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香烟烟雾对雄性小鼠睾丸与附睾影响的蛋白质组学研究

摘要第5-10页
ABSTRACT第10-14页
符号与缩写第18-23页
第一章 绪论(研究背景)第23-36页
    1.1 精子的发生与成熟第23-30页
        1.1.1 睾丸中精子的发生第23-25页
        1.1.2 精子成熟的附睾环境第25-29页
        1.1.3 精子的成熟过程第29-30页
    1.2 吸烟对生育功能的影响第30-34页
        1.2.1 吸烟是精液质量下降和出生缺陷发生的原因之一第31-33页
        1.2.2 吸烟导致男性不孕的细胞水平和分子水平研究现状第33-34页
    1.3 蛋白质组学在精子分化发育研究中的意义第34-36页
第二章 香烟烟雾处理对小鼠睾丸蛋白谱的影响第36-78页
    2.1 实验材料第36-37页
        2.1.1 实验动物第36页
        2.1.2 实验试剂第36-37页
    2.2 实验方法第37-51页
        2.2.1 实验动物日常饲养第37页
        2.2.2 香烟烟雾处理第37-38页
        2.2.3 样本收集第38-39页
        2.2.4 双向电泳(2-DE)第39-41页
        2.2.5 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)第41-42页
        2.2.6 蛋白质组学比较分析第42页
        2.2.7 RNA与蛋白质的抽提第42-44页
        2.2.8 Western-blotting第44-46页
        2.2.9 实时定量PCR第46-48页
        2.2.10 免疫组织化学第48-51页
        2.2.11 统计学分析第51页
    2.3 实验结果第51-68页
        2.3.1 香烟烟雾处理可以造成小鼠睾丸蛋白表达谱的改变第51-60页
        2.3.2 质谱鉴定结果的验证第60-62页
        2.3.3 对鉴定得到的差异表达蛋白质的GO分析第62-64页
        2.3.4 对鉴定得到的差异表达蛋白的通路分析第64-65页
        2.3.5 小鼠睾丸中IκK与IκB表达情况的检测第65-66页
        2.3.6 小鼠睾丸中p65 表达分布的检测第66-68页
        2.3.7 小鼠睾丸中Pebp1 表达分布的检测第68页
    2.4 分析与讨论第68-78页
        2.4.1 香烟烟雾处理影响了小鼠睾丸组织NF-κB通路第69-72页
        2.4.2 NF-κB在睾丸组织中的作用第72-73页
        2.4.3 香烟烟雾处理后小鼠睾丸组织中NF-κB通路的扰动对精子发生的影响第73-74页
        2.4.4 香烟烟雾处理后小鼠睾丸组织中蛋白表达水平的改变对生育的影响第74-78页
第三章 香烟烟雾处理对小鼠附睾蛋白谱的影响第78-115页
    3.1 实验材料第78-79页
        3.1.1 实验动物第78页
        3.1.2 实验试剂第78-79页
    3.2 实验方法第79-94页
        3.2.1 实验动物日常饲养第79-80页
        3.2.2 香烟烟雾处理第80页
        3.2.3 样本收集第80-81页
        3.2.4 双向电泳(2-DE)第81-83页
        3.2.5 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)第83-84页
        3.2.6 蛋白质组学比较分析第84-85页
        3.2.7 RNA与蛋白质的抽提第85-87页
        3.2.8 Western-blotting第87-89页
        3.2.9 实时定量PCR第89-92页
        3.2.10 免疫组织化学第92-93页
        3.2.11 统计学分析第93-94页
    3.3 实验结果第94-108页
        3.3.1 香烟烟雾处理可以造成小鼠附睾蛋白表达谱的改变第94-101页
        3.3.2 质谱鉴定结果的验证第101-104页
        3.3.3 对鉴定得到的差异表达蛋白质的GO分析第104-105页
        3.3.4 对鉴定得到的差异表达蛋白质的通路分析第105-108页
        3.3.5 小鼠附睾中由氧化应激诱导产生的 8-OHdG的检测第108页
    3.4 分析与讨论第108-115页
        3.4.1 香烟烟雾处理能够在小鼠附睾组织中引起氧化应激第109-111页
        3.4.2 香烟烟雾处理导致的氧化应激干扰了小鼠附睾组织蛋白的正常合成第111-113页
        3.4.3 小鼠附睾组织蛋白质表达水平的改变影响精液质量第113-115页
第四章 全文总结与展望第115-118页
参考文献第118-134页
附录 1:实验仪器第134-135页
附录 2:实验试剂的配制方法第135-137页
致谢第137-138页
攻读学位期间参与发表的学术论文与译著第138-139页

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