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井冈霉素生物转化菌种的筛选与产物鉴定

摘要第11-12页
ABSTRACT第12页
第一章 前言第14-22页
    1 井冈类化合物的概述第14-15页
        1.1 井冈霉素第14页
        1.2 井冈霉素的衍生物第14-15页
    2 井冈霉素裂解的研究第15-19页
        2.1 化学法第15-17页
            2.1.1 裂解井冈霉素为井冈霉亚基胺A第15页
            2.1.2 裂解井冈霉素为井冈霉胺和羟基井冈霉胺第15-16页
            2.1.3 裂解井冈霉亚基胺A为井冈胺或井冈霉胺第16页
            2.1.4 化学法合成井冈胺第16-17页
        2.2 固定化细胞法第17页
        2.3 微生物转化法第17-19页
            2.3.1 转化生产井冈胺及井冈霉胺的微生物第18页
            2.3.2 井冈霉素的裂解过程第18-19页
        2.4 从井冈霉素发酵液中提取井冈胺第19页
    3 井冈类物质的应用第19-21页
        3.1 井冈霉亚基胺A的应用第19-20页
        3.2 井冈胺类物质的应用第20-21页
            3.2.1 以井冈胺为原料制备伏格列波糖第20-21页
            3.2.2 以井冈霉胺为原料制备伏格列波糖第21页
    4 立题依据第21-22页
第二章 井冈霉素生物转化菌种的筛选与鉴定第22-46页
    1 实验材料与设备第22-24页
        1.1 试剂、菌种及土样第22页
        1.2 实验设备第22-23页
        1.3 培养基配方第23-24页
    2 实验方法第24-29页
        2.1 HPLC法检测井冈霉亚基胺A第24页
        2.2 糖苷酶抑制法检测井冈霉胺的活性第24-26页
            2.2.1 溶液配制第24-25页
            2.2.2 猪小肠糖类分解酶粗提液的制备第25页
            2.2.3 糖苷酶抑制活性实验第25页
            2.2.4 结果的检测第25-26页
        2.3 筛选方法第26-27页
            2.3.1 琼脂块培养法筛选第26页
            2.3.2 混菌培养法筛选第26-27页
            2.3.3 富集培养法筛选第27页
        2.4 活性菌株的鉴定第27-28页
            2.4.1 真菌的鉴定第27-28页
            2.4.2 细菌的鉴定第28页
        2.5 活性菌株的培养方法第28-29页
            2.5.1 菌株Y07F-1239、Y07F-1248及Y07F-1287的培养方法第28页
            2.5.2 菌株Y07B-0134的基本培养方法第28-29页
    3 实验结果第29-43页
        3.1 微生物转化井冈霉素A的筛选结果第29页
        3.2 井冈霉亚基胺A产生菌的转化结果第29-31页
        3.3 糖苷酶抑制法检测井冈霉胺的活性结果第31页
        3.4 活性菌株的鉴定结果第31-43页
            3.4.1 真菌的鉴定结果第31-39页
            3.4.2 细菌鉴定结果第39-43页
    4 结果与讨论第43-46页
        4.1 实验结果第43-44页
        4.2 讨论第44-46页
            4.2.1 琼脂块筛选法与混菌培养法第44页
            4.2.2 富集培养法第44-46页
第三章 井冈霉胺产生菌培养条件的优化第46-62页
    1 材料与方法第46-47页
        1.1 试剂第46页
        1.2 仪器与设备第46-47页
        1.3 基础培养基第47页
    2 实验方法第47-49页
        2.1 基础培养方法第47-48页
        2.2 底物投料量及培养时间的优化第48页
        2.3 转化培养基初始pH的优化第48页
        2.4 培养基碳、氮源的添加实验第48页
        2.5 菌体生长代谢曲线的测定第48页
        2.6 底物降解及产物生成的测定第48-49页
    3 实验结果第49-59页
        3.1 井冈霉胺最低检测限的考察第49-50页
        3.2 井冈霉胺标准曲线的绘制第50-51页
        3.3 基础培养方法的转化结果第51页
        3.4 底物投料量与转化时间的优化结果第51-52页
        3.5 转化培养基初始pH值的优化结果第52-53页
        3.6 碳源添加实验结果第53-55页
        3.7 氮源添加实验结果第55-56页
        3.8 菌体生长代谢曲线的测定第56-58页
        3.9 转化时间的考察第58-59页
    4 小结与讨论第59-62页
        4.1 小结第59页
        4.2 讨论第59-62页
第四章 井冈霉素生物转化产物的检测与分离第62-74页
    1. 实验材料第62页
        1.1 实验试剂第62页
        1.2 实验仪器第62页
    2. 实验方法第62-65页
        2.1 转化产物的检测第62-63页
            2.1.1 TLC法检测井冈霉亚基胺A和井冈霉胺第63页
            2.1.2 HPLC法检测井冈霉亚基胺A第63页
            2.1.3 糖苷酶抑制剂法检测井冈霉胺第63页
        2.2 转化产物的分离第63-64页
            2.2.1 树脂的预处理、再生和转型第63页
            2.2.2 井冈霉亚基胺 A的分离第63-64页
            2.2.3 井冈霉胺的分离第64页
        2.3 转化产物的鉴定第64-65页
    3. 实验结果第65-72页
        3.1 转化产物的检测结果第65-67页
            3.1.1 TLC法检测结果第65-66页
            3.1.2 HPLC法检测结果第66-67页
        3.2 转化产物的分离结果第67-70页
            3.2.1 井冈霉亚基胺A的分离结果第67-68页
            3.2.2 井冈霉胺分离条件的考察结果第68-70页
        3.3 转化产物的鉴定结果第70-72页
            3.3.1 井冈霉亚基胺 A的鉴定第70-71页
            3.3.2 井冈霉胺的鉴定第71-72页
    4. 小结与讨论第72-74页
        4.1 小结第72-73页
        4.2 讨论第73-74页
结论第74-75页
参考文献第75-78页
致谢第78页

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