| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语索引 | 第16-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-36页 |
| 1.1 食管鳞癌 | 第18-20页 |
| 1.1.1 食管鳞癌简介 | 第18页 |
| 1.1.2 食管鱗癌的临床表现 | 第18-19页 |
| 1.1.3 食管鳞癌病因概述 | 第19-20页 |
| 1.2 CPT1 | 第20-27页 |
| 1.2.1 CPT1简介 | 第20-21页 |
| 1.2.2 CPT1的活性的调节 | 第21-23页 |
| 1.2.3 CPT1的抑制剂 | 第23-24页 |
| 1.2.4 CPT1A与肿瘤 | 第24-27页 |
| 1.2.5 CPT1B与肿瘤 | 第27页 |
| 1.2.6 CPT1C与肿瘤 | 第27页 |
| 1.3 蛋白免疫印迹 | 第27-29页 |
| 1.3.1 蛋白免疫印迹原理 | 第27-29页 |
| 1.3.2 蛋白质免疫印记操作流程 | 第29页 |
| 1.4 基因芯片(DNA microarray)技术 | 第29-34页 |
| 1.4.1 基因芯片的原理 | 第30-31页 |
| 1.4.2 基因芯片数据的获得 | 第31页 |
| 1.4.3 基因芯片数据分析方法 | 第31-33页 |
| 1.4.4 基因芯片的应用 | 第33-34页 |
| 1.5 本论文研究的目的及意义 | 第34-36页 |
| 第二章 CPT1A对食管鳞癌细胞的增殖、迁移、侵袭、粘附和凋亡的影响 | 第36-59页 |
| 2.1 引言 | 第36-40页 |
| 2.1.1 CPT1A简介 | 第36-37页 |
| 2.1.2 食管鳞癌细胞的迁移和侵袭 | 第37-38页 |
| 2.1.3 RNAi | 第38-40页 |
| 2.2 实验方案 | 第40页 |
| 2.3 实验材料 | 第40-46页 |
| 2.3.1 实验细胞 | 第40-41页 |
| 2.3.2 实验试剂 | 第41-42页 |
| 2.3.3 siRNA序列 | 第42-43页 |
| 2.3.4 实验仪器设备 | 第43页 |
| 2.3.5 主要试剂的配制 | 第43-46页 |
| 2.4 实验方法 | 第46-52页 |
| 2.4.1 细胞培养 | 第46页 |
| 2.4.2 提取细胞总蛋白 | 第46-47页 |
| 2.4.3 蛋白免疫印迹 | 第47-49页 |
| 2.4.4 细胞排板及瞬时转染siRNA | 第49-50页 |
| 2.4.5 CCK-8测细胞增殖能力 | 第50页 |
| 2.4.6 细胞迁移实验 | 第50-51页 |
| 2.4.7 细胞侵袭实验 | 第51页 |
| 2.4.8 细胞粘附实验 | 第51页 |
| 2.4.9 细胞凋亡实验 | 第51-52页 |
| 2.5 实验结果 | 第52-58页 |
| 2.5.1 CPT1A在KYSE510和KYSE450中表达量较高 | 第52页 |
| 2.5.2 siRNA干扰后CPT1A的表达降低 | 第52-53页 |
| 2.5.3 CPT1A敲降后KYSE510和KYSE450的增殖能力降低 | 第53-54页 |
| 2.5.4 CPT1A敲降后KYSE510和KYSE450的迁移和侵袭能力降低 | 第54-56页 |
| 2.5.5 CPT1A敲降后KYSE510的粘附能力不变 | 第56-57页 |
| 2.5.6 CPT1A敲降后促进了KYSE510和KYSE450的凋亡发生 | 第57-58页 |
| 2.6 小结 | 第58-59页 |
| 第三章 etomoxir对食管鳞癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响 | 第59-68页 |
| 3.1 引言 | 第59页 |
| 3.2 实验方案 | 第59-60页 |
| 3.3 实验材料 | 第60页 |
| 3.3.1 实验试剂 | 第60页 |
| 3.3.2 主要试剂的配置 | 第60页 |
| 3.4 实验方法 | 第60页 |
| 3.5 实验结果 | 第60-67页 |
| 3.5.1 etomoxir对KYSE510细胞的IC50检测结果 | 第60-61页 |
| 3.5.2 etomoxir对CPT1A表达量的影响 | 第61-62页 |
| 3.5.3 etomoxir降低了KYSE510和KYSE450的增殖能力 | 第62-63页 |
| 3.5.4 etomoxir降低了KYSE510和KYSE450的迁移和侵袭能力 | 第63-65页 |
| 3.5.5 etomoxir对KYSE510的粘附能力没有影响 | 第65-66页 |
| 3.5.6 etomoxir促进了KYSE510和KYSE450的凋亡发生 | 第66-67页 |
| 3.6 小结 | 第67-68页 |
| 第四章 敲降CPT1A后的食管鳞癌细胞上皮-间质转化标志蛋白的检测和基因芯片分析结果 | 第68-74页 |
| 4.1 引言 | 第68页 |
| 4.2 实验方案 | 第68-69页 |
| 4.3 实验方法 | 第69-70页 |
| 4.3.1 统计学处理 | 第69页 |
| 4.3.2 RNA提取与送检 | 第69页 |
| 4.3.3 芯片检测方法 | 第69-70页 |
| 4.4 实验结果 | 第70-73页 |
| 4.4.1 敲降CPT1A后KYSE510中E-cadherin和N-cadherin的表达量不变 | 第70-71页 |
| 4.4.2 基因芯片分析结果 | 第71-73页 |
| 4.5 小结 | 第73-74页 |
| 第五章 结论 | 第74-76页 |
| 5.1 确定了KYSE510细胞中etomoxir的最佳作用剂量 | 第74页 |
| 5.2 证明了CPT1A能够促进食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力 | 第74页 |
| 5.3 证明了CPT1A参与的促进食管鳞癌细胞增殖、转移和凋亡抑制是通过其酶活性实现的 | 第74页 |
| 5.4 初步证明CPT1A能够抑制食管鳞癌细胞的凋亡发生 | 第74-75页 |
| 5.5 初步证明了CPT1A参与的促进食管鳞癌细胞转移的发生不是通过调节E-钙粘蛋白和N-钙粘蛋白的表达实现的 | 第75页 |
| 5.6 筛选出可能和CPT1A相互作用并参与调控食管鳞癌细胞增殖、转移和凋亡的29个基因 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-87页 |
| 附录A | 第87页 |
