摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
引言 | 第17-18页 |
第一章 天然多糖在基因传递中的应用和研究进展 | 第18-28页 |
1 前言 | 第18-19页 |
2 天然多糖的分类和修饰 | 第19-23页 |
2.1 天然多糖的分类 | 第19-20页 |
2.2 天然多糖的修饰 | 第20-23页 |
3 在基因传递中的应用 | 第23-25页 |
3.1 对正常细胞的转染 | 第23页 |
3.2 对干细胞的转染 | 第23-24页 |
3.3 对肿瘤细胞的转染 | 第24-25页 |
4 天然多糖应用于基因传递系统中的研究展望 | 第25页 |
5 本论文研究对象、设计思路与构想 | 第25-28页 |
5.1 论文研究对象的研究现状及立项依据 | 第25-26页 |
5.2 论文设计思路与构想 | 第26-27页 |
5.3 本论文所获基金项目支持 | 第27-28页 |
第二章 天然多糖的提取、分离和纯化 | 第28-47页 |
1 仪器与试剂 | 第28-29页 |
1.1 仪器 | 第28-29页 |
1.2 试剂 | 第29页 |
2 试验方法与结果 | 第29-31页 |
2.1 多糖的提取和纯化 | 第29页 |
2.2 分子量大小的测定 | 第29-30页 |
2.3 单糖组分分析 | 第30页 |
2.4 高碘酸氧化 | 第30-31页 |
2.5 傅里叶变换-红外光谱 | 第31页 |
2.6 元素分析 | 第31页 |
2.7 核磁共振氢谱分析 | 第31页 |
2.8 刚果红分析 | 第31页 |
2.9 原子力显微镜分析 | 第31页 |
3. 结果与讨论 | 第31-46页 |
3.1 多糖的提取和纯化 | 第31-32页 |
3.2 分子量的测定 | 第32-34页 |
3.3 单糖组分的分析 | 第34-37页 |
3.4 单糖间链连接方式的分析 | 第37-38页 |
3.5 红外光谱分析 | 第38-40页 |
3.6 元素分析 | 第40页 |
3.7 核磁共振氢谱分析 | 第40-42页 |
3.8 刚果红实验 | 第42-43页 |
3.9 原子力显微镜(AFM)分析 | 第43-46页 |
4 小结 | 第46-47页 |
第三章 天然多糖的阳离子化修饰及其表征 | 第47-58页 |
1 实验材料 | 第47-48页 |
1.1 仪器 | 第47-48页 |
1.2 试剂 | 第48页 |
2 试验方法 | 第48-49页 |
2.1 天然多糖的阳离子化修饰 | 第48-49页 |
2.2 阳离子化多糖的表征 | 第49页 |
2.3 单糖组分分析 | 第49页 |
3 结果与讨论 | 第49-57页 |
3.1 红外分析 | 第49-51页 |
3.2 核磁分析 | 第51-53页 |
3.3 元素分析 | 第53-54页 |
3.4 Zeta电位分析 | 第54页 |
3.5 单糖组分分析 | 第54-57页 |
4 小结 | 第57-58页 |
第四章 阳离子化多糖基因传递载体的构建 | 第58-71页 |
1 仪器与试剂 | 第58-59页 |
1.1 仪器 | 第58页 |
1.2 试剂 | 第58-59页 |
2 试验方法 | 第59-62页 |
2.1 非病毒质粒SOX2的扩增 | 第59-61页 |
2.2 阳离子化多糖与质粒的结合 | 第61页 |
2.3 阳离子化多糖/pDNA纳米粒的表征 | 第61-62页 |
3 结果 | 第62-70页 |
3.1 琼脂糖凝胶电泳-质粒滞留效果 | 第62-63页 |
3.2 粒径大小和Zeta电位测定 | 第63-65页 |
3.3 形态观察 | 第65-70页 |
4 小结 | 第70-71页 |
第五章 阳离子多糖/pSOX2复合物的转染效率及其机理研究 | 第71-87页 |
1 仪器与试剂 | 第71-72页 |
1.1 仪器 | 第71页 |
1.2 试剂 | 第71-72页 |
1.3 引物序列 | 第72页 |
2 试验方法 | 第72-74页 |
2.1 细胞培养 | 第72-73页 |
2.2 细胞毒性实验 | 第73页 |
2.3 酶联免疫吸收测定(ELISA)REF细胞中SOX2蛋白表达量 | 第73页 |
2.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测REF细胞中SOX2 RNA的转录水平 | 第73页 |
2.5 阳离子多糖/pSOX2纳米粒基因表达机理的研究 | 第73-74页 |
3 结果与讨论 | 第74-86页 |
3.1 细胞毒性 | 第74-75页 |
3.2 酶联免疫吸收测定 (ELISA) 细胞中SOX2蛋白表达 | 第75-77页 |
3.3 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测REF细胞中SOX2 RNA的转录水平 | 第77-79页 |
3.4 讨论转染效率与天然多糖结构的关系 | 第79页 |
3.5 阳离子多糖/pSOX2纳米粒细胞吞噬机理的研究 | 第79-86页 |
4 小结 | 第86-87页 |
全文总结与创新点 | 第87-90页 |
一、全文总结 | 第87-89页 |
二、创新点 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
攻读硕士学位期间已发表或完成的论文 | 第96页 |