缩略语表 | 第6-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
前言 | 第16-17页 |
文献回顾 | 第17-28页 |
第一部分 转录因子POU4F1在恶性黑素瘤细胞系和组织中的表达及意义 | 第28-42页 |
1 材料 | 第28-32页 |
1.1 主要仪器 | 第28-29页 |
1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
1.3 实验溶液配方 | 第30-32页 |
1.4 研究对象 | 第32页 |
1.5 其他材料 | 第32页 |
2 方法 | 第32-38页 |
2.1 原代黑素细胞、黑素细胞系、黑素瘤细胞系、色素痣组织以及恶性黑素瘤组织中POU4F1 mRNA水平的检测 | 第32-36页 |
2.2 原代黑素细胞、黑素细胞系、黑素瘤细胞系、色素痣组织以及恶性黑素瘤组织中POU4F1蛋白水平的检测 | 第36-38页 |
3 结果 | 第38-40页 |
3.1 Real-time PCR检测POU4F1在原代黑素细胞、黑素细胞细胞系、黑素瘤细胞系中mRNA水平的表达量 | 第38页 |
3.2 Western blot检测POU4F1在原代黑素细胞、黑素细胞细胞系、黑素瘤细胞系中蛋白水平的表达量 | 第38-39页 |
3.3 Real-time PCR检测POU4F1在色素痣组织和恶性黑素瘤组织中mRNA水平的表达量 | 第39-40页 |
3.4 Western blot检测POU4F1在色素痣组织和恶性黑素瘤组织中蛋白水平的表达量 | 第40页 |
4 讨论 | 第40-42页 |
第二部分 转录因子POU4F1在黑素瘤细胞中的作用研究 | 第42-55页 |
1 材料 | 第42-47页 |
1.1 主要仪器 | 第42-43页 |
1.2 主要实验试剂 | 第43-44页 |
1.3 实验溶液配方 | 第44-46页 |
1.4 研究对象 | 第46页 |
1.5 其他材料 | 第46-47页 |
2 方法 | 第47-50页 |
2.1 细胞系培养 | 第47页 |
2.2 质粒转化 | 第47页 |
2.3 质粒扩增及提取 | 第47-48页 |
2.4 质粒转染 | 第48页 |
2.5 细胞增殖检测 | 第48页 |
2.6 免疫荧光检测细胞内Ki67表达 | 第48-49页 |
2.7 细胞凋亡检测 | 第49页 |
2.8 细胞迁移实验 | 第49-50页 |
3 结果 | 第50-53页 |
3.1 过表达质粒转染对黑素瘤Hs294T和A2058细胞系中POU4F1表达的影响 | 第50-51页 |
3.2 POU4F1过表达对黑素瘤Hs 294T和A2058细胞增殖的影响 | 第51-52页 |
3.3 POU4F1过表达对黑素瘤Hs 294T和A2058细胞凋亡的影响 | 第52-53页 |
3.4 POU4F1过表达对黑素瘤Hs 294T和A2058细胞迁移的影响 | 第53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
第三部分 转录因子POU4F1促黑素瘤细胞增殖机制的初步探讨 | 第55-66页 |
1 材料 | 第55-59页 |
1.1 主要仪器设备 | 第55-56页 |
1.2 主要试剂 | 第56-57页 |
1.3 实验溶液配方 | 第57-59页 |
1.4 其他材料 | 第59页 |
2 方法 | 第59-60页 |
2.1 ERK抑制剂溶解方法 | 第59页 |
2.2 Western blot检测蛋白水平表达量 | 第59-60页 |
2.3 克隆形成实验 | 第60页 |
3 结果 | 第60-64页 |
3.1 POU4F1过表达对MAPK通路中ERK活性的影响克隆形成实验 | 第60-61页 |
3.2 克隆形成实验检测ERK抑制剂对POU4F1促增殖作用的影响 | 第61-62页 |
3.3 POU4F1过表达对MAPK通路关键基因mRNA水平的影响 | 第62-63页 |
3.4 POU4F1过表达对MAP2K2基因蛋白水平的影响 | 第63页 |
3.5 MAP2K2基因启动子区POU4F1结合位点 | 第63-64页 |
4 讨论 | 第64-66页 |
小结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
个人简历和研究成果 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |