摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
缩略词表 | 第5-8页 |
1 前言 | 第8-18页 |
1.1 植物蔗糖转运蛋白及其分类 | 第9-18页 |
1.1.1 蔗糖转运蛋白结构 | 第9页 |
1.1.2 蔗糖转运蛋白的分类 | 第9-15页 |
1.1.3 植物蔗糖转运蛋白的功能及定位 | 第15-18页 |
2 材料与方法 | 第18-33页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第18页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第18页 |
2.1.3 酶及主要试剂 | 第18页 |
2.1.4 主要仪器及软件 | 第18-19页 |
2.2 拟南芥种植与杂交方法 | 第19页 |
2.2.1 拟南芥种植方法 | 第19页 |
2.2.2 拟南芥杂交方法 | 第19页 |
2.3 拟南芥单突变体鉴定 | 第19-23页 |
2.3.1 suc4、psal各单突变体鉴定原理 | 第19-21页 |
2.3.2 拟南芥双突变体的鉴定 | 第21-22页 |
2.3.3 PCR引物设计 | 第22页 |
2.3.4 单突变体的鉴定 | 第22-23页 |
2.4 拟南芥总RNA的提取 | 第23-24页 |
2.5 Real-Time PCR | 第24-26页 |
2.6 蔗糖转运蛋白转运活性检测 | 第26-33页 |
2.6.1 重组载体的构建 | 第26-29页 |
2.6.2 质粒提取 | 第29-30页 |
2.6.3 电转化 | 第30-31页 |
2.6.4 荧光试验 | 第31-33页 |
3 结果与分析 | 第33-51页 |
3.1 拟南芥suc4p/psal双突变体的创制 | 第33-40页 |
3.1.1 suc4、psal各单突变体鉴定 | 第33页 |
3.1.2 测序检测SUC4基因 | 第33-34页 |
3.1.3 F1代植株的PCR鉴定 | 第34页 |
3.1.4 双突变体F2代植株的PCR鉴定 | 第34-39页 |
3.1.5 双突变体表型分析 | 第39-40页 |
3.2 拟南芥不同突变体SUC4、PSAL的表达分析 | 第40-43页 |
3.3 蔗糖转运蛋白转运活性检测 | 第43-51页 |
3.3.1 验证酵母基因型 | 第43-44页 |
3.3.2 构建重组酵母 | 第44-47页 |
3.3.3 转运活性检测 | 第47-51页 |
4 结论与讨论 | 第51-55页 |
4.1 结论 | 第51页 |
4.2 讨论 | 第51-55页 |
4.2.1 拟南芥SUC4功能 | 第51-52页 |
4.2.2 AtSUC4与AtPsaL互作关系 | 第52-53页 |
4.2.3 蔗糖转运蛋白转运活性试验 | 第53-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
附录A:CS93419与ATSUC4测序比对结果图 | 第61-66页 |
附录B:JCSUT1、JCSUT3、JCSUT4 CDS核苷酸序列 | 第66-68页 |