中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第1章 绪论 | 第12-23页 |
1.1 农业生产中氮肥使用现状 | 第12页 |
1.2 改善作物氮肥利用率的措施 | 第12页 |
1.3 植物内生菌促进宿主氮吸收与代谢研究进展 | 第12-18页 |
1.3.1 植物内生菌促进宿主氮吸收 | 第13-15页 |
1.3.1.1 植物内生菌促进宿主对无机氮素的吸收 | 第13-14页 |
1.3.1.2 植物内生菌促进宿主对有机氮素的吸收 | 第14-15页 |
1.3.2 植物内生菌促进宿主氮代谢 | 第15-16页 |
1.3.2.1 植物内生菌影响宿主体内不同形态氮素含量 | 第15页 |
1.3.2.2 植物内生菌影响宿主体内氮代谢相关酶活性 | 第15-16页 |
1.3.2.3 植物内生菌对宿主体内氮代谢相关微量生长调节物质的影响 | 第16页 |
1.3.3 植物内生菌通过调节宿主氮吸收与代谢从而影响宿主生长发育 | 第16-17页 |
1.3.3.1 植物内生菌通过影响植物氮代谢从而促进宿主分蘖 | 第17页 |
1.3.3.2 植物内生菌提高宿主体内叶绿素含量和光合速率 | 第17页 |
1.3.4 植物内生菌促进宿主氮素利用小结 | 第17-18页 |
1.4 水稻对氮素的利用 | 第18-21页 |
1.4.1 水稻生长环境中的氮素循环 | 第18-20页 |
1.4.2 水稻对氮素的吸收和转化过程 | 第20-21页 |
1.5 本研究的研究目的、立题依据和研究内容 | 第21-23页 |
第2章 内生真菌B3的GFP转化及其与水稻共生关系的研究 | 第23-37页 |
2.1 材料与方法 | 第23-29页 |
2.1.1 实验菌株、质粒和水稻 | 第23-24页 |
2.1.2 培养基和试剂 | 第24-25页 |
2.1.3 菌株B3对潮霉素敏感性测定 | 第25页 |
2.1.4 质粒的提取 | 第25页 |
2.1.5 B3原生质体制备及转化 | 第25页 |
2.1.6 B3转化子的稳定性分析及PCR检测 | 第25-26页 |
2.1.7 B3转化子与野生型B3的产激素功能比较 | 第26-27页 |
2.1.8 B3转化子与野生型B3的产漆酶功能比较 | 第27页 |
2.1.9 水稻与B3共生体系的建立 | 第27-28页 |
2.1.10 取样分析和荧光显微镜观察水稻体内的GFP-B3 | 第28页 |
2.1.11 水稻体内GFP-B3和野生型B3的定量比较 | 第28-29页 |
2.1.12 统计分析 | 第29页 |
2.2 结果与分析 | 第29-34页 |
2.2.1 B3对潮霉素敏感性 | 第29页 |
2.2.2 原生质体产量、转化效率和GFP表达状况 | 第29-30页 |
2.2.3 B3转化子的PCR验证及其对潮霉素B的抗性水平分析 | 第30-31页 |
2.2.4 转化子与野生型B3的生长及功能比较 | 第31-33页 |
2.2.5 荧光显微镜观察GFP-B3在水稻组织内的定殖状况 | 第33页 |
2.2.6 野生型B3与GFP-B3在水稻体内的定殖量比较 | 第33-34页 |
2.2.7 野生型B3与GFP-B3的促生效应比较 | 第34页 |
2.3 讨论 | 第34-37页 |
2.3.1 GFP转化及GFP-B3的稳定性 | 第34-35页 |
2.3.2 GFP-B3在植物体内的检测 | 第35页 |
2.3.3 B3在水稻体内的定殖水平及其带来的促生效应 | 第35-36页 |
2.3.4 GFP标记B3对后续研究的重要影响 | 第36-37页 |
第3章 内生真菌B3对水稻氮素积累和代谢的影响 | 第37-53页 |
3.1 材料与方法 | 第38-41页 |
3.1.1 实验菌株和水稻品种的准备 | 第38页 |
3.1.2 实验用水稻土壤的准备 | 第38页 |
3.1.3 水稻与B3共生体系的建立 | 第38-39页 |
3.1.4 盆栽试验设计及水稻生长条件 | 第39页 |
3.1.5 样品收集和准备 | 第39页 |
3.1.6 硝酸还原酶活性测定 | 第39页 |
3.1.7 谷氨酰胺合成酶活性测定 | 第39-40页 |
3.1.8 可溶性蛋白含量测定 | 第40页 |
3.1.9 游离氨基酸含量测定 | 第40页 |
3.1.10 水稻体内游离NH_4~+、NO_3~-及总氮含量测定 | 第40-41页 |
3.1.11 统计分析 | 第41页 |
3.2 结果与分析 | 第41-49页 |
3.2.1 B3对水稻生物量和产量的影响 | 第41-43页 |
3.2.2 B3对水稻不同组织中含氮量影响 | 第43页 |
3.2.3 B3对水稻体内游离NH_4~+和NO_3~-含量的影响 | 第43-45页 |
3.2.4 B3对水稻体内游离氨基酸和可溶性蛋白含量的影响 | 第45-47页 |
3.2.5 B3对水稻硝酸还原酶(NR)和谷氨酰胺合成酶(GS)活性的影响 | 第47-49页 |
3.3 讨论 | 第49-53页 |
3.3.1 内生真菌B3在低氮条件下对水稻氮素利用的增益效应 | 第49-50页 |
3.3.2 内生真菌B3对水稻氮素积累和代谢水平的影响 | 第50-51页 |
3.3.3 内生真菌B3在可持续农业生产上的潜在应用价值 | 第51-53页 |
第4章 内生真菌B3与水稻共生对水稻根际氮转化过程及其相关微生物的影响 | 第53-71页 |
4.1 材料与方法 | 第54-60页 |
4.1.1 实验菌株 | 第54页 |
4.1.2 实验用水稻土壤 | 第54页 |
4.1.3 水稻与B3共生体系的建立 | 第54页 |
4.1.4 盆栽试验设计及水稻生长条件 | 第54页 |
4.1.5 样品收集和准备 | 第54-55页 |
4.1.6 化学分析 | 第55页 |
4.1.7 土壤DNA提取、PCR反应引物和体系 | 第55-57页 |
4.1.8 qRT-PCR对微生物丰度测定(基因拷贝数) | 第57页 |
4.1.9 PCR-DGGE对微生物群落结构测定 | 第57-58页 |
4.1.10 水稻根系分泌物的收集及组分测定 | 第58-59页 |
4.1.11 统计分析 | 第59-60页 |
4.2 结果与讨论 | 第60-68页 |
4.2.1 土壤化学分析和硝化速率分析 | 第60-61页 |
4.2.2 AOA、AOB和固氮菌的丰度 | 第61-63页 |
4.2.3 AOA、AOB和固氮菌的群落结构 | 第63-66页 |
4.2.4 根系分泌物的组分分析 | 第66-68页 |
4.3 讨论 | 第68-71页 |
4.3.1 内生真菌B3改变了水稻根际土壤中N转化相关微生物群落 | 第68-69页 |
4.3.2 内生真菌B3优化水稻根际土壤中N素营养 | 第69页 |
4.3.3 内生真菌B3影响水稻根际土壤中氮转化相关微生物的潜在机理 | 第69-71页 |
第5章 内生真菌B3对苗期水稻氮素吸收和代谢的影响 | 第71-87页 |
5.1 材料与方法 | 第71-74页 |
5.1.1 实验菌株和水稻品种的准备 | 第71-72页 |
5.1.2 水稻与B3共生体系的建立 | 第72页 |
5.1.3 实验设计 | 第72页 |
5.1.4 样品收集和准备 | 第72页 |
5.1.5 GFP标记的B3在水稻中的定殖能力分析 | 第72页 |
5.1.6 B3在水稻体内的定殖量 | 第72页 |
5.1.7 水稻体内叶绿素含量、游离NH_4~+、NO_3~-及总氮含量测定 | 第72-73页 |
5.1.8 可溶性蛋白含量测定 | 第73页 |
5.1.9 游离氨基酸含量测定 | 第73页 |
5.1.10 硝酸还原酶活性测定 | 第73页 |
5.1.11 相对定量PCR测定水稻氮吸收和代谢相关基因表达量 | 第73-74页 |
5.1.12 统计分析 | 第74页 |
5.2 结果与分析 | 第74-83页 |
5.2.1 荧光显微镜观察GFP标记的B3菌株在水稻体内的定殖 | 第74-75页 |
5.2.2 B3在水稻植株内的定殖量 | 第75-76页 |
5.2.3 B3对水稻植株的生物量和氮代谢状态的影响 | 第76-77页 |
5.2.4 内生真菌B3对水稻体内游离氨基酸含量的影响 | 第77-78页 |
5.2.5 内生真菌B3对水稻氮代谢关键酶活力的影响 | 第78页 |
5.2.6 内生真菌B3对水稻氮吸收相关基因转录水平的影响 | 第78-82页 |
5.2.7 内生真菌B3对水稻氮代谢关键酶基因转录水平的影响 | 第82-83页 |
5.3 讨论 | 第83-87页 |
5.3.1 低氮条件下内生真菌B3的增益效应 | 第83-84页 |
5.3.2 水稻氮素积累和代谢的水平 | 第84-85页 |
5.3.3 水稻对氮素的吸收 | 第85-87页 |
全文总结与展望 | 第87-89页 |
附录A | 第89-90页 |
附录B | 第90-91页 |
附录C | 第91-92页 |
附录D | 第92-93页 |
附录E | 第93-94页 |
附录F | 第94-95页 |
附录G | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-117页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第117-118页 |
致谢 | 第118页 |