中文摘要 | 第9-11页 |
缩略语 | 第11-13页 |
第一章 银杏组织培养及其应用研究进展 | 第13-22页 |
1 银杏组织培养 | 第13-17页 |
1.1 茎段分化和腋芽萌发再生植株 | 第13-14页 |
1.2 配子体培养 | 第14-15页 |
1.3 胚培养 | 第15-16页 |
1.4 愈伤组织诱导 | 第16页 |
1.5 褐变的研究 | 第16-17页 |
2 银杏组织培养、遗传转化生产银杏黄酮和银杏内酯 | 第17-20页 |
2.1 银杏组织培养与银杏黄酮生产的研究 | 第18-19页 |
2.2 银杏组织培养与银杏内酯生产的研究 | 第19页 |
2.3 利用发根农杆菌遗传转化生产银杏黄酮和银杏内酯 | 第19-20页 |
3 小结与展望 | 第20-22页 |
第二章 开花基因研究进展 | 第22-27页 |
1 控制植物花发育过程的基因研究 | 第22-24页 |
1.1 控制开花时间基因 | 第23页 |
1.2 花分生组织特征基因 | 第23-24页 |
1.3 花器官特征基因 | 第24页 |
1.4 定域基因 | 第24页 |
2 LEAFY基因与其同源基因的研究 | 第24-27页 |
2.1 LEAFY(LFY)基因是植物成花启动基因 | 第24-26页 |
2.2 LFY同源基因的研究 | 第26-27页 |
第三章 立论依据与研究内容 | 第27-31页 |
1 立论依据与目的意义 | 第27-28页 |
2 研究目标和内容 | 第28-29页 |
3 技术路线 | 第29-31页 |
第四章 银杏组织培养与再生体系的建立 | 第31-44页 |
1 材料与方法 | 第31-33页 |
1.1 材料 | 第31-32页 |
1.1.1 植物材料 | 第31-32页 |
1.1.2 药品 | 第32页 |
1.2 方法 | 第32-33页 |
1.2.1 愈伤组织和胚状体的诱导 | 第32-33页 |
1.2.1.1 胚乳愈伤组织诱导 | 第32页 |
1.2.1.2 成熟胚和未成熟胚子叶、胚轴愈伤组织和胚状体的诱导 | 第32页 |
1.2.1.3 不同大小成熟胚和未成熟胚愈伤组织和胚状体的诱导 | 第32-33页 |
1.2.1.4 不同采收期的未成熟胚愈伤组织和胚状体的诱导 | 第33页 |
1.2.2 胚状体的生长发育 | 第33页 |
1.3 培养条件 | 第33页 |
2 结果与分析 | 第33-40页 |
2.1 愈伤组织和胚状体的诱导 | 第33-39页 |
2.1.1 胚乳愈伤组织的诱导 | 第33-34页 |
2.1.2 成熟胚和未成熟胚子叶、胚轴愈伤组织和胚状体的诱导 | 第34-36页 |
2.1.2.1 成熟胚和未成熟胚子叶、胚轴愈伤组织诱导 | 第34-35页 |
2.1.2.2 成熟胚和未成熟胚子叶、胚轴胚状体的诱导 | 第35-36页 |
2.1.3 不同大小成熟胚和未成熟胚愈伤组织和胚状体的诱导 | 第36-38页 |
2.1.3.1 不同大小成熟胚和未成熟胚愈伤组织的诱导 | 第36页 |
2.1.3.2 不同大小成熟胚和未成熟胚胚状体的诱导 | 第36-37页 |
2.1.3.3 暗培养和光培养对未成熟胚愈伤组织和胚状体诱导的影响 | 第37-38页 |
2.1.4 不同采收期的未成熟胚愈伤组织和胚状体的诱导 | 第38-39页 |
2.2 活性炭、蔗糖、椰汁对胚状体成苗的影响 | 第39-40页 |
2.2.1 活性炭对胚状体生长发育的影响 | 第39页 |
2.2.2 蔗糖对胚状体生长发育的影响 | 第39-40页 |
2.2.3 椰汁对胚状体生长发育的影响 | 第40页 |
3 讨论 | 第40-44页 |
第五章 木本裸子植物RNA提取方法的改良 | 第44-52页 |
1 材料与方法 | 第44-47页 |
1.1 材料 | 第44-46页 |
1.1.1 植物材料 | 第44页 |
1.1.2 主要试剂及配制方法 | 第44-45页 |
1.1.3 溶液和设备处理 | 第45-46页 |
1.2 方法 | 第46页 |
1.3 RNA质量检测 | 第46-47页 |
1.3.1 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第46页 |
1.3.2 紫外分光光度分析 | 第46页 |
1.3.3 cDNA合成 | 第46-47页 |
1.3.4 Northern杂交检测 | 第47页 |
2 结果与分析 | 第47-50页 |
2.1 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第47-48页 |
2.2 紫外分光光度分析 | 第48-49页 |
2.3 RT-PCR检测 | 第49页 |
2.4 Northern杂交检测 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
第六章 银杏LEAFY同源基因的时空表达 | 第52-61页 |
1 材料与方法 | 第52-56页 |
1.1 材料 | 第52-53页 |
1.1.1 植物材料 | 第52页 |
1.1.2 引物合成 | 第52-53页 |
1.1.3 试剂 | 第53页 |
1.1.4 仪器 | 第53页 |
1.2 方法 | 第53-56页 |
1.2.1 总RNA的提取 | 第53页 |
1.2.2 电泳,转膜 | 第53-54页 |
1.2.3 PCR反应 | 第54页 |
1.2.4 测序分析 | 第54-55页 |
1.2.5 探针制备和Northern杂交 | 第55-56页 |
2 结果与分析 | 第56-59页 |
2.1 不同器官Ginlfy基因的表达 | 第57页 |
2.2 不同时期的雄花芽、雌花芽Ginlfy基因的表达 | 第57-58页 |
2.3 不同器官GinNdly基因的表达 | 第58-59页 |
2.4 不同时期雄花芽、雌花芽GinNdly基因的表达 | 第59页 |
3 讨论 | 第59-61页 |
第七章 银杏遗传转化的研究 | 第61-72页 |
1 材料与方法 | 第61-65页 |
1.1 材料 | 第61-62页 |
1.1.1 植物材料 | 第61页 |
1.1.2 化学试剂 | 第61页 |
1.1.3 酶及生物试剂 | 第61-62页 |
1.1.4 菌种及质粒 | 第62页 |
1.2 方法 | 第62-65页 |
1.2.1 PDC202质粒的农杆菌转化 | 第62-63页 |
1.2.1.1 农杆菌感受态制备 | 第62页 |
1.2.1.2 PDC202质粒的农杆菌转化 | 第62页 |
1.2.1.3 农杆菌及农杆菌中PDC202质粒鉴定 | 第62-63页 |
1.2.2 愈伤组织对卡那霉素的敏感性 | 第63页 |
1.2.3 农杆菌活化和转化 | 第63-64页 |
1.2.3.1 农杆菌菌株和共培养时间对转化的影响 | 第64页 |
1.2.3.2 菌液浓度和共培养时间对转化的影响 | 第64页 |
1.2.3.3 乙酰丁香酮对转化的影响 | 第64页 |
1.2.3.4 抽真空时间对转化的影响 | 第64页 |
1.2.4 抗性愈伤组织的PCR及Southern杂交检测 | 第64-65页 |
1.2.4.1 愈伤组织DNA快速提取 | 第64-65页 |
1.2.4.2 PCR鉴定 | 第65页 |
1.2.4.3 Southern检测 | 第65页 |
2 结果与分析 | 第65-71页 |
2.1 农杆菌转化 | 第65-67页 |
2.2 愈伤组织对卡那霉素的敏感性 | 第67页 |
2.3 农杆菌菌株和共培养时间转化的影响 | 第67-68页 |
2.4 菌液浓度和共培养时间对转化的影响 | 第68-69页 |
2.5 乙酰丁香酮对转化的影响 | 第69页 |
2.6 抽真空时间对转化的影响 | 第69-70页 |
2.7 抗性愈伤组织LEAFY基因的PCR检测 | 第70页 |
2.8 抗性愈伤组织Southern杂交检测 | 第70-71页 |
3 讨论 | 第71-72页 |
展望和后续研究 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-82页 |
Abstract | 第82页 |
致谢 | 第84-85页 |
附录1 | 第85-86页 |
附录2 | 第86页 |