中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第13-65页 |
1.1 人乳头瘤病毒与宫颈癌 | 第14-25页 |
1.1.1 人乳头瘤病毒简介 | 第14-16页 |
1.1.2 人乳头瘤病毒的组成 | 第16-18页 |
1.1.3 人乳头瘤病毒的分类与型别 | 第18-20页 |
1.1.4 人乳头瘤病毒的侵染过程 | 第20-22页 |
1.1.5 宫颈癌的筛查、治疗以及预防 | 第22-25页 |
1.2 热激蛋白与蛋白质折叠 | 第25-40页 |
1.2.1 热激蛋白超家族简介 | 第25-26页 |
1.2.2 热激蛋白的分类 | 第26-40页 |
1.2.3 热激蛋白在促进重组蛋白可溶性表达方面的应用 | 第40页 |
1.3 人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白 | 第40-44页 |
1.3.1 主要衣壳蛋白的晶体结构 | 第40-42页 |
1.3.2 Helix5对L1五聚体稳定性的影响 | 第42-44页 |
1.4 本论文的立题依据与研究意义 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-65页 |
第二章 分子伴侣共表达增加人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达 | 第65-95页 |
2.1 实验部分 | 第67-73页 |
2.1.1 实验试剂与材料 | 第67页 |
2.1.2 实验仪器 | 第67-68页 |
2.1.3 重组载体与共表达系统的构建 | 第68-69页 |
2.1.4 HPV L1的表达与纯化 | 第69-70页 |
2.1.5 蛋白质免疫印迹分析 | 第70-71页 |
2.1.6 纯化过程中ATP浓度对L1五聚体形成的影响 | 第71页 |
2.1.7 L-阿拉伯糖的浓度对L1五聚体产率的影响 | 第71-72页 |
2.1.8 HPV L1五聚体的圆二色谱分析 | 第72页 |
2.1.9 HPV L1五聚体热稳定性的检测 | 第72页 |
2.1.10 HPV L1五聚体的体外自组装以及不连续氯化铯梯度离心 | 第72-73页 |
2.1.11 HPV L1 VLPs的体外表征测 | 第73页 |
2.2 结果与讨论 | 第73-87页 |
2.2.1 共表达系统中L1的表达与纯化 | 第73-81页 |
2.2.2 对共表达系统HPV L1五聚体的表征 | 第81-83页 |
2.2.3 HPV L1五聚体的体外自组装以及VLPs的纯化与表征 | 第83-85页 |
2.2.4 不同分子伴侣系统对L1可溶性表达的影响 | 第85-87页 |
2.3 本章小结 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-95页 |
第三章 16型人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白469位点氨基酸残基的突变以及五聚体产率增加机理的研究 | 第95-117页 |
3.1 实验部分 | 第96-102页 |
3.1.1 实验试剂与材料 | 第96-97页 |
3.1.2 实验仪器 | 第97页 |
3.1.3 HPV16 L1的定点突变与表达重组载体的构建 | 第97-99页 |
3.1.4 HPV L1突变体的表达与纯化 | 第99-100页 |
3.1.5 蛋白质免疫印迹分析 | 第100-101页 |
3.1.6 突变体的圆二色谱分析 | 第101页 |
3.1.7 L1突变体的热稳定性检测 | 第101页 |
3.1.8 L1五聚体的体外自组装 | 第101-102页 |
3.1.9 分子动力学模拟以及溶剂可及表面积分析 | 第102页 |
3.2 结果与讨论 | 第102-113页 |
3.2.1 定点突变以及重组载体的构建 | 第102-103页 |
3.2.2 突变体的表达与纯化 | 第103-105页 |
3.2.3 对突变体二级结构与热稳定性的分析 | 第105-107页 |
3.2.4 突变体的体外自组装 | 第107-108页 |
3.2.5 分子动力学模拟 | 第108-113页 |
3.3 本章小结 | 第113-114页 |
参考文献 | 第114-117页 |
作者简历 | 第117-119页 |
攻读博士学位期间发表SCI论文 | 第119-121页 |
致谢 | 第121页 |