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胁迫条件对Dunaliella tertiolecta油脂合成的调控及关键酶基因表达的影响

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 绪论第13-29页
    1.1 微藻生物柴油第13-14页
        1.1.1 微藻生物柴油概述第13-14页
    1.2 微藻生物柴油的生产第14-17页
        1.2.1 微藻的收集第14-15页
        1.2.2 藻细胞的破碎第15-16页
        1.2.3 油脂的提取第16页
        1.2.4 生物柴油的转化第16-17页
    1.3 提高微藻油脂产量的研究第17-27页
        1.3.1 高含油量微藻的筛选第17-18页
        1.3.2 生化调控的方法第18-21页
        1.3.3 基因和代谢调控第21-27页
    1.4 本论文的研究内容和意义第27-29页
第二章 培养基关键元素的筛选与优化第29-49页
    2.1 前言第29页
    2.2 实验材料与仪器第29-31页
        2.2.1 藻种及培养基第29-30页
        2.2.2 主要试剂及仪器第30-31页
    2.3 实验方法第31-34页
        2.3.1 杜氏藻的培养第31页
        2.3.2 生长曲线与生物量的测定第31页
        2.3.3 叶绿素含量的测定第31页
        2.3.4 氯仿-甲醇提取法第31-32页
        2.3.5 油脂甲酯化第32页
        2.3.6 GC-MS分析第32页
        2.3.7 气相色谱分析第32页
        2.3.8 培养条件优化实验设计第32-33页
        2.3.9 数学模型模拟分析第33-34页
    2.4 实验结果与分析讨论第34-47页
        2.4.1 七个杜氏藻种的生长速率、叶绿素、油脂含量及其脂肪酸组成第34-36页
        2.4.2 不同营养条件对藻生长和总油脂积累的影响第36-39页
        2.4.3 关键营养素的筛选第39-41页
        2.4.4 关键营养素的响应面优化第41-45页
        2.4.5 关键营养素对脂肪酸组成的影响第45-47页
    2.5 本章小结第47-49页
第三章 微藻油脂提取方法的响应面优化第49-63页
    3.1 前言第49页
    3.2 实验材料与仪器第49页
    3.3 实验方法第49-51页
        3.3.1 藻的培养第49页
        3.3.2 藻生物量的测定第49页
        3.3.3 藻油脂的提取第49页
        3.3.4 微藻油脂提取工艺优化第49-51页
    3.4 结果与讨论第51-61页
        3.4.1 单因素实验结果第51-53页
        3.4.2 提取工艺的响应面优化第53-61页
    3.5 本章小结第61-63页
第四章 不同培养条件下中性脂肪的积累及其他生理响应的变化第63-83页
    4.1 前言第63-64页
    4.2 实验材料与仪器第64页
    4.3 实验方法第64-67页
        4.3.1 藻的培养第64页
        4.3.2 叶绿素测定第64页
        4.3.3 油脂提取第64页
        4.3.4 TLC分析第64-65页
        4.3.5 流式细胞仪测定第65页
        4.3.6 荧光显微镜观察方法第65页
        4.3.7 苹果酸酶同工酶电泳分析第65-67页
    4.4 实验结果与分析讨论第67-81页
        4.4.1 不同培养条件对色素组成的影响第67-70页
        4.4.2 不同诱导条件下Dunaliella tertiolecta的中性脂肪累积情况第70-77页
        4.4.3 不同诱导条件下Dunaliella tertiolecta的细胞形态变化第77-79页
        4.4.4 不同诱导条件下的苹果酸酶同工酶图谱第79-81页
    4.5 本章小结第81-83页
第五章 氮、磷缺乏及盐度对ACL、ACS基因表达的影响第83-113页
    5.1 前言第83页
    5.2 实验材料与仪器第83-84页
        5.2.1 藻种及菌种第83页
        5.2.2 生化试剂第83-84页
        5.2.3 主要仪器第84页
    5.3 实验方法第84-97页
        5.3.1 藻的培养第84页
        5.3.2 总RNA的提取与RT-PCR第84-85页
        5.3.3 ATP-Citrate Lyase两个亚基ACLA与ACLB cDNA的克隆第85-93页
        5.3.4 目的条带的回收、克隆、转化与筛选第93-95页
        5.3.5 生物信息学分析第95-96页
        5.3.6 氮、磷缺乏处理及盐度对DtACLA、DtACLB、ACS基因转录水平的影响第96-97页
        5.3.7 统计分析第97页
    5.4 实验结果与分析讨论第97-112页
        5.4.1 DtaclA、DtaclB的cDNA及基因全长克隆第97-102页
        5.4.2 DtACLA与DtACLB的生物信息学分析第102-110页
        5.4.3 Dunaliella tertiolecta的ACS与ACL基因荧光PCR结果第110-112页
    5.5 本章小结第112-113页
结论与展望第113-116页
    结论第113-114页
    创新点第114-115页
    展望第115-116页
参考文献第116-133页
攻读博士学位期间取得的研究成果第133-135页
致谢第135-136页
答辩委员会对论文的评定意见第136页

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