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茄科青枯菌致病力丧失相关基因的功能研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
1 前言第15-33页
    1.1 茄科青枯菌分布及其危害第15-16页
        1.1.1 茄科青枯菌分布第15页
        1.1.2 茄科青枯菌危害第15-16页
    1.2 茄科青枯菌特性第16-21页
        1.2.1 茄科青枯菌侵染特性第16-18页
        1.2.2 植物发病症状第18页
        1.2.3 病原菌传统分类及演化型分类框架第18-21页
    1.3 青枯菌致病相关因子第21-26页
        1.3.1 Ⅲ型分泌系统及其效应子第21-24页
        1.3.2 胞外多糖第24页
        1.3.3 细胞壁降解酶(CWDE)相关基因第24页
        1.3.4 运动性第24-25页
        1.3.5 青枯菌解毒基因第25-26页
    1.4 青枯菌群体感应下的表型转化第26-30页
        1.4.1 群体感应机制第26-27页
        1.4.2 青枯菌表型转化第27-30页
    1.5 青枯菌基因组学第30-32页
        1.5.1 青枯菌的基因组基本特征第30页
        1.5.2 青枯菌全基因组第30-32页
        1.5.3 基因水平转移与前噬菌体的作用第32页
    1.6 沙姜青枯病菌第32-33页
    1.7 本研究的目的及意义第33页
2 材料与方法第33-52页
    2.1 实验材料第33-38页
        2.1.1 菌株、质粒、引物及寄主植物第33-35页
        2.1.2 试剂、培养基和缓冲液第35-38页
    2.2 主要仪器第38-39页
    2.3 青枯菌菌株YC40-W、YC40-M重测序分析第39-40页
    2.4 青枯菌YC40-M基因组测序第40-42页
        2.4.1 基因组DNA提取第40页
        2.4.2 基因组序列测定及分析第40-42页
    2.5 自杀质粒构建第42-47页
        2.5.1 PhcA基因自杀质粒构建第42-45页
        2.5.2 ParA2基因自杀质粒构建第45页
        2.5.3 RSp801、RSp931、RSc2202基因自杀质粒构建第45-47页
    2.6 青枯菌YC40感受态细胞的制备及电击转化第47页
    2.7 突变体筛选及鉴定第47-49页
        2.7.1 PhcA基因突变体筛选及鉴定第47-48页
        2.7.2 ParA2基因突变体筛选及鉴定第48页
        2.7.3 RSp801、RSp931、RSc2202基因突变菌株的筛选及鉴定第48-49页
    2.8 基因功能互补菌株的筛选和鉴定第49页
        2.8.1 PhcA基因功能互补菌株的的筛选和鉴定第49页
        2.8.2 ParA2基因功能互补菌株的的筛选和鉴定第49页
        2.8.3 RSp801、RSp931、RSc2202基因功能互补菌株的的筛选和鉴定第49页
    2.9 基因的功能分析第49-52页
        2.9.1 PhcA基因功能分析第49-52页
        2.9.2 ParA2基因功能分析第52页
        2.9.3 RSp801、RSp931、RSc2202基因功能分析第52页
3 结果与分析第52-92页
    3.1 青枯菌YC40-W、YC40-M重测序结果第52-54页
    3.2 青枯菌YC40-M基因组测序结果第54-61页
        3.2.1 原始测序数据质控第54-55页
        3.2.2 测序数据统计第55-56页
        3.2.3 基因组组装第56页
        3.2.4 基因预测结果第56-57页
        3.2.5 基因注释第57-60页
        3.2.6 基因组特征第60-61页
    3.3 PhcA基因功能分析第61-72页
        3.3.1 青枯菌YC40 PhcA突变体的构建和验证第61-63页
        3.3.2 YC40ΔPhcA菌株表型特征第63-64页
        3.3.3 YC40 PhcA基因缺失突变体功能互补第64-65页
        3.3.4 YC40ΔPhcA与YC40-M生物学测定第65-69页
        3.3.5 YC40ΔPhcA、YC40-M致病性测定结果第69页
        3.3.6 YC40ΔPhcA及YC40-W菌株寄主范围测定结果第69-72页
    3.4 Par A2基因功能分析第72-77页
        3.4.1 青枯菌YC40菌株ParA2突变体的构建结果第72页
        3.4.2 YC40 ParA2基因缺失突变体功能互补第72-73页
        3.4.3 ParA2突变体生物学试验结果第73-76页
        3.4.4 突变体对沙姜的致病性分析结果第76-77页
    3.5 基因RSp801、RSp931和RSc2202的功能分析第77-92页
        3.5.1 基因生物信息学分析结果第77-78页
        3.5.2 RSp801、RSp931、RSc2202基因自杀质粒和突变菌株筛选验证第78-79页
        3.5.3 3个基因突变体功能互补第79页
        3.5.4 YC40Δ801 突变体生物学特性第79-82页
        3.5.5 YC40Δ801 突变体对沙姜的致病性分析第82-83页
        3.5.6 YC40Δ931 突变体生物学特性第83-86页
        3.5.7 YC40Δ931 突变体对沙姜的致病性分析第86-87页
        3.5.8 YC40Δ2202 突变体生物学特性第87-90页
        3.5.9 YC40Δ2202 突变体对沙姜的致病性分析第90-92页
4 结论与讨论第92-99页
    4.1 重测序分析青枯菌YC40自然致病力丧失突变体及其野生型全基因组第92-93页
    4.2 青枯菌YC40自然致病力丧失突变体基因组序列特征第93-95页
    4.3 青枯菌Phc A基因的功能第95-97页
    4.4 YC40菌株自然致病力丧失突变体与PhcA基因缺失突变体的差异第97页
    4.5 YC40菌株Par A2基因的功能第97-98页
    4.6 YC40菌株RSp801、RSp931和RSc2202基因的功能第98-99页
    4.7 5个基因的互补试验第99页
5 总结论与未来研究建议第99-101页
    5.1 总结论第99-100页
    5.2 未来研究建议第100-101页
致谢第101-103页
参考文献第103-113页

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