| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 新生儿高胆红素血症概述 | 第12-18页 |
| 1.1.1 新生儿高胆红素血症 | 第12页 |
| 1.1.2 核黄疸 | 第12-13页 |
| 1.1.3 新生儿黄疸发病机理 | 第13-16页 |
| 1.1.4 传统治疗方法 | 第16-18页 |
| 1.2 RNA 干扰 | 第18-24页 |
| 1.2.1 RNA 干扰的发现 | 第19-20页 |
| 1.2.2 RNA 干扰的机制 | 第20-21页 |
| 1.2.3 RNA 干扰与疾病治疗 | 第21-24页 |
| 1.3 实验方案 | 第24-26页 |
| 1.3.1 有效siRNA 的筛选 | 第24-25页 |
| 1.3.2 细胞中高表达HO-1 模型建立及考察siRNA 对HO-1 的抑制效果 | 第25页 |
| 1.3.3 新生期大鼠黄疸模型建立及siRNA 的治疗效果 | 第25-26页 |
| 第二章 材料和方法 | 第26-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 动物 | 第26页 |
| 2.1.2 细胞 | 第26页 |
| 2.1.3 主要试剂及耗材 | 第26-28页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第28-29页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第29页 |
| 2.2 方法 | 第29-39页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第29-30页 |
| 2.2.2 细胞转染 | 第30-31页 |
| 2.2.3 细胞转染效率检测方法 | 第31页 |
| 2.2.4 DAPI 染色 | 第31页 |
| 2.2.5 siRNA 序列设计及合成 | 第31-32页 |
| 2.2.6 总RNA 提取 | 第32页 |
| 2.2.7 RT-PCR 扩增目的片段 | 第32-34页 |
| 2.2.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第34页 |
| 2.2.9 Western Blot 方法 | 第34-37页 |
| 2.2.10 新生鼠黄疸模型建立 | 第37页 |
| 2.2.11 siRNA 导入大鼠体内 | 第37页 |
| 2.2.12 胆红素浓度测定 | 第37页 |
| 2.2.13 肝脏、脾脏总蛋白抽提 | 第37-39页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第39-51页 |
| 3.1 SIRNA 转染 BRL 细胞转染效率检测 | 第39-40页 |
| 3.2 SIRNA 筛选 | 第40-41页 |
| 3.3 MRNA 水平检测 SIRNA 时间梯度干扰效果 | 第41-42页 |
| 3.4 MRNA 水平检测 SIRNA 浓度梯度干扰效果 | 第42-43页 |
| 3.5 HEMIN 诱导 BRL 细胞 HO-1 表达增加 | 第43-44页 |
| 3.5.1 浓度选择 | 第43页 |
| 3.5.2 时间选择 | 第43-44页 |
| 3.6 蛋白水平检测 siRNA 时间梯度干扰效果 | 第44-45页 |
| 3.7 新生鼠黄疸模型建立 | 第45-46页 |
| 3.8 不同浓度甲氧基修饰的 siRNA-4 对新生鼠黄疸的影响 | 第46-49页 |
| 3.9 SIRNA 注射后不同时间对新生黄疸鼠的影响 | 第49-51页 |
| 第四章 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
