| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第1章 环形泰勒虫病的研究进展 | 第10-23页 |
| 1.1 环形泰勒虫病的概况 | 第10-16页 |
| 1.1.1 病原形态 | 第10-11页 |
| 1.1.2 生活史 | 第11-12页 |
| 1.1.3 免疫及生化指标影响 | 第12页 |
| 1.1.4 临床症状及病理变化 | 第12页 |
| 1.1.5 流行病学 | 第12-14页 |
| 1.1.6 防治 | 第14-16页 |
| 1.2 环形泰勒虫病诊断方法研究进展 | 第16-21页 |
| 1.2.1 病原学诊断 | 第16-17页 |
| 1.2.2 血清学诊断 | 第17-19页 |
| 1.2.3 分子生物学诊断 | 第19-21页 |
| 1.3 本课题研究的目的意义 | 第21-23页 |
| 第2章 环形泰勒虫新疆株 Tams1 基因片段的克隆表达及筛选 | 第23-43页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 样品来源 | 第23页 |
| 2.1.2 菌种及质粒 | 第23页 |
| 2.1.3 试剂及工具酶 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-34页 |
| 2.2.1 牛环形泰勒虫新疆流行株的分离获得 | 第24页 |
| 2.2.2 环形泰勒虫 Tams1 基因序列分析及引物设计 | 第24-25页 |
| 2.2.3 全血基因组 DNA 的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.4 环形泰勒虫 Tams1 基因的 PCR 扩增 | 第26页 |
| 2.2.5 PCR 产物的回收与纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.6 重组表达载体的构建 | 第27-29页 |
| 2.2.7 重组表达质粒的转化 | 第29-30页 |
| 2.2.8 重组表达质粒的筛选与鉴定 | 第30页 |
| 2.2.9 目的基因序列测定 | 第30-31页 |
| 2.2.10 重组表达质粒的诱导表达 | 第31页 |
| 2.2.11 高效可溶性表达重组质粒的筛选 | 第31-32页 |
| 2.2.12 诱导条件的优化 | 第32页 |
| 2.2.13 目的蛋白的纯化 | 第32-33页 |
| 2.2.14 Western blotting 分析 | 第33-34页 |
| 2.3 结果与分析 | 第34-40页 |
| 2.3.1 牛环形泰勒虫 Tams1 基因的扩增 | 第34页 |
| 2.3.2 重组表达质粒的鉴定结果 | 第34-35页 |
| 2.3.3 目的基因 Tams1 的测序分析结果 | 第35-36页 |
| 2.3.4 高效可溶性表达重组质粒的筛选 | 第36页 |
| 2.3.5 诱导条件的优化结果 | 第36-38页 |
| 2.3.6 目的蛋白的纯化及鉴定 | 第38-39页 |
| 2.3.7 目的蛋白的纯化及鉴定 | 第39-40页 |
| 2.4 讨论与分析 | 第40-42页 |
| 2.4.1 Tams1 基因亚克隆抗原位点的选择及序列分析 | 第40-41页 |
| 2.4.2 表达载体的选择 | 第41页 |
| 2.4.3 Western blotting 分析 | 第41-42页 |
| 2.5 小结 | 第42-43页 |
| 第3章 牛环形泰勒虫病间接 ELISA 检测方法的建立及初步应用 | 第43-59页 |
| 3.1 试验材料 | 第43-44页 |
| 3.1.1 抗原及血清 | 第43页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第43-44页 |
| 3.1.4 临床样品来源 | 第44页 |
| 3.2 试验方法 | 第44-48页 |
| 3.2.1 His-BE 蛋白的定量 | 第44页 |
| 3.2.2 间接 ELISA 方法的建立 | 第44-48页 |
| 3.3 结果与分析 | 第48-56页 |
| 3.3.1 His-BE 蛋白浓度的测定 | 第48页 |
| 3.3.2 最佳包被缓冲液的选择结果 | 第48-49页 |
| 3.3.3 最佳抗原包被浓度和血清稀释度的确定结果 | 第49-50页 |
| 3.3.4 包被条件的确定结果 | 第50页 |
| 3.3.5 最佳封闭液及封闭时间的确定 | 第50-51页 |
| 3.3.6 血清最佳作用时间的确定 | 第51-52页 |
| 3.3.7 酶标二抗最佳工作浓度和时间的确定 | 第52-53页 |
| 3.3.8 底物作用时间的确定 | 第53页 |
| 3.3.9 阴阳性临界值的确定 | 第53-54页 |
| 3.3.10 间接 ELISA 方法评测的结果 | 第54-56页 |
| 3.3.11 样品检测结果 | 第56页 |
| 3.4 讨论与分析 | 第56-58页 |
| 3.4.1 间接 ELISA 条件的优化 | 第56-57页 |
| 3.4.2 间接 ELISA 方法的特点 | 第57-58页 |
| 3.5 小结 | 第58-59页 |
| 第4章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 附录 | 第69-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简历 | 第73页 |
