摘要 | 第5-10页 |
ABSTRACT | 第10-14页 |
符号与缩写 | 第18-23页 |
第一章 绪论(研究背景) | 第23-36页 |
1.1 精子的发生与成熟 | 第23-30页 |
1.1.1 睾丸中精子的发生 | 第23-25页 |
1.1.2 精子成熟的附睾环境 | 第25-29页 |
1.1.3 精子的成熟过程 | 第29-30页 |
1.2 吸烟对生育功能的影响 | 第30-34页 |
1.2.1 吸烟是精液质量下降和出生缺陷发生的原因之一 | 第31-33页 |
1.2.2 吸烟导致男性不孕的细胞水平和分子水平研究现状 | 第33-34页 |
1.3 蛋白质组学在精子分化发育研究中的意义 | 第34-36页 |
第二章 香烟烟雾处理对小鼠睾丸蛋白谱的影响 | 第36-78页 |
2.1 实验材料 | 第36-37页 |
2.1.1 实验动物 | 第36页 |
2.1.2 实验试剂 | 第36-37页 |
2.2 实验方法 | 第37-51页 |
2.2.1 实验动物日常饲养 | 第37页 |
2.2.2 香烟烟雾处理 | 第37-38页 |
2.2.3 样本收集 | 第38-39页 |
2.2.4 双向电泳(2-DE) | 第39-41页 |
2.2.5 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS) | 第41-42页 |
2.2.6 蛋白质组学比较分析 | 第42页 |
2.2.7 RNA与蛋白质的抽提 | 第42-44页 |
2.2.8 Western-blotting | 第44-46页 |
2.2.9 实时定量PCR | 第46-48页 |
2.2.10 免疫组织化学 | 第48-51页 |
2.2.11 统计学分析 | 第51页 |
2.3 实验结果 | 第51-68页 |
2.3.1 香烟烟雾处理可以造成小鼠睾丸蛋白表达谱的改变 | 第51-60页 |
2.3.2 质谱鉴定结果的验证 | 第60-62页 |
2.3.3 对鉴定得到的差异表达蛋白质的GO分析 | 第62-64页 |
2.3.4 对鉴定得到的差异表达蛋白的通路分析 | 第64-65页 |
2.3.5 小鼠睾丸中IκK与IκB表达情况的检测 | 第65-66页 |
2.3.6 小鼠睾丸中p65 表达分布的检测 | 第66-68页 |
2.3.7 小鼠睾丸中Pebp1 表达分布的检测 | 第68页 |
2.4 分析与讨论 | 第68-78页 |
2.4.1 香烟烟雾处理影响了小鼠睾丸组织NF-κB通路 | 第69-72页 |
2.4.2 NF-κB在睾丸组织中的作用 | 第72-73页 |
2.4.3 香烟烟雾处理后小鼠睾丸组织中NF-κB通路的扰动对精子发生的影响 | 第73-74页 |
2.4.4 香烟烟雾处理后小鼠睾丸组织中蛋白表达水平的改变对生育的影响 | 第74-78页 |
第三章 香烟烟雾处理对小鼠附睾蛋白谱的影响 | 第78-115页 |
3.1 实验材料 | 第78-79页 |
3.1.1 实验动物 | 第78页 |
3.1.2 实验试剂 | 第78-79页 |
3.2 实验方法 | 第79-94页 |
3.2.1 实验动物日常饲养 | 第79-80页 |
3.2.2 香烟烟雾处理 | 第80页 |
3.2.3 样本收集 | 第80-81页 |
3.2.4 双向电泳(2-DE) | 第81-83页 |
3.2.5 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS) | 第83-84页 |
3.2.6 蛋白质组学比较分析 | 第84-85页 |
3.2.7 RNA与蛋白质的抽提 | 第85-87页 |
3.2.8 Western-blotting | 第87-89页 |
3.2.9 实时定量PCR | 第89-92页 |
3.2.10 免疫组织化学 | 第92-93页 |
3.2.11 统计学分析 | 第93-94页 |
3.3 实验结果 | 第94-108页 |
3.3.1 香烟烟雾处理可以造成小鼠附睾蛋白表达谱的改变 | 第94-101页 |
3.3.2 质谱鉴定结果的验证 | 第101-104页 |
3.3.3 对鉴定得到的差异表达蛋白质的GO分析 | 第104-105页 |
3.3.4 对鉴定得到的差异表达蛋白质的通路分析 | 第105-108页 |
3.3.5 小鼠附睾中由氧化应激诱导产生的 8-OHdG的检测 | 第108页 |
3.4 分析与讨论 | 第108-115页 |
3.4.1 香烟烟雾处理能够在小鼠附睾组织中引起氧化应激 | 第109-111页 |
3.4.2 香烟烟雾处理导致的氧化应激干扰了小鼠附睾组织蛋白的正常合成 | 第111-113页 |
3.4.3 小鼠附睾组织蛋白质表达水平的改变影响精液质量 | 第113-115页 |
第四章 全文总结与展望 | 第115-118页 |
参考文献 | 第118-134页 |
附录 1:实验仪器 | 第134-135页 |
附录 2:实验试剂的配制方法 | 第135-137页 |
致谢 | 第137-138页 |
攻读学位期间参与发表的学术论文与译著 | 第138-139页 |