玉蕈与金针菇原生质体融合研究
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 前言 | 第14-34页 |
| 1.1 原生质体融合技术 | 第14-18页 |
| 1.1.1 原生质体 | 第14页 |
| 1.1.2 原生质体融合技术 | 第14-15页 |
| 1.1.3 原生质体融合发展现状 | 第15-18页 |
| 1.2 原生质体融合方法 | 第18-26页 |
| 1.2.1 原生质体的制备和再生 | 第18-21页 |
| 1.2.2 亲本菌株的标记 | 第21-22页 |
| 1.2.3 原生质体融合 | 第22-24页 |
| 1.2.4 融合子的鉴定 | 第24-26页 |
| 1.3 亲本菌株概述 | 第26-33页 |
| 1.3.1 玉蕈概述 | 第27-29页 |
| 1.3.2 金针菇概述 | 第29-32页 |
| 1.3.3 食用菌发展现状 | 第32-33页 |
| 1.3.4 研究目的与意义 | 第33页 |
| 1.4 玉蕈与金针菇原生质体融合技术路线 | 第33-34页 |
| 第二章 双亲本菌株液体培养基筛选 | 第34-45页 |
| 2.1 试验材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 供试菌种 | 第34页 |
| 2.1.2 试剂 | 第34页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第34-35页 |
| 2.1.4 培养基(W/V) | 第35页 |
| 2.2 试验方法 | 第35-37页 |
| 2.2.1 菌种活化及提纯复壮 | 第35页 |
| 2.2.2 亲本颉颃试验 | 第35页 |
| 2.2.3 菌丝体液体培养 | 第35-36页 |
| 2.2.4 测量菌丝体干重 | 第36页 |
| 2.2.5 玉蕈液体培养基筛选 | 第36-37页 |
| 2.2.6 金针菇液体培养基筛选 | 第37页 |
| 2.3 试验结果与分析 | 第37-43页 |
| 2.3.1 菌种活化及提纯复壮 | 第37-38页 |
| 2.3.2 双亲本颉颃试验 | 第38-39页 |
| 2.3.3 玉蕈液体培养基筛选 | 第39-42页 |
| 2.3.4 金针菇液体培养基筛选 | 第42-43页 |
| 2.4 结论 | 第43-45页 |
| 第三章 双亲本菌株原生质体制备与再生 | 第45-63页 |
| 3.1 试验材料 | 第45-46页 |
| 3.1.1 供试菌种 | 第45页 |
| 3.1.2 试剂 | 第45页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第45-46页 |
| 3.1.4 培养基 | 第46页 |
| 3.1.5 渗透压稳定剂(简称渗稳剂) | 第46页 |
| 3.2 试验方法 | 第46-49页 |
| 3.2.1 菌丝体培养 | 第46-47页 |
| 3.2.2 酶液配置 | 第47页 |
| 3.2.3 原生质体制备 | 第47页 |
| 3.2.4 原生质体分离、纯化与计数 | 第47-48页 |
| 3.2.5 原生质体再生 | 第48页 |
| 3.2.6 双亲本原生质体制备与再生正交试验设计 | 第48-49页 |
| 3.2.7 再生培养基对再生的影响 | 第49页 |
| 3.3 试验结果与分析 | 第49-62页 |
| 3.3.1 双亲本原生质体释放方式 | 第49-50页 |
| 3.3.2 双亲本原生质体最佳制备条件 | 第50-54页 |
| 3.3.3 双亲本原生质体最佳再生条件 | 第54-58页 |
| 3.3.4 再生培养基的影响 | 第58-60页 |
| 3.3.5 双亲本原生质体再生过程 | 第60-61页 |
| 3.3.6 再生菌株与亲本菌株颉颃试验 | 第61-62页 |
| 3.4 讨论 | 第62页 |
| 3.5 结论 | 第62-63页 |
| 第四章 原生质体灭活标记及融合 | 第63-72页 |
| 4.1 试验材料 | 第63页 |
| 4.1.1 双亲本原生质体 | 第63页 |
| 4.1.2 试剂 | 第63页 |
| 4.1.3 试验仪器 | 第63页 |
| 4.1.4 培养基 | 第63页 |
| 4.2 试验方法 | 第63-65页 |
| 4.2.1 玉蕈原生质体紫外灭活标记 | 第63-64页 |
| 4.2.2 金针菇原生质体热灭活标记 | 第64页 |
| 4.2.3 原生质体融合 | 第64-65页 |
| 4.2.4 融合子检出 | 第65页 |
| 4.3 试验结果与分析 | 第65-71页 |
| 4.3.1 玉蕈原生质体紫外灭活结果 | 第65-66页 |
| 4.3.2 金针菇原生质体热灭活结果 | 第66-67页 |
| 4.3.3 原生质体融合 | 第67-70页 |
| 4.3.4 融合子检出 | 第70-71页 |
| 4.4 讨论 | 第71页 |
| 4.5 结论 | 第71-72页 |
| 第五章 融合株的鉴定 | 第72-87页 |
| 5.1 试验材料 | 第72-74页 |
| 5.1.1 供试菌种 | 第72页 |
| 5.1.2 试剂 | 第72-73页 |
| 5.1.3 试验仪器 | 第73-74页 |
| 5.1.4 培养基 | 第74页 |
| 5.1.5 RAPD-PCR反应随机引物 | 第74页 |
| 5.1.6 ERIC-PCR反应引物 | 第74页 |
| 5.2 试验方法 | 第74-78页 |
| 5.2.1 颉颃试验 | 第75页 |
| 5.2.2 菌落特征比较 | 第75页 |
| 5.2.3 菌丝体生长速度比较 | 第75页 |
| 5.2.4 菌丝形态比较 | 第75页 |
| 5.2.5 RAPD与ERIC分子标记方法鉴定 | 第75-78页 |
| 5.3 试验结果与分析 | 第78-86页 |
| 5.3.1 颉颃试验结果 | 第78-79页 |
| 5.3.2 菌落特征比较 | 第79-80页 |
| 5.3.3 菌丝体生长速度比较 | 第80-81页 |
| 5.3.4 菌丝形态比较 | 第81页 |
| 5.3.5 DNA纯度检测 | 第81-82页 |
| 5.3.6 遗传相似性分析 | 第82-86页 |
| 5.4 结论 | 第86-87页 |
| 第六章 总结 | 第87-90页 |
| 6.1 双亲本液体培养基筛选 | 第87页 |
| 6.2 双亲本原生质体制备与再生 | 第87-88页 |
| 6.3 双亲本原生质体灭活标记 | 第88页 |
| 6.4 原生质体融合 | 第88页 |
| 6.5 融合株鉴定 | 第88-89页 |
| 6.6 试验需改进的地方 | 第89页 |
| 6.7 创新之处 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
