| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-32页 |
| 1 β-胡萝卜素 | 第12-13页 |
| 1.1 β-胡萝卜素的理化特性 | 第12页 |
| 1.2 β-胡萝卜素的功能 | 第12-13页 |
| 2 β-胡萝卜素的生产方法 | 第13-15页 |
| 2.1 化学合成法 | 第13-14页 |
| 2.2 植物提取法 | 第14页 |
| 2.3 微生物发酵法 | 第14-15页 |
| 3 微生物诱变育种 | 第15-18页 |
| 3.1 物理诱变 | 第15页 |
| 3.2 化学诱变 | 第15-16页 |
| 3.3 低能离子注入诱变 | 第16-17页 |
| 3.4 复合诱变 | 第17-18页 |
| 4 原生质体的制备与再生及其在酵母中的应用 | 第18-20页 |
| 4.1 菌龄 | 第18页 |
| 4.2 预处理 | 第18-19页 |
| 4.3 渗透压稳定剂 | 第19页 |
| 4.4 酶种类和酶浓度 | 第19页 |
| 4.5 酶解温度、时间和酶解液pH | 第19-20页 |
| 5 红酵母产β-胡萝卜素的研究进展 | 第20-22页 |
| 5.1 β-胡萝卜素的生物合成途径 | 第21页 |
| 5.2 优化发酵条件提高β-胡萝卜素产量 | 第21-22页 |
| 5.3 红酵母产β-胡萝卜素的提取 | 第22页 |
| 6 β-胡萝卜素转化维生素A | 第22-25页 |
| 6.1 β-胡萝卜素转化为维生素A的机理 | 第23页 |
| 6.2 β-胡萝卜素-15,15’-单加氧酶 | 第23-24页 |
| 6.3 β-胡萝卜素-15,15’-单加氧酶的作用方式 | 第24页 |
| 6.4 β-胡萝卜素-15,15’-单加氧酶活性的影响因素 | 第24-25页 |
| 6.4.1 生育酚 | 第24页 |
| 6.4.2 吐温 | 第24页 |
| 6.4.3 脂肪和脂肪酸 | 第24-25页 |
| 6.4.4 胆酸盐 | 第25页 |
| 6.4.5 维生素A | 第25页 |
| 7 维生素A及其酯化衍生物 | 第25-30页 |
| 7.1 维生素A乙酸酯 | 第26-28页 |
| 7.2 维生素A棕榈酸酯 | 第28-30页 |
| 7.2.1 维生素A棕榈酸酯的化学合成法 | 第29页 |
| 7.2.2 维生素A棕榈酸酯的酶法合成法 | 第29-30页 |
| 8 本课题的研究意义及内容 | 第30-32页 |
| 第二章 红酵母的诱变 | 第32-48页 |
| 1 材料与方法 | 第32-36页 |
| 1.1 材料 | 第32-34页 |
| 1.1.1 菌株 | 第32页 |
| 1.1.2 培养基与试剂配制 | 第32-33页 |
| 1.1.3 仪器与试剂 | 第33-34页 |
| 1.2 方法 | 第34-36页 |
| 1.2.1 原生质体制备及再生 | 第34页 |
| 1.2.2 离子注入 | 第34-35页 |
| 1.2.3 ~(60)Coγ射线辐照 | 第35页 |
| 1.2.4 突变株的筛选 | 第35页 |
| 1.2.5 遗传稳定性试验 | 第35页 |
| 1.2.6 诱变处理流程 | 第35页 |
| 1.2.7 测定方法 | 第35-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-46页 |
| 2.1 红酵母RM原生质体制备及再生结果 | 第36-43页 |
| 2.1.1 菌龄对原生质体形成和再生的影响 | 第36-37页 |
| 2.1.2 预处理剂对原生质体形成和再生的影响 | 第37-38页 |
| 2.1.3 预处理时间对原生质体形成和再生的影响 | 第38-39页 |
| 2.1.4 酶种类和酶浓度对原生质体形成和再生的影响 | 第39-40页 |
| 2.1.5 酶解温度和酶解时间对原生质体形成和再生的影响 | 第40-41页 |
| 2.1.6 渗透压稳定剂对原生质体形成和再生的影响 | 第41-42页 |
| 2.1.7 正交试验 | 第42-43页 |
| 2.2 β-胡萝卜素标准曲线的绘制 | 第43-44页 |
| 2.3 离子注入诱变 | 第44-45页 |
| 2.3.1 原生质体的离子注入效应 | 第44页 |
| 2.3.2 突变株的筛选 | 第44-45页 |
| 2.4 ~(60)Coγ射线诱变突变株RMA25的诱变效应 | 第45页 |
| 2.5 高产菌株的筛选 | 第45-46页 |
| 2.6 遗传稳定性试验 | 第46页 |
| 3 结论与讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 产β-胡萝卜素条件的优化 | 第48-74页 |
| 1 材料与方法 | 第48-51页 |
| 1.1 材料 | 第48-49页 |
| 1.1.1 菌株 | 第48页 |
| 1.1.2 培养基 | 第48-49页 |
| 1.1.3 仪器与试剂 | 第49页 |
| 1.2 方法 | 第49-51页 |
| 1.2.1 玉米秸秆水解液的制备 | 第49页 |
| 1.2.2 甘蔗糖蜜的预处理 | 第49-50页 |
| 1.2.3 浓缩菠萝废料提取液的制备 | 第50页 |
| 1.2.4 番茄汁的制备方法 | 第50页 |
| 1.2.5 培养方式 | 第50页 |
| 1.2.6 种子培养基的选择 | 第50页 |
| 1.2.7 种子培养条件的优化 | 第50页 |
| 1.2.8 培养基成分优化 | 第50页 |
| 1.2.9 培养条件优化 | 第50页 |
| 1.2.10 小型发酵罐分批发酵培养方法 | 第50-51页 |
| 1.2.11 测定方法 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-72页 |
| 2.6 前体或化学激活剂对红酵母合成β-胡萝卜素的影响 | 第59-70页 |
| 2.6.1 不同添加物对红酵母合成β-胡萝卜素的影响 | 第59-60页 |
| 2.6.2 乙醇浓度对红酵母合成β-胡萝卜素的影响 | 第60-61页 |
| 2.6.3 培养基优化正交试验 | 第61-70页 |
| 2.13 10L发酵罐的发酵控制参数研究 | 第70-72页 |
| 2.13.1 溶氧对发酵的影响 | 第70-71页 |
| 2.13.2 乙醇添加时间对发酵的影响 | 第71页 |
| 2.13.3 发酵过程分析 | 第71-72页 |
| 3 结论与讨论 | 第72-74页 |
| 第四章 红酵母产β-胡萝卜素体外转化为维生素A的初步研究 | 第74-84页 |
| 1 材料与方法 | 第74-77页 |
| 1.1 材料 | 第74-75页 |
| 1.1.1 菌株 | 第74页 |
| 1.1.2 培养基 | 第74页 |
| 1.1.3 仪器与试剂 | 第74-75页 |
| 1.2 方法 | 第75-77页 |
| 1.2.1 β-胡萝卜素发酵提取液的制备 | 第75页 |
| 1.2.2 酶的提取 | 第75-76页 |
| 1.2.3 转化反应 | 第76页 |
| 1.2.4 转化体系的建立 | 第76页 |
| 1.2.5 酶反应时间 | 第76页 |
| 1.2.6 测定方法 | 第76-77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-83页 |
| 2.1 β-胡萝卜素标准曲线的绘制 | 第77页 |
| 2.2 红酵母产β-胡萝卜素的分析 | 第77-78页 |
| 2.3 维生素A标准曲线的绘制 | 第78-79页 |
| 2.4 红酵母产β-胡萝卜素体外转化VA分析 | 第79页 |
| 2.5 油酸对红酵母产β-胡萝卜素转化率的影响 | 第79-80页 |
| 2.6 生育酚对红酵母产β-胡萝卜素转化率的影响 | 第80页 |
| 2.7 Tween 40对红酵母产β-胡萝卜素转化率的影响 | 第80-81页 |
| 2.8 正交试验及其验证 | 第81-82页 |
| 2.9 酶反应时间对红酵母产β-胡萝卜素转化率的影响 | 第82-83页 |
| 3 结论与讨论 | 第83-84页 |
| 第五章 脂肪酶催化合成维生素A棕榈酸酯的研究 | 第84-94页 |
| 1 材料与方法 | 第84-86页 |
| 1.1 材料 | 第84-85页 |
| 1.1.1 仪器 | 第84-85页 |
| 1.2 方法 | 第85-86页 |
| 2 结果与分析 | 第86-93页 |
| 2.1 脂肪酶种类的确定 | 第86页 |
| 2.2 有机溶剂的确定 | 第86-87页 |
| 2.3 酶量的确定 | 第87-88页 |
| 2.4 底物浓度比对酶催化反应的影响 | 第88页 |
| 2.5 温度对酶催化反应的影响 | 第88-89页 |
| 2.6 摇床转速对酶催化反应的影响 | 第89页 |
| 2.7 体系水含量对酶催化反应的影响 | 第89-90页 |
| 2.8 反应时间对酶催化反应的影响 | 第90页 |
| 2.9 反应条件的优化 | 第90-92页 |
| 2.10 红酵母产β-胡萝卜素转化为维生素A棕榈酸酯 | 第92-93页 |
| 3 结论与讨论 | 第93-94页 |
| 第六章 总结 | 第94-97页 |
| 1 主要研究结果 | 第94-95页 |
| 2 创新点 | 第95页 |
| 3 展望 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 作者简历 | 第114-115页 |
| 攻读博士学位期间发表论文情况 | 第115页 |
