多氯联苯第9-10页
    1.4 核受体及其家族成员PXP第10-11页
    1.5 PXR结合靶基因的特征序列第11页
    1.6 植物修复PCBs第11-12页
    1.7 本实验的提出与研究意义第12-14页
第二章 材料和方法第14-25页
    2.1 实验材料第14页
    2.2 主要仪器与试剂第14-15页
    2.3 目的序列的获得第15-19页
        2.3.1 小鼠肝脏组织全RNA提取第15页
        2.3.2 总RNA中去除DNA第15-16页
        2.3.3 逆转录第16页
        2.3.4 高效结合PXR的启动子重复序列PXRBIND的获得第16页
        2.3.5 PXR扩增目的片段第16-18页
        2.3.6 重叠PCR扩增目的序列第18-19页
    2.4 入门载体的构建第19-21页
        2.4.1 TOPO反应及BsaI酶切连接构建Entry第19-20页
        2.4.2 转化及阳性克隆鉴定第20-21页
    2.5 表达载体的构建第21页
    2.6 农杆菌的制备第21页
    2.7 拟南芥转基因第21-22页
    2.8 拟南芥培养与筛选第22-23页
        2.8.1 拟南芥的培养第22页
        2.8.2 筛选第22-23页
    2.9 组织化学染色第23页
        2.9.1 GUS染色第23页
        2.9.2 类黄酮染色第23页
    2.10 GUS活性的定量分析第23-25页
第三章 结果与分析第25-33页
    3.1 指示NDL-PCBs报告体系的构建第25-26页
    3.2 NDL-PCBs指示体系对内源次生代谢物不敏感第26-28页
    3.3 NDL-PCBs指示体系应答PXR配体的GUS活性定量分析第28-30页
    3.4 拟南芥维管组织不能有效运输NDL-PCBs第30-31页
    3.5 新型生长素指示体系的构建第31-33页
第四章 讨论第33-36页
参考文献第36-43页
致谢第43-44页
附录第44-46页

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