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小麦悬浮细胞系的建立及DON毒素与小麦细胞互作的转录组分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略语表Table of abbreviation第10-11页
1 引言第11-23页
    1.1 研究的背景第11页
    1.2 禾谷镰刀菌DON毒素第11-12页
    1.3 禾谷镰刀菌DON毒素对人畜的危害第12页
    1.4 禾谷镰刀菌DON毒素对植物的致病作用第12-13页
    1.5 禾谷镰刀菌DON毒素对植物的毒害机理第13-14页
    1.6 禾谷镰刀菌DON毒素解毒相关基因应用研究进展第14-17页
        1.6.1 乙酰转移酶第14页
        1.6.2 核糖体亚基突变体第14-15页
        1.6.3 毒素输出泵蛋白第15-16页
        1.6.4 糖基转移酶第16页
        1.6.5 细胞色素P450第16-17页
        1.6.6 氧化调节相关基因第17页
    1.7 功能基因组学研究方法进展第17-20页
        1.7.1 抑制差减杂交技术第18页
        1.7.2 基因芯片技术第18-20页
    1.8 悬浮细胞培养第20-22页
    1.9 研究的目的和意义第22-23页
2 悬浮细胞系的建立和状态描述第23-37页
    2.1 材料与方法第23-28页
        2.1.1 愈伤组织诱导和筛选第23页
        2.1.2 悬浮培养第23-24页
        2.1.3 小麦郑9023悬浮细胞系的状态的描述第24-25页
        2.1.4 悬浮系的短期保存第25页
        2.1.5 悬浮系分化培养与植株再生第25页
        2.1.6 悬浮系的转化第25-27页
        2.1.7 培养基列表第27-28页
    2.2 结果与分析第28-35页
        2.2.1 悬浮细胞系的建立第28-31页
        2.2.2 郑9023悬浮细胞系状态描述第31-33页
        2.2.3 悬浮系的保存第33-34页
        2.2.4 悬浮系分化培养与植株再生第34页
        2.2.5 悬浮系的转化第34-35页
    2.3 讨论第35-37页
        2.3.1 胚性悬浮系建立的条件第35页
        2.3.2 胚性愈伤组织的筛选第35-36页
        2.3.3 外殖体对悬浮系建立的影响第36页
        2.3.4 悬浮系再生能力的丧失第36页
        2.3.5 悬浮系固体双层培养第36-37页
        2.3.6 悬浮系细胞活力检测第37页
3 悬浮细胞与毒素互作第37-44页
    3.1 材料与方法第37-39页
        3.1.1 粗毒素的提取第37-38页
        3.1.2 粗毒素对烟草细胞的毒害试验第38页
        3.1.3 粗毒素对小麦细胞的毒害试验第38-39页
        3.1.4 DON对小麦细胞的毒害试验第39页
    3.2 结果与分析第39-43页
        3.2.1 粗毒素对烟草细胞的影响第39-41页
        3.2.2 粗毒素对小麦细胞的影响第41-42页
        3.2.3 DON对小麦细胞活力的影响第42-43页
    3.3 讨论第43-44页
        3.3.1 毒素的类激素效应第43页
        3.3.2 毒素对细胞液泡膜的损害第43-44页
4 DON响应型cDNA文库的构建及差异表达基因的分离和分析第44-83页
    4.1 材料与方法第44-59页
        4.1.1 材料处理第44页
        4.1.2 总RNA抽提和mRNA分离第44-46页
        4.1.3 SSH文库的构建第46-53页
        4.1.4 SSH文库的筛选第53-55页
        4.1.5 差异基因的生物信息学分析第55-56页
        4.1.6 部分EST的表达谱分析第56-59页
    4.2 结果与分析第59-76页
        4.2.1 总RNA含量和质量的检测第59-60页
        4.2.2 mRNA的质量检测第60页
        4.2.3 SSH文库的构建及质量检测第60-63页
        4.2.4 SSH文库的筛选第63-65页
        4.2.5 差异表达基因的分析第65-70页
        4.2.6 部分基因的表达谱分析第70-76页
    4.3 讨论第76-80页
        4.3.1 DON毒素处理浓度的选定第76页
        4.3.2 DON诱导型基因—多药抗性蛋白第76-78页
        4.3.3 DON诱导型基因—糖基转移酶第78页
        4.3.4 DON诱导型基因—抗氧化相关蛋白第78-79页
        4.3.5 DON抑制型基因第79-80页
    4.5 实验程序附录第80-83页
        4.5.1 Trizol法提取植物RNA第80-81页
        4.5.2 总RNA中基因组DNA的消除第81页
        4.5.3 cDNA第一链的合成第81-82页
        4.5.4 电转化感受态细胞的制备第82-83页
参考文献第83-90页
致谢第90页

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