中文摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
符号说明 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
1 聚合酶链式反应PCR | 第10-14页 |
1.1 PCR的原理与应用 | 第10-12页 |
1.2 影响PCR扩增效率的因素 | 第12-13页 |
1.3 DNA聚合酶 | 第13-14页 |
2 PCR引物与探针设计 | 第14-16页 |
3 巴贝斯虫与泰勒虫核酸的分子检测 | 第16-18页 |
3.1 分类 | 第16页 |
3.2 分子诊断方法 | 第16-18页 |
第二章 引物和探针核苷酸错配对PCR灵敏度与特异性影响的研究 | 第18-46页 |
1 材料 | 第19-20页 |
1.1 肺炎衣原体 | 第19页 |
1.2 试剂 | 第19页 |
1.3 仪器 | 第19-20页 |
2 方法 | 第20-28页 |
2.1 肺炎衣原体高效扩增系统的确定 | 第20-21页 |
2.2 七种商业化DNA聚合酶扩增效率的比较 | 第21页 |
2.3 PicoGreen法确定衣原体模板的拷贝数 | 第21-23页 |
2.4 引物核苷酸错配的设计 | 第23-26页 |
2.5 兼并引物的设计 | 第26页 |
2.6 探针错配的设计 | 第26-28页 |
3 结果 | 第28-43页 |
3.1 高效扩增系统的建立 | 第28页 |
3.2 不同商业化DNA聚合酶扩增效率的比较 | 第28-30页 |
3.3 引物3'端单核苷酸错配对PCR扩增效率的影响 | 第30-34页 |
3.4 在不同位点的多个核苷酸错配对PCR扩增效率的影响 | 第34-37页 |
3.5 核苷酸错配在上下游引物不同位点对PCR扩增效率的影响 | 第37-41页 |
3.6 核苷酸错配对探针检测的影响 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
第三章 区别诊断巴贝斯虫和泰勒虫的PCR方法的建立 | 第46-55页 |
1 材料 | 第47-48页 |
1.1 质粒及临床样品 | 第47页 |
1.2 主要试剂 | 第47页 |
1.3 主要仪器 | 第47-48页 |
2 方法 | 第48-51页 |
2.1 质粒构建 | 第48-49页 |
2.2 引物设计 | 第49-50页 |
2.3 PCR以及琼脂糖凝胶电泳分析 | 第50页 |
2.4 参考引物与设计引物扩增临床样品 | 第50-51页 |
3 结果 | 第51-54页 |
3.1 质粒验证聚合酶与错配类型的结果 | 第51-52页 |
3.2 引物扩增临床样品的比较结果 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-65页 |
全文总结 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第67-68页 |