| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 文献综述 | 第14-23页 |
| 1.1 AdipoQ及AdipoR1/2的研究进展 | 第14-22页 |
| 1.1.1 AdipoQ的结构与分布 | 第14-15页 |
| 1.1.2 AdipoR1/2的结构与分布 | 第15页 |
| 1.1.3 AdipoQ及AdipoR1/2的生物学功能 | 第15-19页 |
| 1.1.3.1 AdipoQ在骨骼肌中的功能 | 第15-16页 |
| 1.1.3.2 AdipoQ在肝脏中的功能 | 第16-17页 |
| 1.1.3.3 AdipoQ在心血管中的功能 | 第17-18页 |
| 1.1.3.4 AdipoQ在肺中的功能 | 第18-19页 |
| 1.1.3.5 AdipoQ与癌症的关系 | 第19页 |
| 1.1.4 AdipoQ及AdipoR1/2的调控 | 第19-22页 |
| 1.1.4.1 AdipoQ的表达分泌调节 | 第19-21页 |
| 1.1.4.2 AdipoR1/2的表达分泌调节 | 第21-22页 |
| 1.2 SMSCs简介 | 第22-23页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-34页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 试验组织样品 | 第23页 |
| 2.1.2 山羊SMSCs | 第23-24页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第24页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.3 试验方法 | 第25-34页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.3.2 总RNA的质量检测 | 第26页 |
| 2.3.3 cDNA的合成 | 第26页 |
| 2.3.4 AdipoQ、AdipoR1和AdipoR2基因的克隆 | 第26-29页 |
| 2.3.4.1 引物设计 | 第26-27页 |
| 2.3.4.2 RT-PCR扩增 | 第27页 |
| 2.3.4.3 PCR产物胶回收 | 第27-28页 |
| 2.3.4.4 目的基因的克隆 | 第28页 |
| 2.3.4.5 目的基因的鉴定及测序 | 第28-29页 |
| 2.3.4.6 生物信息学分析 | 第29页 |
| 2.3.5 AdipoQ、AdipoR1和AdipoR2基因的表达分析 | 第29-30页 |
| 2.3.5.1 目的基因定量引物设计 | 第29页 |
| 2.3.5.2 半定量RT-PCR检测目的基因的组织表达模式 | 第29-30页 |
| 2.3.5.3 qPCR检测目的基因在不同发育阶段背最长肌中的表达 | 第30页 |
| 2.3.6 山羊SMSCs的成脂分化 | 第30-32页 |
| 2.3.6.1 山羊SMSCs的培养及高糖诱导分化 | 第30-31页 |
| 2.3.6.2 山羊SMSCs内脂肪滴的油红O染色 | 第31页 |
| 2.3.6.3 脂肪酸合成及成脂分化相关基因引物设计 | 第31-32页 |
| 2.3.6.4 qPCR检测脂肪酸合成及成脂分化相关基因表达 | 第32页 |
| 2.3.6.5 脂肪酸合成及成脂分化基因的表达相关性分析 | 第32页 |
| 2.3.7 AdipoQ基因在山羊SMSCs中的过表达 | 第32-34页 |
| 2.3.7.1 载体构建 | 第32-33页 |
| 2.3.7.2 质粒提取 | 第33页 |
| 2.3.7.3 瞬时转染 | 第33-34页 |
| 2.3.7.4 qPCR检测相关基因的表达 | 第34页 |
| 2.4 统计分析 | 第34页 |
| 3 试验结果与分析 | 第34-45页 |
| 3.1 AdipoQ、AdipoR1和AdipoR2的克隆及序列分析 | 第34-36页 |
| 3.1.1 RNA质量的检测 | 第34-35页 |
| 3.1.2 目的基因的克隆结果 | 第35页 |
| 3.1.3 测序及生物信息学分析结果 | 第35页 |
| 3.1.4 AdipoQ、AdipoR1和AdipoR2蛋白结构 | 第35-36页 |
| 3.2 AdipoQ、AdipoR1和AdipoR2的组织表达 | 第36-37页 |
| 3.3 AdipoQ、AdipoR1和AdipoR2在背最长肌中的表达 | 第37-38页 |
| 3.4 山羊SMSCs的诱导分化 | 第38-42页 |
| 3.4.1 细胞中的脂肪滴沉积 | 第38-40页 |
| 3.4.2 脂肪酸合成及成脂分化相关基因的表达 | 第40-42页 |
| 3.4.3 分化过程中基因表达的相关性 | 第42页 |
| 3.5 AdipoQ基因的过表达 | 第42-45页 |
| 3.5.1 AdipoQ的载体构建 | 第42-43页 |
| 3.5.2 AdipoQ的亚细胞定位 | 第43页 |
| 3.5.3 AdipoQ对相关基因的调控 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-49页 |
| 4.1 基因的克隆及生物信息学分析 | 第45页 |
| 4.2 基因的组织表达规律 | 第45-46页 |
| 4.3 基因在背最长肌中的表达 | 第46-47页 |
| 4.4 山羊SMSCs的成脂分化 | 第47-49页 |
| 4.5 AdipoQ在SMSCs中的过表达 | 第49页 |
| 5 结论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第60页 |
