| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第9-16页 |
| 1.1 引言 | 第9页 |
| 1.2 嗜热菌概述 | 第9-10页 |
| 1.3 α-葡萄糖苷酶概述 | 第10-11页 |
| 1.4 α-葡萄糖苷酶的理化性质 | 第11页 |
| 1.5 α-葡萄糖苷酶的催化机制 | 第11-13页 |
| 1.6 α-葡萄糖苷酶的结构和功能 | 第13页 |
| 1.7 α-葡萄糖苷酶的应用 | 第13-14页 |
| 1.8 α-葡萄糖苷酶的研究状况 | 第14页 |
| 1.9 本课题研究的意义与研究内容 | 第14-16页 |
| 第二章 α-葡萄糖苷酶基因克隆及原核表达系统的构建 | 第16-30页 |
| 2.1 引言 | 第16页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第16-20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-25页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第25-29页 |
| 2.4.1 基因组提取结果 | 第25页 |
| 2.4.2 感受态制备结果 | 第25-26页 |
| 2.4.3 目的基因tcur-1739 和amyS的扩增结果 | 第26-27页 |
| 2.4.4 质粒pET-21a和pET-28a的双酶切及回收 | 第27页 |
| 2.4.5 重组质粒的构建及鉴定 | 第27-29页 |
| 2.5 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 α-葡萄糖苷酶Tcur-1739 和AmyS的表达、表达条件优化、纯化及酶活测定 | 第30-43页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 实验仪器与材料 | 第30-31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31-36页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第36-42页 |
| 3.4.1 目的蛋白的SDS-PAGE | 第36-37页 |
| 3.4.2 蛋白浓度测定 | 第37页 |
| 3.4.3 目的蛋白酶活测定 | 第37-38页 |
| 3.4.4 诱导温度对工程菌表达目的蛋白水平的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.5 IPTG浓度对工程菌表达目的蛋白水平的影响 | 第39-40页 |
| 3.4.6 α-葡萄糖苷酶Tcur-1739 和AmyS的纯化结果 | 第40-42页 |
| 3.5 小结 | 第42-43页 |
| 第四章 α-葡萄糖苷酶Tcur-1739 和AmyS的酶学性质表征 | 第43-54页 |
| 4.1 引言 | 第43-44页 |
| 4.2 实验仪器与材料 | 第44页 |
| 4.3 实验方法 | 第44-45页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第45-53页 |
| 4.4.1 最适pH的测定结果 | 第45-46页 |
| 4.4.2 最适反应温度的测定结果 | 第46-47页 |
| 4.4.3 热稳定性测定结果 | 第47页 |
| 4.4.4 pH稳定性测定结果 | 第47-48页 |
| 4.4.5 有机溶剂对酶稳定性的影响 | 第48-49页 |
| 4.4.6 金属离子对酶活性的影响 | 第49-50页 |
| 4.4.7 底物特异性的测定 | 第50-51页 |
| 4.4.8 酶反应动力学常数测定结果 | 第51-53页 |
| 4.5 小结 | 第53-54页 |
| 全文总结与展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
