摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第13-29页 |
1.1 微藻生物柴油 | 第13-14页 |
1.1.1 微藻生物柴油概述 | 第13-14页 |
1.2 微藻生物柴油的生产 | 第14-17页 |
1.2.1 微藻的收集 | 第14-15页 |
1.2.2 藻细胞的破碎 | 第15-16页 |
1.2.3 油脂的提取 | 第16页 |
1.2.4 生物柴油的转化 | 第16-17页 |
1.3 提高微藻油脂产量的研究 | 第17-27页 |
1.3.1 高含油量微藻的筛选 | 第17-18页 |
1.3.2 生化调控的方法 | 第18-21页 |
1.3.3 基因和代谢调控 | 第21-27页 |
1.4 本论文的研究内容和意义 | 第27-29页 |
第二章 培养基关键元素的筛选与优化 | 第29-49页 |
2.1 前言 | 第29页 |
2.2 实验材料与仪器 | 第29-31页 |
2.2.1 藻种及培养基 | 第29-30页 |
2.2.2 主要试剂及仪器 | 第30-31页 |
2.3 实验方法 | 第31-34页 |
2.3.1 杜氏藻的培养 | 第31页 |
2.3.2 生长曲线与生物量的测定 | 第31页 |
2.3.3 叶绿素含量的测定 | 第31页 |
2.3.4 氯仿-甲醇提取法 | 第31-32页 |
2.3.5 油脂甲酯化 | 第32页 |
2.3.6 GC-MS分析 | 第32页 |
2.3.7 气相色谱分析 | 第32页 |
2.3.8 培养条件优化实验设计 | 第32-33页 |
2.3.9 数学模型模拟分析 | 第33-34页 |
2.4 实验结果与分析讨论 | 第34-47页 |
2.4.1 七个杜氏藻种的生长速率、叶绿素、油脂含量及其脂肪酸组成 | 第34-36页 |
2.4.2 不同营养条件对藻生长和总油脂积累的影响 | 第36-39页 |
2.4.3 关键营养素的筛选 | 第39-41页 |
2.4.4 关键营养素的响应面优化 | 第41-45页 |
2.4.5 关键营养素对脂肪酸组成的影响 | 第45-47页 |
2.5 本章小结 | 第47-49页 |
第三章 微藻油脂提取方法的响应面优化 | 第49-63页 |
3.1 前言 | 第49页 |
3.2 实验材料与仪器 | 第49页 |
3.3 实验方法 | 第49-51页 |
3.3.1 藻的培养 | 第49页 |
3.3.2 藻生物量的测定 | 第49页 |
3.3.3 藻油脂的提取 | 第49页 |
3.3.4 微藻油脂提取工艺优化 | 第49-51页 |
3.4 结果与讨论 | 第51-61页 |
3.4.1 单因素实验结果 | 第51-53页 |
3.4.2 提取工艺的响应面优化 | 第53-61页 |
3.5 本章小结 | 第61-63页 |
第四章 不同培养条件下中性脂肪的积累及其他生理响应的变化 | 第63-83页 |
4.1 前言 | 第63-64页 |
4.2 实验材料与仪器 | 第64页 |
4.3 实验方法 | 第64-67页 |
4.3.1 藻的培养 | 第64页 |
4.3.2 叶绿素测定 | 第64页 |
4.3.3 油脂提取 | 第64页 |
4.3.4 TLC分析 | 第64-65页 |
4.3.5 流式细胞仪测定 | 第65页 |
4.3.6 荧光显微镜观察方法 | 第65页 |
4.3.7 苹果酸酶同工酶电泳分析 | 第65-67页 |
4.4 实验结果与分析讨论 | 第67-81页 |
4.4.1 不同培养条件对色素组成的影响 | 第67-70页 |
4.4.2 不同诱导条件下Dunaliella tertiolecta的中性脂肪累积情况 | 第70-77页 |
4.4.3 不同诱导条件下Dunaliella tertiolecta的细胞形态变化 | 第77-79页 |
4.4.4 不同诱导条件下的苹果酸酶同工酶图谱 | 第79-81页 |
4.5 本章小结 | 第81-83页 |
第五章 氮、磷缺乏及盐度对ACL、ACS基因表达的影响 | 第83-113页 |
5.1 前言 | 第83页 |
5.2 实验材料与仪器 | 第83-84页 |
5.2.1 藻种及菌种 | 第83页 |
5.2.2 生化试剂 | 第83-84页 |
5.2.3 主要仪器 | 第84页 |
5.3 实验方法 | 第84-97页 |
5.3.1 藻的培养 | 第84页 |
5.3.2 总RNA的提取与RT-PCR | 第84-85页 |
5.3.3 ATP-Citrate Lyase两个亚基ACLA与ACLB cDNA的克隆 | 第85-93页 |
5.3.4 目的条带的回收、克隆、转化与筛选 | 第93-95页 |
5.3.5 生物信息学分析 | 第95-96页 |
5.3.6 氮、磷缺乏处理及盐度对DtACLA、DtACLB、ACS基因转录水平的影响 | 第96-97页 |
5.3.7 统计分析 | 第97页 |
5.4 实验结果与分析讨论 | 第97-112页 |
5.4.1 DtaclA、DtaclB的cDNA及基因全长克隆 | 第97-102页 |
5.4.2 DtACLA与DtACLB的生物信息学分析 | 第102-110页 |
5.4.3 Dunaliella tertiolecta的ACS与ACL基因荧光PCR结果 | 第110-112页 |
5.5 本章小结 | 第112-113页 |
结论与展望 | 第113-116页 |
结论 | 第113-114页 |
创新点 | 第114-115页 |
展望 | 第115-116页 |
参考文献 | 第116-133页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第133-135页 |
致谢 | 第135-136页 |
答辩委员会对论文的评定意见 | 第136页 |