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人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的提升研究

中文摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 绪论第13-65页
    1.1 人乳头瘤病毒与宫颈癌第14-25页
        1.1.1 人乳头瘤病毒简介第14-16页
        1.1.2 人乳头瘤病毒的组成第16-18页
        1.1.3 人乳头瘤病毒的分类与型别第18-20页
        1.1.4 人乳头瘤病毒的侵染过程第20-22页
        1.1.5 宫颈癌的筛查、治疗以及预防第22-25页
    1.2 热激蛋白与蛋白质折叠第25-40页
        1.2.1 热激蛋白超家族简介第25-26页
        1.2.2 热激蛋白的分类第26-40页
        1.2.3 热激蛋白在促进重组蛋白可溶性表达方面的应用第40页
    1.3 人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白第40-44页
        1.3.1 主要衣壳蛋白的晶体结构第40-42页
        1.3.2 Helix5对L1五聚体稳定性的影响第42-44页
    1.4 本论文的立题依据与研究意义第44-45页
    参考文献第45-65页
第二章 分子伴侣共表达增加人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达第65-95页
    2.1 实验部分第67-73页
        2.1.1 实验试剂与材料第67页
        2.1.2 实验仪器第67-68页
        2.1.3 重组载体与共表达系统的构建第68-69页
        2.1.4 HPV L1的表达与纯化第69-70页
        2.1.5 蛋白质免疫印迹分析第70-71页
        2.1.6 纯化过程中ATP浓度对L1五聚体形成的影响第71页
        2.1.7 L-阿拉伯糖的浓度对L1五聚体产率的影响第71-72页
        2.1.8 HPV L1五聚体的圆二色谱分析第72页
        2.1.9 HPV L1五聚体热稳定性的检测第72页
        2.1.10 HPV L1五聚体的体外自组装以及不连续氯化铯梯度离心第72-73页
        2.1.11 HPV L1 VLPs的体外表征测第73页
    2.2 结果与讨论第73-87页
        2.2.1 共表达系统中L1的表达与纯化第73-81页
        2.2.2 对共表达系统HPV L1五聚体的表征第81-83页
        2.2.3 HPV L1五聚体的体外自组装以及VLPs的纯化与表征第83-85页
        2.2.4 不同分子伴侣系统对L1可溶性表达的影响第85-87页
    2.3 本章小结第87-88页
    参考文献第88-95页
第三章 16型人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白469位点氨基酸残基的突变以及五聚体产率增加机理的研究第95-117页
    3.1 实验部分第96-102页
        3.1.1 实验试剂与材料第96-97页
        3.1.2 实验仪器第97页
        3.1.3 HPV16 L1的定点突变与表达重组载体的构建第97-99页
        3.1.4 HPV L1突变体的表达与纯化第99-100页
        3.1.5 蛋白质免疫印迹分析第100-101页
        3.1.6 突变体的圆二色谱分析第101页
        3.1.7 L1突变体的热稳定性检测第101页
        3.1.8 L1五聚体的体外自组装第101-102页
        3.1.9 分子动力学模拟以及溶剂可及表面积分析第102页
    3.2 结果与讨论第102-113页
        3.2.1 定点突变以及重组载体的构建第102-103页
        3.2.2 突变体的表达与纯化第103-105页
        3.2.3 对突变体二级结构与热稳定性的分析第105-107页
        3.2.4 突变体的体外自组装第107-108页
        3.2.5 分子动力学模拟第108-113页
    3.3 本章小结第113-114页
    参考文献第114-117页
作者简历第117-119页
攻读博士学位期间发表SCI论文第119-121页
致谢第121页

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