摘要 | 第11-12页 |
ABSTRACT | 第12页 |
第一章 前言 | 第14-22页 |
1 井冈类化合物的概述 | 第14-15页 |
1.1 井冈霉素 | 第14页 |
1.2 井冈霉素的衍生物 | 第14-15页 |
2 井冈霉素裂解的研究 | 第15-19页 |
2.1 化学法 | 第15-17页 |
2.1.1 裂解井冈霉素为井冈霉亚基胺A | 第15页 |
2.1.2 裂解井冈霉素为井冈霉胺和羟基井冈霉胺 | 第15-16页 |
2.1.3 裂解井冈霉亚基胺A为井冈胺或井冈霉胺 | 第16页 |
2.1.4 化学法合成井冈胺 | 第16-17页 |
2.2 固定化细胞法 | 第17页 |
2.3 微生物转化法 | 第17-19页 |
2.3.1 转化生产井冈胺及井冈霉胺的微生物 | 第18页 |
2.3.2 井冈霉素的裂解过程 | 第18-19页 |
2.4 从井冈霉素发酵液中提取井冈胺 | 第19页 |
3 井冈类物质的应用 | 第19-21页 |
3.1 井冈霉亚基胺A的应用 | 第19-20页 |
3.2 井冈胺类物质的应用 | 第20-21页 |
3.2.1 以井冈胺为原料制备伏格列波糖 | 第20-21页 |
3.2.2 以井冈霉胺为原料制备伏格列波糖 | 第21页 |
4 立题依据 | 第21-22页 |
第二章 井冈霉素生物转化菌种的筛选与鉴定 | 第22-46页 |
1 实验材料与设备 | 第22-24页 |
1.1 试剂、菌种及土样 | 第22页 |
1.2 实验设备 | 第22-23页 |
1.3 培养基配方 | 第23-24页 |
2 实验方法 | 第24-29页 |
2.1 HPLC法检测井冈霉亚基胺A | 第24页 |
2.2 糖苷酶抑制法检测井冈霉胺的活性 | 第24-26页 |
2.2.1 溶液配制 | 第24-25页 |
2.2.2 猪小肠糖类分解酶粗提液的制备 | 第25页 |
2.2.3 糖苷酶抑制活性实验 | 第25页 |
2.2.4 结果的检测 | 第25-26页 |
2.3 筛选方法 | 第26-27页 |
2.3.1 琼脂块培养法筛选 | 第26页 |
2.3.2 混菌培养法筛选 | 第26-27页 |
2.3.3 富集培养法筛选 | 第27页 |
2.4 活性菌株的鉴定 | 第27-28页 |
2.4.1 真菌的鉴定 | 第27-28页 |
2.4.2 细菌的鉴定 | 第28页 |
2.5 活性菌株的培养方法 | 第28-29页 |
2.5.1 菌株Y07F-1239、Y07F-1248及Y07F-1287的培养方法 | 第28页 |
2.5.2 菌株Y07B-0134的基本培养方法 | 第28-29页 |
3 实验结果 | 第29-43页 |
3.1 微生物转化井冈霉素A的筛选结果 | 第29页 |
3.2 井冈霉亚基胺A产生菌的转化结果 | 第29-31页 |
3.3 糖苷酶抑制法检测井冈霉胺的活性结果 | 第31页 |
3.4 活性菌株的鉴定结果 | 第31-43页 |
3.4.1 真菌的鉴定结果 | 第31-39页 |
3.4.2 细菌鉴定结果 | 第39-43页 |
4 结果与讨论 | 第43-46页 |
4.1 实验结果 | 第43-44页 |
4.2 讨论 | 第44-46页 |
4.2.1 琼脂块筛选法与混菌培养法 | 第44页 |
4.2.2 富集培养法 | 第44-46页 |
第三章 井冈霉胺产生菌培养条件的优化 | 第46-62页 |
1 材料与方法 | 第46-47页 |
1.1 试剂 | 第46页 |
1.2 仪器与设备 | 第46-47页 |
1.3 基础培养基 | 第47页 |
2 实验方法 | 第47-49页 |
2.1 基础培养方法 | 第47-48页 |
2.2 底物投料量及培养时间的优化 | 第48页 |
2.3 转化培养基初始pH的优化 | 第48页 |
2.4 培养基碳、氮源的添加实验 | 第48页 |
2.5 菌体生长代谢曲线的测定 | 第48页 |
2.6 底物降解及产物生成的测定 | 第48-49页 |
3 实验结果 | 第49-59页 |
3.1 井冈霉胺最低检测限的考察 | 第49-50页 |
3.2 井冈霉胺标准曲线的绘制 | 第50-51页 |
3.3 基础培养方法的转化结果 | 第51页 |
3.4 底物投料量与转化时间的优化结果 | 第51-52页 |
3.5 转化培养基初始pH值的优化结果 | 第52-53页 |
3.6 碳源添加实验结果 | 第53-55页 |
3.7 氮源添加实验结果 | 第55-56页 |
3.8 菌体生长代谢曲线的测定 | 第56-58页 |
3.9 转化时间的考察 | 第58-59页 |
4 小结与讨论 | 第59-62页 |
4.1 小结 | 第59页 |
4.2 讨论 | 第59-62页 |
第四章 井冈霉素生物转化产物的检测与分离 | 第62-74页 |
1. 实验材料 | 第62页 |
1.1 实验试剂 | 第62页 |
1.2 实验仪器 | 第62页 |
2. 实验方法 | 第62-65页 |
2.1 转化产物的检测 | 第62-63页 |
2.1.1 TLC法检测井冈霉亚基胺A和井冈霉胺 | 第63页 |
2.1.2 HPLC法检测井冈霉亚基胺A | 第63页 |
2.1.3 糖苷酶抑制剂法检测井冈霉胺 | 第63页 |
2.2 转化产物的分离 | 第63-64页 |
2.2.1 树脂的预处理、再生和转型 | 第63页 |
2.2.2 井冈霉亚基胺 A的分离 | 第63-64页 |
2.2.3 井冈霉胺的分离 | 第64页 |
2.3 转化产物的鉴定 | 第64-65页 |
3. 实验结果 | 第65-72页 |
3.1 转化产物的检测结果 | 第65-67页 |
3.1.1 TLC法检测结果 | 第65-66页 |
3.1.2 HPLC法检测结果 | 第66-67页 |
3.2 转化产物的分离结果 | 第67-70页 |
3.2.1 井冈霉亚基胺A的分离结果 | 第67-68页 |
3.2.2 井冈霉胺分离条件的考察结果 | 第68-70页 |
3.3 转化产物的鉴定结果 | 第70-72页 |
3.3.1 井冈霉亚基胺 A的鉴定 | 第70-71页 |
3.3.2 井冈霉胺的鉴定 | 第71-72页 |
4. 小结与讨论 | 第72-74页 |
4.1 小结 | 第72-73页 |
4.2 讨论 | 第73-74页 |
结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-78页 |
致谢 | 第78页 |