| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 本文所用英文缩略词表 | 第12-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-30页 |
| 1.1 多肽的核酸适配体研究价值 | 第13-19页 |
| 1.1.1 多肽的生物学意义 | 第13-16页 |
| 1.1.2 常用的多肽检测方法 | 第16-18页 |
| 1.1.3 多肽的核酸适配体研究现状 | 第18-19页 |
| 1.2 筛选多肽的核酸适配体的常用方法 | 第19-23页 |
| 1.2.1 固定目标物法 | 第20-21页 |
| 1.2.2 毛细管电泳法 | 第21页 |
| 1.2.3 自动化筛选 | 第21-23页 |
| 1.3 多肽的核酸适配体的典型应用 | 第23-27页 |
| 1.3.1 胰岛素 | 第23-24页 |
| 1.3.2 β-淀粉样肽(1-40) | 第24-25页 |
| 1.3.3 促性腺激素释放激素 | 第25-26页 |
| 1.3.4 蛇毒肽 | 第26-27页 |
| 1.4 本文拟开展的工作 | 第27-30页 |
| 第2章 氧化石墨烯辅助的人胰多肽核酸适配体的筛选 | 第30-43页 |
| 2.1 前言 | 第30页 |
| 2.2 筛选流程 | 第30-31页 |
| 2.3 实验部分 | 第31-38页 |
| 2.3.1 试剂和仪器 | 第31-33页 |
| 2.3.2 缓冲溶液的配制 | 第33-34页 |
| 2.3.3 文库及引物的质量鉴定 | 第34页 |
| 2.3.4 人胰多肽的结构表征 | 第34页 |
| 2.3.5 氧化石墨烯与文库吸附比例的优化 | 第34-35页 |
| 2.3.6 氧化石墨烯与文库吸附时间的优化 | 第35页 |
| 2.3.7 人胰多肽核酸适配体的筛选过程 | 第35-38页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第38-42页 |
| 2.4.1 文库与引物的质量鉴定 | 第38页 |
| 2.4.2 人胰多肽的圆二色表征结果 | 第38-39页 |
| 2.4.3 氧化石墨烯与文库吸附比例的优化结果 | 第39页 |
| 2.4.4 氧化石墨烯与文库吸附时间的优化结果 | 第39-40页 |
| 2.4.5 PCR条件的优化结果 | 第40-42页 |
| 2.4.6 文库富集度的考察结果 | 第42页 |
| 2.5 小结 | 第42-43页 |
| 第3章 筛选产物测序结果的分析及序列表征 | 第43-57页 |
| 3.1 前言 | 第43页 |
| 3.2 实验部分 | 第43-46页 |
| 3.2.1 仪器和试剂 | 第43-45页 |
| 3.2.2 缓冲溶液的配制 | 第45页 |
| 3.2.3 双链特异性染料考察候选序列结合效果 | 第45页 |
| 3.2.4 单双链特异性染料及氧化石墨烯考察候选序列结合效果 | 第45页 |
| 3.2.5 氧化石墨烯考察核酸适配体的亲和力 | 第45-46页 |
| 3.2.6 荧光淬灭实验考察不同核酸适配体与人胰多肽的结合位点 | 第46页 |
| 3.2.7 荧光淬灭实验中双核酸适配体的选择性 | 第46页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第46-56页 |
| 3.3.1 筛选产物高通量测序结果分析 | 第46-48页 |
| 3.3.2 候选序列的初步表征结果 | 第48-50页 |
| 3.3.3 氧化石墨烯考察核酸适配体亲和力的结果 | 第50-52页 |
| 3.3.4 不同核酸适配体与人胰多肽的结合位点考察结果 | 第52-56页 |
| 3.4 小结 | 第56-57页 |
| 第4章 基于动态光散射法的双核酸适配体夹心试验用于人胰多肽的检测 | 第57-68页 |
| 4.1 前言 | 第57页 |
| 4.2 实验部分 | 第57-62页 |
| 4.2.1 仪器和试剂 | 第57-59页 |
| 4.2.2 缓冲溶液的配制 | 第59页 |
| 4.2.3 金纳米颗粒的合成 | 第59页 |
| 4.2.4 金纳米颗粒的修饰 | 第59页 |
| 4.2.5 基于动态光散射法的双核酸适配体夹心试验可行性的考察 | 第59-60页 |
| 4.2.6 双核酸适配体夹心试验的条件优化 | 第60-61页 |
| 4.2.7 缓冲溶液中双核酸适配体夹心试验检测人胰多肽的灵敏度 | 第61页 |
| 4.2.8 透射电子显微镜表征缓冲溶液中金纳米颗粒的聚集 | 第61页 |
| 4.2.9 缓冲溶液中双核酸适配体夹心试验检测人胰多肽的选择性 | 第61页 |
| 4.2.10 人血清中双核酸适配体夹心试验检测人胰多肽的效果 | 第61-62页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第62-67页 |
| 4.3.1 基于动态光散射法的双核酸适配体夹心试验的原理 | 第62-63页 |
| 4.3.2 金纳米颗粒的合成及修饰 | 第63页 |
| 4.3.3 基于动态光散射法的双核酸适配体夹心试验的可行性 | 第63-64页 |
| 4.3.4 双核酸适配体夹心试验的实验条件优化结果 | 第64页 |
| 4.3.5 缓冲溶液中双核酸适配体夹心试验检测人胰多肽的灵敏度 | 第64-66页 |
| 4.3.6 透射电子显微镜表征结果 | 第66页 |
| 4.3.7 缓冲溶液中双核酸适配体夹心试验检测人胰多肽的选择性 | 第66-67页 |
| 4.3.8 人血清中双核酸适配体夹心试验检测人胰多肽的效果 | 第67页 |
| 4.4 小结 | 第67-68页 |
| 第5章 基于双核酸适配体和金纳米颗粒增强信号的表面等离子体共振传感器用于人胰多肽的检测 | 第68-80页 |
| 5.1 前言 | 第68页 |
| 5.2 实验部分 | 第68-73页 |
| 5.2.1 仪器和试剂 | 第68-70页 |
| 5.2.2 缓冲溶液的配制 | 第70页 |
| 5.2.3 金纳米颗粒的合成 | 第70页 |
| 5.2.4 金纳米颗粒的修饰 | 第70页 |
| 5.2.5 捕获探针在金膜表面的修饰 | 第70-71页 |
| 5.2.6 可行性的考察 | 第71页 |
| 5.2.7 实验条件的优化 | 第71-72页 |
| 5.2.8 金纳米颗粒增强信号的表面等离子体共振传感器灵敏度的考察 | 第72页 |
| 5.2.9 金纳米颗粒增强信号的表面等离子体共振传感器选择性的考察 | 第72页 |
| 5.2.10 传感器再生性的考察 | 第72页 |
| 5.2.11 血清样品中人胰多肽的检测 | 第72-73页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第73-79页 |
| 5.3.1 传感器原理 | 第73页 |
| 5.3.2 金纳米颗粒的合成及修饰结果 | 第73-74页 |
| 5.3.3 金纳米颗粒增强信号的表面等离子体共振传感器可行性结果 | 第74-75页 |
| 5.3.4 实验条件优化的结果 | 第75-76页 |
| 5.3.5 金纳米颗粒增强信号的表面等离子体共振传感器的灵敏度 | 第76-77页 |
| 5.3.6 金纳米颗粒增强信号的表面等离子体共振传感器的选择性 | 第77-78页 |
| 5.3.7 金纳米颗粒增强信号的表面等离子体共振传感器的再生性 | 第78-79页 |
| 5.3.8 血清样品中人胰多肽的检测 | 第79页 |
| 5.4 小结 | 第79-80页 |
| 结论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-94页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
