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银杏再生体系建立和LEAFY基因表达、转化的研究

中文摘要第9-11页
缩略语第11-13页
第一章 银杏组织培养及其应用研究进展第13-22页
    1 银杏组织培养第13-17页
        1.1 茎段分化和腋芽萌发再生植株第13-14页
        1.2 配子体培养第14-15页
        1.3 胚培养第15-16页
        1.4 愈伤组织诱导第16页
        1.5 褐变的研究第16-17页
    2 银杏组织培养、遗传转化生产银杏黄酮和银杏内酯第17-20页
        2.1 银杏组织培养与银杏黄酮生产的研究第18-19页
        2.2 银杏组织培养与银杏内酯生产的研究第19页
        2.3 利用发根农杆菌遗传转化生产银杏黄酮和银杏内酯第19-20页
    3 小结与展望第20-22页
第二章 开花基因研究进展第22-27页
    1 控制植物花发育过程的基因研究第22-24页
        1.1 控制开花时间基因第23页
        1.2 花分生组织特征基因第23-24页
        1.3 花器官特征基因第24页
        1.4 定域基因第24页
    2 LEAFY基因与其同源基因的研究第24-27页
        2.1 LEAFY(LFY)基因是植物成花启动基因第24-26页
        2.2 LFY同源基因的研究第26-27页
第三章 立论依据与研究内容第27-31页
    1 立论依据与目的意义第27-28页
    2 研究目标和内容第28-29页
    3 技术路线第29-31页
第四章 银杏组织培养与再生体系的建立第31-44页
    1 材料与方法第31-33页
        1.1 材料第31-32页
            1.1.1 植物材料第31-32页
            1.1.2 药品第32页
        1.2 方法第32-33页
            1.2.1 愈伤组织和胚状体的诱导第32-33页
                1.2.1.1 胚乳愈伤组织诱导第32页
                1.2.1.2 成熟胚和未成熟胚子叶、胚轴愈伤组织和胚状体的诱导第32页
                1.2.1.3 不同大小成熟胚和未成熟胚愈伤组织和胚状体的诱导第32-33页
                1.2.1.4 不同采收期的未成熟胚愈伤组织和胚状体的诱导第33页
            1.2.2 胚状体的生长发育第33页
        1.3 培养条件第33页
    2 结果与分析第33-40页
        2.1 愈伤组织和胚状体的诱导第33-39页
            2.1.1 胚乳愈伤组织的诱导第33-34页
            2.1.2 成熟胚和未成熟胚子叶、胚轴愈伤组织和胚状体的诱导第34-36页
                2.1.2.1 成熟胚和未成熟胚子叶、胚轴愈伤组织诱导第34-35页
                2.1.2.2 成熟胚和未成熟胚子叶、胚轴胚状体的诱导第35-36页
            2.1.3 不同大小成熟胚和未成熟胚愈伤组织和胚状体的诱导第36-38页
                2.1.3.1 不同大小成熟胚和未成熟胚愈伤组织的诱导第36页
                2.1.3.2 不同大小成熟胚和未成熟胚胚状体的诱导第36-37页
                2.1.3.3 暗培养和光培养对未成熟胚愈伤组织和胚状体诱导的影响第37-38页
            2.1.4 不同采收期的未成熟胚愈伤组织和胚状体的诱导第38-39页
        2.2 活性炭、蔗糖、椰汁对胚状体成苗的影响第39-40页
            2.2.1 活性炭对胚状体生长发育的影响第39页
            2.2.2 蔗糖对胚状体生长发育的影响第39-40页
            2.2.3 椰汁对胚状体生长发育的影响第40页
    3 讨论第40-44页
第五章 木本裸子植物RNA提取方法的改良第44-52页
    1 材料与方法第44-47页
        1.1 材料第44-46页
            1.1.1 植物材料第44页
            1.1.2 主要试剂及配制方法第44-45页
            1.1.3 溶液和设备处理第45-46页
        1.2 方法第46页
        1.3 RNA质量检测第46-47页
            1.3.1 琼脂糖凝胶电泳检测第46页
            1.3.2 紫外分光光度分析第46页
            1.3.3 cDNA合成第46-47页
            1.3.4 Northern杂交检测第47页
    2 结果与分析第47-50页
        2.1 琼脂糖凝胶电泳检测第47-48页
        2.2 紫外分光光度分析第48-49页
        2.3 RT-PCR检测第49页
        2.4 Northern杂交检测第49-50页
    3 讨论第50-52页
第六章 银杏LEAFY同源基因的时空表达第52-61页
    1 材料与方法第52-56页
        1.1 材料第52-53页
            1.1.1 植物材料第52页
            1.1.2 引物合成第52-53页
            1.1.3 试剂第53页
            1.1.4 仪器第53页
        1.2 方法第53-56页
            1.2.1 总RNA的提取第53页
            1.2.2 电泳,转膜第53-54页
            1.2.3 PCR反应第54页
            1.2.4 测序分析第54-55页
            1.2.5 探针制备和Northern杂交第55-56页
    2 结果与分析第56-59页
        2.1 不同器官Ginlfy基因的表达第57页
        2.2 不同时期的雄花芽、雌花芽Ginlfy基因的表达第57-58页
        2.3 不同器官GinNdly基因的表达第58-59页
        2.4 不同时期雄花芽、雌花芽GinNdly基因的表达第59页
    3 讨论第59-61页
第七章 银杏遗传转化的研究第61-72页
    1 材料与方法第61-65页
        1.1 材料第61-62页
            1.1.1 植物材料第61页
            1.1.2 化学试剂第61页
            1.1.3 酶及生物试剂第61-62页
            1.1.4 菌种及质粒第62页
        1.2 方法第62-65页
            1.2.1 PDC202质粒的农杆菌转化第62-63页
                1.2.1.1 农杆菌感受态制备第62页
                1.2.1.2 PDC202质粒的农杆菌转化第62页
                1.2.1.3 农杆菌及农杆菌中PDC202质粒鉴定第62-63页
            1.2.2 愈伤组织对卡那霉素的敏感性第63页
            1.2.3 农杆菌活化和转化第63-64页
                1.2.3.1 农杆菌菌株和共培养时间对转化的影响第64页
                1.2.3.2 菌液浓度和共培养时间对转化的影响第64页
                1.2.3.3 乙酰丁香酮对转化的影响第64页
                1.2.3.4 抽真空时间对转化的影响第64页
            1.2.4 抗性愈伤组织的PCR及Southern杂交检测第64-65页
                1.2.4.1 愈伤组织DNA快速提取第64-65页
                1.2.4.2 PCR鉴定第65页
                1.2.4.3 Southern检测第65页
    2 结果与分析第65-71页
        2.1 农杆菌转化第65-67页
        2.2 愈伤组织对卡那霉素的敏感性第67页
        2.3 农杆菌菌株和共培养时间转化的影响第67-68页
        2.4 菌液浓度和共培养时间对转化的影响第68-69页
        2.5 乙酰丁香酮对转化的影响第69页
        2.6 抽真空时间对转化的影响第69-70页
        2.7 抗性愈伤组织LEAFY基因的PCR检测第70页
        2.8 抗性愈伤组织Southern杂交检测第70-71页
    3 讨论第71-72页
展望和后续研究第72-73页
参考文献第73-82页
Abstract第82页
致谢第84-85页
附录1第85-86页
附录2第86页

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