| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 主要符号对照表 | 第11-12页 |
| 文献综述 | 第12-21页 |
| 1 引言 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 病毒和质粒 | 第22页 |
| 2.1.2 引物 | 第22页 |
| 2.1.3 血清和抗体 | 第22页 |
| 2.1.4 主要试剂与酶 | 第22-23页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第23页 |
| 2.1.6 主要试剂的配制 | 第23-25页 |
| 2.1.7 临床样品 | 第25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-38页 |
| 2.2.1 传染性鼻气管炎病毒gB、gD基因的扩增及序列分析 | 第25-27页 |
| 2.2.2 牛传染性鼻气管炎病毒g B、gD基因的原核表达 | 第27-34页 |
| 2.2.3 牛传染性鼻气管炎病毒gB、gD及gB+gD蛋白间接ELISA检测方法的建立与比较 | 第34-38页 |
| 2.2.3.1 棋盘滴定法优化抗原和血清工作浓度 | 第34页 |
| 2.2.3.2 gB+gD-ELISA血清工作浓度的优化 | 第34-35页 |
| 2.2.3.3 封闭液的优化 | 第35页 |
| 2.2.3.4 酶标二抗浓度的优化 | 第35页 |
| 2.2.3.5 血清反应时间的优化 | 第35-36页 |
| 2.2.3.6 酶标二抗反应时间的优化 | 第36页 |
| 2.2.3.7 底物反应时间的优化 | 第36页 |
| 2.2.3.8 间接ELISA方法阴阳性临界值的确定 | 第36-37页 |
| 2.2.3.9 特异性试验 | 第37页 |
| 2.2.3.10 重复性试验 | 第37页 |
| 2.2.3.11 临床样品的初步检测及对比性试验 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-57页 |
| 3.1 牛传染性鼻气管炎病毒gB、gD基因的扩增及序列分析 | 第38-41页 |
| 3.1.1 gB、gD基因PCR扩增结果 | 第38-39页 |
| 3.1.2 DNA序列的比较 | 第39-41页 |
| 3.2 牛传染性鼻气管炎病毒gB、gD基因的原核表达 | 第41-49页 |
| 3.2.1 重组原核表达质粒的双酶切鉴定结果 | 第41-43页 |
| 3.2.2 重组gB、gD蛋白的SDS-PAGE检测 | 第43页 |
| 3.2.3 重组gB、gD蛋白表达条件的优化 | 第43-46页 |
| 3.2.4 重组gB、gD蛋白的纯化 | 第46-47页 |
| 3.2.5 gB、gD蛋白的Western Blot检测 | 第47-49页 |
| 3.3 牛传染性鼻气管炎病毒gB、gD及gB+gD蛋白间接ELISA检测方法的建立 | 第49-57页 |
| 3.3.0 棋盘滴定法选择抗原和血清的工作浓度 | 第49-50页 |
| 3.3.1 gB+gD-ELISA血清工作浓度的优化 | 第50页 |
| 3.3.2 封闭液的优化 | 第50页 |
| 3.3.3 酶标二抗浓度的优化 | 第50-51页 |
| 3.3.4 血清反应时间的优化 | 第51页 |
| 3.3.5 酶标二抗反应时间的优化 | 第51-52页 |
| 3.3.6 底物反应时间的优化 | 第52页 |
| 3.3.7 间接ELISA方法阴阳性临界值的确定 | 第52-54页 |
| 3.3.8 特异性试验结果 | 第54页 |
| 3.3.9 重复性试验结果 | 第54-55页 |
| 3.3.10 检测IBRV的ELISA方法的评估 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
| 硕士期间发表文章 | 第65页 |
