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高油脂微藻种质的筛选、鉴定及新品种培育

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
1 前言第14-27页
   ·生物柴油概述第14-15页
   ·国内外制备生物柴油原料第15-16页
   ·微藻生物柴油第16-23页
     ·微藻生物质能源研究进展第16-17页
     ·微藻作为生物柴油原料的优劣势第17-20页
     ·环境因子对微藻生长及油脂积累的影响第20-23页
       ·培养基成分第20-22页
       ·光照强度第22页
       ·温度第22页
       ·pH值第22页
       ·生长期第22-23页
       ·营养方式第23页
   ·微藻中油脂含量的测定第23-24页
   ·微藻育种第24-25页
     ·物理诱变育种第24页
     ·化学诱变育种第24-25页
     ·细胞融合技术第25页
     ·基因工程技术第25页
   ·本研究的目的和意义第25-26页
   ·技术路线第26-27页
2 材料与方法第27-40页
   ·藻种来源及培养第27页
   ·主要仪器与试剂第27-28页
     ·主要仪器第27-28页
     ·主要试剂第28页
   ·常用培养基及试剂配置第28-30页
   ·尼罗红荧光染色法的优化第30-34页
     ·藻株培养第30-31页
     ·Hhw藻细胞密度与OD600值的关系测定第31页
     ·荧光光谱法检测微藻中相对含量第31-32页
       ·尼罗红与二甲基亚砜荧光特性分析第31页
       ·二甲基亚砜对尼罗红染色后藻液细胞发射峰的影响第31-32页
       ·染色时间对藻液细胞荧光强度的影响第32页
       ·尼罗红浓度对藻细胞脂荧光强度和发射光谱的影响第32页
       ·藻液细胞密度对脂荧光强度的影响第32页
     ·多功能酶标仪检测微藻中油脂相对含量第32-34页
       ·尼罗红与二甲基亚砜荧光特性分析第32页
       ·二甲基亚砜对尼罗红染色后藻液细胞脂荧光强度的影响第32-33页
       ·染色时间对藻液细胞荧光强度的影响第33页
       ·尼罗红浓度对藻细胞脂荧光强度和发射光谱的影响第33页
       ·藻液细胞密度对脂荧光强度的影响第33-34页
   ·基于生物柴油原料高含油量微藻的筛选与鉴定第34-37页
     ·荧光显微镜初步筛选高脂微藻第34页
     ·基于生物柴油原料的高通量筛选第34页
     ·高脂微藻的形态学鉴定第34-35页
     ·高脂微藻的分子学鉴定第35-37页
       ·藻株基因组DNA的提取第35页
       ·藻株18SrDNA的PCR扩增和核酸序列测定第35-36页
       ·核酸序列生物信息学分析和系统树构建第36-37页
     ·筛选得到藻株生物特性分析第37页
   ·影响微藻油脂积累的培养条件的优化第37-38页
     ·藻株培养第37页
     ·比平均生长速率的计算第37页
     ·微藻油脂相对含量的测定方法第37页
     ·氮浓度对藻株生长及油脂积累的影响第37页
     ·初始pH值对藻株生长及油脂积累的影响第37-38页
     ·缺Fe~(2+)、Ca~(2+)、Mg~(2+)对藻株生长及油脂积累的影响第38页
   ·微藻的诱变育种第38-40页
     ·紫外线诱变预试验第38页
     ·微藻紫外线诱变第38页
     ·高含油量突变株的筛选第38-39页
     ·高含油量突变株的鉴定第39-40页
3 结果与讨论第40-66页
   ·尼罗红荧光染色法的优化第40-49页
     ·Hhw藻液OD_(600)值与细胞密度的相关性第40页
     ·尼罗红与二甲基亚砜荧光特性分析第40-41页
     ·二甲基亚砜对尼罗红染色后藻液细胞发射峰的影响第41页
     ·染色时间对藻液细胞荧光强度的影响第41-42页
     ·尼罗红浓度对藻细胞脂荧光强度和发射光谱的影响第42-46页
     ·藻液细胞密度对脂荧光强度的影响第46-47页
     ·讨论第47-49页
   ·基于生物柴油原料高含油量微藻的筛选与鉴定第49-57页
     ·荧光显微镜尼罗红染色法筛选含油藻株第49-50页
     ·高通量筛选基于生物柴油原料的高含油微藻第50-51页
     ·La4-37的形态学和分子鉴定第51-52页
     ·La4-37藻株18S rDNA的扩增和系统发育分析第52-53页
     ·La4-37生物特性分析第53-55页
     ·讨论第55-57页
   ·影响微藻油脂积累的培养条件的优化第57-60页
     ·初始氮浓度对藻株La4-37生长及油脂积累的影响第57-58页
     ·初始pH值对藻株La4-37生长及油脂积累的影响第58-59页
     ·缺Fe~(2+)、Ca~(2+)、Mg(2+)对藻株生长及油脂积累的影响第59页
     ·讨论第59-60页
   ·微藻的紫外线诱变育种第60-66页
     ·紫外线诱变剂量的确定第60-61页
     ·诱变藻株的筛选第61-62页
     ·原始株和诱变株生长及油脂积累的比较第62-64页
     ·讨论第64-66页
4 总结与展望第66-68页
   ·总结第66-67页
   ·展望第67-68页
参考文献第68-77页
致谢第77页

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