摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略语表Table of abbreviation | 第10-11页 |
1 引言 | 第11-23页 |
1.1 研究的背景 | 第11页 |
1.2 禾谷镰刀菌DON毒素 | 第11-12页 |
1.3 禾谷镰刀菌DON毒素对人畜的危害 | 第12页 |
1.4 禾谷镰刀菌DON毒素对植物的致病作用 | 第12-13页 |
1.5 禾谷镰刀菌DON毒素对植物的毒害机理 | 第13-14页 |
1.6 禾谷镰刀菌DON毒素解毒相关基因应用研究进展 | 第14-17页 |
1.6.1 乙酰转移酶 | 第14页 |
1.6.2 核糖体亚基突变体 | 第14-15页 |
1.6.3 毒素输出泵蛋白 | 第15-16页 |
1.6.4 糖基转移酶 | 第16页 |
1.6.5 细胞色素P450 | 第16-17页 |
1.6.6 氧化调节相关基因 | 第17页 |
1.7 功能基因组学研究方法进展 | 第17-20页 |
1.7.1 抑制差减杂交技术 | 第18页 |
1.7.2 基因芯片技术 | 第18-20页 |
1.8 悬浮细胞培养 | 第20-22页 |
1.9 研究的目的和意义 | 第22-23页 |
2 悬浮细胞系的建立和状态描述 | 第23-37页 |
2.1 材料与方法 | 第23-28页 |
2.1.1 愈伤组织诱导和筛选 | 第23页 |
2.1.2 悬浮培养 | 第23-24页 |
2.1.3 小麦郑9023悬浮细胞系的状态的描述 | 第24-25页 |
2.1.4 悬浮系的短期保存 | 第25页 |
2.1.5 悬浮系分化培养与植株再生 | 第25页 |
2.1.6 悬浮系的转化 | 第25-27页 |
2.1.7 培养基列表 | 第27-28页 |
2.2 结果与分析 | 第28-35页 |
2.2.1 悬浮细胞系的建立 | 第28-31页 |
2.2.2 郑9023悬浮细胞系状态描述 | 第31-33页 |
2.2.3 悬浮系的保存 | 第33-34页 |
2.2.4 悬浮系分化培养与植株再生 | 第34页 |
2.2.5 悬浮系的转化 | 第34-35页 |
2.3 讨论 | 第35-37页 |
2.3.1 胚性悬浮系建立的条件 | 第35页 |
2.3.2 胚性愈伤组织的筛选 | 第35-36页 |
2.3.3 外殖体对悬浮系建立的影响 | 第36页 |
2.3.4 悬浮系再生能力的丧失 | 第36页 |
2.3.5 悬浮系固体双层培养 | 第36-37页 |
2.3.6 悬浮系细胞活力检测 | 第37页 |
3 悬浮细胞与毒素互作 | 第37-44页 |
3.1 材料与方法 | 第37-39页 |
3.1.1 粗毒素的提取 | 第37-38页 |
3.1.2 粗毒素对烟草细胞的毒害试验 | 第38页 |
3.1.3 粗毒素对小麦细胞的毒害试验 | 第38-39页 |
3.1.4 DON对小麦细胞的毒害试验 | 第39页 |
3.2 结果与分析 | 第39-43页 |
3.2.1 粗毒素对烟草细胞的影响 | 第39-41页 |
3.2.2 粗毒素对小麦细胞的影响 | 第41-42页 |
3.2.3 DON对小麦细胞活力的影响 | 第42-43页 |
3.3 讨论 | 第43-44页 |
3.3.1 毒素的类激素效应 | 第43页 |
3.3.2 毒素对细胞液泡膜的损害 | 第43-44页 |
4 DON响应型cDNA文库的构建及差异表达基因的分离和分析 | 第44-83页 |
4.1 材料与方法 | 第44-59页 |
4.1.1 材料处理 | 第44页 |
4.1.2 总RNA抽提和mRNA分离 | 第44-46页 |
4.1.3 SSH文库的构建 | 第46-53页 |
4.1.4 SSH文库的筛选 | 第53-55页 |
4.1.5 差异基因的生物信息学分析 | 第55-56页 |
4.1.6 部分EST的表达谱分析 | 第56-59页 |
4.2 结果与分析 | 第59-76页 |
4.2.1 总RNA含量和质量的检测 | 第59-60页 |
4.2.2 mRNA的质量检测 | 第60页 |
4.2.3 SSH文库的构建及质量检测 | 第60-63页 |
4.2.4 SSH文库的筛选 | 第63-65页 |
4.2.5 差异表达基因的分析 | 第65-70页 |
4.2.6 部分基因的表达谱分析 | 第70-76页 |
4.3 讨论 | 第76-80页 |
4.3.1 DON毒素处理浓度的选定 | 第76页 |
4.3.2 DON诱导型基因—多药抗性蛋白 | 第76-78页 |
4.3.3 DON诱导型基因—糖基转移酶 | 第78页 |
4.3.4 DON诱导型基因—抗氧化相关蛋白 | 第78-79页 |
4.3.5 DON抑制型基因 | 第79-80页 |
4.5 实验程序附录 | 第80-83页 |
4.5.1 Trizol法提取植物RNA | 第80-81页 |
4.5.2 总RNA中基因组DNA的消除 | 第81页 |
4.5.3 cDNA第一链的合成 | 第81-82页 |
4.5.4 电转化感受态细胞的制备 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-90页 |
致谢 | 第90页 |