| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| TABLE OF CONTENTS | 第11-14页 |
| 图目录 | 第14-17页 |
| 表目录 | 第17-19页 |
| 主要符号表 | 第19-20页 |
| 1 间位开环水解酶的研究进展 | 第20-48页 |
| 1.1 芳香化合物的微生物代谢概述 | 第20-22页 |
| 1.2 间位开环产物水解酶的功能、来源与分类 | 第22-25页 |
| 1.2.1 间位开环产物水解酶的功能 | 第22-23页 |
| 1.2.2 间位开环产物水解酶的来源 | 第23-24页 |
| 1.2.3 间位开环产物水解酶的分类 | 第24-25页 |
| 1.3 间位开环产物水解酶的特性和催化机制 | 第25-38页 |
| 1.3.1 间位开环产物水解酶的生理生化特性 | 第25-27页 |
| 1.3.2 间位开环产物水解酶的一级结构特征 | 第27-28页 |
| 1.3.3 间位开环产物水解酶的三级结构特征 | 第28-36页 |
| 1.3.4 间位开环产物水解酶催化机制的研究进展 | 第36-38页 |
| 1.4 酶的半理性设计研究进展 | 第38-45页 |
| 1.5 本论文的研究目的、意义与研究框架 | 第45-48页 |
| 2 BphD的克隆表达、基本特性和生物信息学分析 | 第48-66页 |
| 2.1 材料与方法 | 第48-53页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第49-53页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第53-65页 |
| 2.2.1 BphD编码基因克隆、表达及纯化 | 第53-55页 |
| 2.2.2 BphD的催化动力学分析 | 第55-56页 |
| 2.2.3 BphD的催化性能对pH、温度、抑制剂的依赖性 | 第56-59页 |
| 2.2.4 BphD及MfphA的生物信息学分析 | 第59-65页 |
| 2.3 本章小结 | 第65-66页 |
| 3 间位开环产物水解酶的区域互换研究 | 第66-85页 |
| 3.1 材料和方法 | 第66-72页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第66-67页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第67-72页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第72-84页 |
| 3.2.1 交叉点选择的生物信息学分析 | 第72-76页 |
| 3.2.2 杂合酶的编码基因克隆、表达和纯化 | 第76-78页 |
| 3.2.3 杂合酶的催化动力学分析 | 第78-79页 |
| 3.2.4 杂合酶底物特异性的分子机制 | 第79-84页 |
| 3.3 本章小结 | 第84-85页 |
| 4 间位开环产物水解酶的非活性位点残基改造 | 第85-106页 |
| 4.1 材料与方法 | 第85-90页 |
| 4.1.1 材料与方法 | 第85-86页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第86-90页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第90-105页 |
| 4.2.1 突变位点的选择 | 第90-93页 |
| 4.2.2 Met148位点突变文库的构建和突变体表达 | 第93-94页 |
| 4.2.3 突变体的稳态/非稳态动力学分析 | 第94-97页 |
| 4.2.4 突变体的分子动力学模拟 | 第97-105页 |
| 4.3 本章小结 | 第105-106页 |
| 5 间位开环产物水解酶的催化混杂性 | 第106-122页 |
| 5.1 材料与方法 | 第106-108页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第106-107页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第107-108页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第108-121页 |
| 5.2.1 BphD和MfphA的酯酶活性 | 第108-111页 |
| 5.2.2 BphD用于SiO_2和NaTi_2(PO_4)_3的合成 | 第111-121页 |
| 5.3 本章小结 | 第121-122页 |
| 6 间位开环产物水解酶的固定化研究 | 第122-145页 |
| 6.1 材料与方法 | 第122-126页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第122-123页 |
| 6.1.2 实验方法 | 第123-126页 |
| 6.2 结果与讨论 | 第126-144页 |
| 6.2.1 分子模拟用于MCP水解酶的固定化最优条件预测 | 第126-128页 |
| 6.2.2 SBA-15的合成与表征 | 第128-129页 |
| 6.2.3 MfphA和BphD在SBA-15上的吸附动力学 | 第129-130页 |
| 6.2.4 基于SBA-15的固定化酶特性 | 第130-132页 |
| 6.2.5 间位开环产物水解酶/碳纳米管复合物的制备与催化特性 | 第132-135页 |
| 6.2.6 基于碳纳米管的固定化酶特性 | 第135-139页 |
| 6.2.7 碳纳米管-酶复合物的形成及酶结构的变化 | 第139-142页 |
| 6.2.8 SWCNT对MfphA的抑制机制探索 | 第142-144页 |
| 6.3 本章小结 | 第144-145页 |
| 7 结论与展望 | 第145-148页 |
| 7.1 结论 | 第145-146页 |
| 7.2 创新点摘要 | 第146页 |
| 7.3 展望 | 第146-148页 |
| 参考文献 | 第148-157页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第157-159页 |
| 致谢 | 第159-160页 |
| 作者简介 | 第160页 |
